【AbMole】柚皮素：肠道缺血再灌注损伤的天然 “护肠者”

在实验室的培养箱里，小肠隐窝上皮细胞（IEC-6）在缺氧缺糖的环境中逐渐失去活力，原本规则的细胞形态变得皱缩扭曲。而当加入从柑橘果实中提取的天然黄酮类化合物 —— 柚皮素（Naringenin）后，这些濒临死亡的细胞仿佛重获生机，线粒体的肿胀程度减轻，细胞膜上的紧密连接蛋白重新开始有序排列。兰州大学的研究团队通过显微镜捕捉到这一神奇变化，首次揭示了柚皮素通过调控 YAP/STAT3 信号轴抑制铁死亡，从而缓解肠缺血再灌注损伤的分子机制。​

一、肠道 “缺血危机”：当血流中断引发连锁反应​

肠缺血再灌注损伤（IRI）是临床危重症领域的一大难题，常见于肠梗阻、创伤、休克等病症。当肠系膜动脉因血栓或压迫导致血流中断，肠道细胞会因缺氧缺糖发生急性损伤，而恢复血流后的 “二次打击” 更会引发剧烈的氧化应激和炎症反应，导致肠黏膜屏障破坏、细菌易位，甚至诱发多器官功能衰竭。据统计，这类患者的重症监护室死亡率高达 30%，而目前临床缺乏特效的干预手段。​

铁死亡作为一种新型程序性细胞死亡方式，近年来成为研究热点。它不同于凋亡或坏死，依赖铁离子介导的脂质过氧化反应，特征是线粒体皱缩、谷胱甘肽（GSH）耗竭和谷胱甘肽过氧化物酶 4（GPX4）失活。在肠 IRI 中，缺血缺氧会导致细胞内铁离子蓄积，激活酰基辅酶 A 合成酶长链家族成员 4（ACSL4），促进多不饱和脂肪酸氧化，最终引发铁死亡级联反应。如何阻断这一通路，成为改善肠 IRI 预后的关键。​

天然产物因其低毒性和多靶点调节优势，逐渐成为疾病干预的新方向。柚皮素作为柑橘类水果的主要活性成分，早已被证实具有抗氧化、抗炎等多种生物活性。前期研究发现，柚皮素能减轻心肌 IRI 和肾 IRI，但在肠道保护中的具体机制，尤其是是否通过调控铁死亡发挥作用，一直未被完全阐明。​

二、从分子到活体：多维度实验揭秘护肠机制​

（一）关键工具：AbMole 助力精准干预​

研究中使用的柚皮素（AbMole，货号 M4000，纯度 > 98.5%）和铁死亡诱导剂 Erastin（AbMole，货号 M2679）为实验提供了可靠保障。柚皮素的高纯度确保了干预效果的稳定性，而 Erastin 作为经典铁死亡诱导剂，能特异性升高细胞内活性氧（ROS）水平，为验证铁死亡通路提供了 “金标准” 工具。​

(±)-Naringenin | 67604-48-2 | AbMole | Naringenine; Salipurol

Erastin | 571203-78-6 | AbMole

（二）体外模型：缺氧缺糖再复氧（OGD/R）模拟缺血损伤​

研究人员首先在 IEC-6 细胞中构建 OGD/R 模型：将细胞置于含 95% 氮气的厌氧箱中培养 3 小时，模拟缺血状态，再恢复正常培养条件 1 小时，重现再灌注损伤。通过 CCK-8 实验发现，柚皮素预处理能显著提高 OGD/R 后细胞活力，其中 75μM 浓度效果最佳，细胞存活率较模型组提升 35%。​

（三）体内模型：肠系膜上动脉夹闭诱导 IRI 小鼠​

8 周龄 C57BL/6 小鼠在麻醉后接受肠系膜上动脉（SMA）夹闭 45 分钟，再灌注 30 分钟，成功构建肠 IRI 模型。灌胃给予柚皮素（50/100mg/kg）7 天后，小鼠肠道组织的 H&E 染色显示，模型组绒毛水肿、上皮脱落严重，而柚皮素干预组黏膜结构明显改善，Chiu’s 评分降低 40%，紧密连接蛋白 ZO-1 和 Occludin 的表达量分别回升 25% 和 30%，提示肠黏膜屏障功能得到保护。​

（四）铁死亡指标检测：从氧化应激到线粒体动态​

通过试剂盒检测发现，IRI 小鼠肠道组织中的铁离子、MDA（脂质过氧化产物）和 ROS 水平显著升高，而 GSH 和 SOD（抗氧化酶）活性下降，柚皮素干预后这些指标均呈反向变化：铁离子浓度降低 20%，MDA 减少 30%，GSH 水平回升 40%。透射电镜（TEM）观察到，模型组线粒体出现嵴断裂、空泡化，而柚皮素组线粒体形态接近正常，证实其对铁死亡特征性线粒体损伤的保护作用。​

（五）信号通路解析：YAP/STAT3 轴的核心作用​

网络药理学分析预测柚皮素可能靶向 Hippo 信号通路，进一步实验发现，IRI 小鼠和 OGD/R 细胞中的 YAP（Yes 相关蛋白）表达显著下调，而柚皮素能激活 YAP，促进其核转位。当使用 YAP 抑制剂 Verteporfin（VP）阻断通路后，柚皮素的保护效应被逆转：细胞活力下降、铁死亡相关蛋白 GPX4 和 SLC7A11 表达降低，ACSL4 升高。免疫共沉淀（Co-IP）和免疫荧光实验证实，YAP 与 STAT3 存在直接相互作用，柚皮素通过抑制 STAT3 磷酸化，阻断其促铁死亡效应。​

三、数据背后的 “护肠密码”：从现象到机制的突破​

（一）铁死亡调控的 “双重阀门”​

柚皮素通过两条途径抑制铁死亡：一方面上调 GPX4 和 SLC7A11（system Xc - 的关键亚基），增强抗氧化能力，减少脂质过氧化；另一方面下调 ACSL4，阻断多不饱和脂肪酸的活化，从源头抑制有毒脂质中间体的生成。在 Erastin 诱导的铁死亡模型中，柚皮素的保护作用被部分逆转，而铁死亡抑制剂 Fer-1 则能协同增强其效果，证实铁死亡通路是其核心靶点。​

（二）YAP/STAT3 信号轴的 “跷跷板效应”​

YAP 作为 Hippo 通路的核心效应因子，在正常肠道上皮中维持细胞增殖和屏障功能。IRI 发生时，YAP 表达下降导致 STAT3 磷酸化激活，后者通过促进 ACSL4 转录，加速铁死亡进程。柚皮素通过直接结合 YAP（分子对接显示结合能达 - 7.5kcal/mol），稳定其蛋白结构，促进核定位，进而抑制 STAT3 磷酸化，形成 “YAP 激活 - STAT3 抑制 - 铁死亡减轻” 的级联反应。​

（三）肠道屏障的 “多重守护”​

除了调控铁死亡，柚皮素还通过增加 ZO-1 和 Occludin 的表达，直接修复紧密连接结构，减少肠道通透性。FITC - 葡聚糖灌胃实验显示，IRI 小鼠血清荧光强度较正常组升高 2 倍，而柚皮素干预组降低 50%，表明肠道屏障功能得到有效维护，这对防止细菌和内毒素入血引发的全身炎症至关重要。​

四、从实验室到临床：天然产物的转化潜力​

（一）安全性优势：药食同源的先天优势​

柚皮素作为日常饮食中常见的天然成分，在实验中展现出良好的生物相容性。连续 7 天灌胃 100mg/kg 柚皮素的小鼠，肝肾功能指标和重要器官组织学检查均无异常，相比传统化疗药物，其副作用风险显著降低，为后续临床应用提供了安全保障。​

（二）多靶点协同：超越单一通路的保护效应​

不同于单药干预的局限性，柚皮素通过 “抗氧化 - 抗铁死亡 - 修复屏障” 的多维度作用，针对 IRI 的复杂病理机制。在分子层面，它既调节铁代谢（降低铁离子蓄积），又重塑氧化还原平衡（提升 GSH/SOD），还能通过 YAP/STAT3 轴调控基因表达，这种 “鸡尾酒式” 效应使其在多种细胞死亡方式交织的 IRI 中更具优势。​

五、未解之谜与未来探索​

尽管取得重要突破，仍有诸多科学问题亟待解答：柚皮素是否通过肠道菌群发挥间接保护作用？YAP/STAT3 轴在不同肠细胞亚群（如潘氏细胞、肠干细胞）中的作用是否存在差异？长期干预对肠道微生态的影响如何？此外，虽然分子对接和 MD 模拟显示柚皮素与 YAP 的结合模式，但在体内心脏、肝脏等器官是否存在类似调控机制，也值得深入研究。​

从基础研究角度，可利用 YAP 条件性敲除小鼠明确其在肠上皮细胞中的特异性作用，结合单细胞测序解析不同细胞类型的响应差异；从应用层面，需开展大动物实验验证药效，优化给药剂量和时机，为临床试验奠定基础。​

在显微镜下，柚皮素分子与 YAP 蛋白的结合位点清晰可见，它们的相互作用如同精密的齿轮，驱动着肠道细胞从死亡走向修复。这项研究不仅揭示了肠 IRI 防治的新靶点，更展现了天然产物在复杂疾病干预中的独特价值。当柑橘的天然成分与现代分子生物学相遇，我们看到的不仅是一个科研成果的诞生，更是人类利用自然馈赠对抗疾病的智慧结晶。