LABORATORIO N° 4

Objetivos
 Reconocer el proceso de metabolismo de las bacterias en diferentes sustratos.
 Identificar cómo fue el crecimiento de las colonias en los diferentes sustratos.
 Materiales y métodos
MATERIALES
 Equipos: Incubadora, Autoclave, Estufa, Mechero Bunsen
 Materiales: Asa Kolle, Desinfectantes.
 Medios de cultivo: Medio TSI, Medio LIA, Agar Citrato, Caldo Peptonado,
Agar Almidón, Agar Gelatina, Agar Mantequila, Agar Quitina.
 Reactivos: Peróxido de Hidrógeno, Tiras de oxidasa y el Reactivo de Kovacs.
 Cultivos biológicos:
MÉTODOS
Método experimental
 Esquema de trabajo
 Fermentación de azúcares

De la colonia seleccionada con el

extremo de la asa kolle en punta
sacamos una muestra.
Sembramos una
sola vez por
picadura profunda.

Y por estrías en la
parte inclinada en
el medio TSI.

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 Utilización de aminoácidos

De la colonia seleccionada
sacamos un pequeño
inóculo y sembramos en el
medio LIA

Introducimos 3 veces el
asa kolle en el espesor
del medio hasta el fondo
del tubo.

Retiramos hacia la
parte inclinada para
sembrar luego por
estrías.

 Utilización de Úrea

Sembramos en el medio Úrea,

introduciendo el asa de kolle
una sola vez en el tubo.

De nuestra colonia seleccionada

sacamos un pequeño inóculo.
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  Utilización de Citrato

De nuestra colonia
seleccionada sacamos un Luego retirar hacia la
pequeño inóculo. parte inclinada para
luego sembrar por
estrías.

Sembramos en el medio Citrato,

introduciendo el asa de kolle una
sola vez hasta el fondo del tubo.

 Producción de Indol

De nuestra colonia
seleccionada se saca
un pequeño inóculo.

Sembramos en el caldo
Sacudiendo varias
Peptonado.
veces hasta el fondo
del tubo.

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  Actividad proteolítica

De la colonia
seleccionada sacamos
un pequeño inóculo.

Sembremos en el
medio Gelatina.

Introducimos el asa de
kolle en punta una sola
vez hasta 1/3 del tubo
de prueba.

 Actividad amilásica

Sacamos un pequeño inóculo de las

colonias señaladas por el profesor y
sembramos en el medio Almidón.

Por medio de pequeñas

estrías en forma diagonal de
tal manera que la siembra se
observe como una línea recta.

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 Sacamos un pequeño inóculo de las
 Actividad lipolítica
colonias señaladas por el profesor y
sembramos en el medio Mantequilla.

Por medio de pequeñas estrías en forma

diagonal de tal manera que la siembra se
observe como una línea recta.

Conclusiones
 Logramos reconocer el proceso de metabolismo de las bacterias en diferentes
sustratos como la catalasa, úrea, citrato, etc.
 Llegamos a identificar en la lectura respectiva cómo fue el crecimiento de las
colonias en los diferentes sustratos con las respectivas características
observadas y guiándonos del manual.
BIBLIOGRAFÍA

 Moeller Ch. G. Y Ferat, T. C. (1993). Manual de Prácticas de Microbiología

Sanitaria. DEPFI.

 Hurst, C., Knudsen, G., McInerney, M., Stetzenbach, L. And Walter, M. Ed.
(1997). Manual de Microbiología. Americana Sociedad de Microbiologia.

 Brooks, G., Butel, J, Jawetz, E., Melnick, J., Orstin, N., Adelberg, E. (1996).
Microbiología Médica. El manual Moderno, México. pp. 110-111

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 LABORATORIO N°5
¿Qué aprendí?
-Aprendimos que la capacidad de aplicar conocimientos microbiológicos en diagnóstico y
control de calidad microbiano, así como interpretación de análisis de laboratorio para
determinar dicha calidad.

-Aprendimos que las condiciones o factores que intervienen de manera directa en el proceso
de división del microorganismo controla su incremento, estos factores o condiciones van a
inhibir al microorganismo desde una forma leve a una letal

-También reconocimos las diferentes formas microbianas presentes en procesos de

tratamiento biológico.

¿Cómo lo aplico a la carrera?

Concientizar al futuro Ingeniero del importante papel que juegan los Microorganismos(M.O.) en la compleja vida
humana, con base en la distribución de éstos en la naturaleza, en sus relaciones recíprocas y con los demás
seres vivos, llegando finalmente a los efectos beneficiosos y/o perjudiciales para el hombre y a las
transformaciones físicas y químicas que ejercen en el medio ambiente.}

A pesar del crítico papel biogeoquímico que juegan los microorganismos en el mantenimiento de la biosfera, el
conocimiento de cómo actúan ellos en suelos, sedimentos y aguas, aún es bastante limitado. A pesar de estas
limitaciones, es importante para el futuro ingeniero ambiental, la evaluación de los microorganismos del suelo,
del agua y de otros ambientes y la discusión de como cambian las propiedades físicas y químicas de dicho
medio modificando finalmente las características del propio ecosistema. Así, es importante entonces el
conocimiento de la biodiversidad de los microorganismos en la naturaleza, la interacción entre ellos, su actividad
y el efecto de esta sobre el ecosistema.
Pueden utilizarse en el diseño y construcción de Biosensores que pueden ser utilizados en la
determinación de analitos de interés ambiental. Un sin número de microorganismos son de
gran utilidad en Biotecnología en la obtención de una gran variedad de productos de interés y
producción de proteína de origen unicelular (Biomasa)

Cuestionario
1) ¿Cuáles son los efectos físicos y químicos…….
Los efectos físicos y químicos más resaltantes son:

A)      Concentración del agente y tiempo de actuación

B)      pH: El pH afecta tanto a la carga superficial neta de la bacteria como al grado

de ionización del agente. En general, las formas ionizadas de los agentes
disociables pasan mejor a través de las membranas biológicas, y por lo tanto son
más efectivos.

Los agentes aniónicos suelen ser más efectivos a pH ácidos.

Los agentes catiónicos muestran más eficacia a pH alcalinos.

C)      Temperatura. Normalmente, al aumentar la temperatura aumenta la potencia

de los desinfectantes. Para muchos agentes la subida de 10 grados supone
duplicar la tasa de muerte.

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 D)      Naturaleza del microorganismo y otros factores asociados a la población
microbiana

según la especie empleada: p. ej., el bacilo tuberculoso resiste los

hipocloritos mejor que otras bacterias;
según la fase de cultivo;
dependiendo de la presencia de cápsulas o de esporas (suelen conferir más
resistencia);
dependiendo del número de microorganismos iniciales.

E)      Presencia de materiales extraños: La existencia de materia orgánica en el

material a tratar (p. ej., sangre, suero, pus) afecta negativamente a la potencia de
los desinfectantes de tipo oxidante (como los hipocloritos) y de tipo
desnaturalizante de proteínas, hasta el punto que pueden llegar a hacerlos
inactivos en cuanto a su poder desinfectante o esterilizante. Por lo tanto, para el
empleo eficaz de muchos desinfectantes hay que contar con este factor,
determinando previamente el gasto de materia orgánica inerte, o calculando la
potencia neta del desinfectante en presencia de la materia orgánica.

2) Explique ¿De qué manera……..

OXÍGENO
No todos los microorganismos necesitan O2, sin embargo, muchas formas de vida,
requieren oxígeno para llevar la respiración aeróbica.
Los microorganismos que utilizan oxígeno molecular son llamados aeróbicos.
Aeróbicos obligados que son los que requiere oxígeno molecular para vivir, y los
aeróbicos facultativos los cuales utilizan el oxígeno molecular cuando esta presente,
pero en su ausencia continúan su crecimiento por la vía de fermentación o respiración
aeróbica.
TEMPERATURA
La temperatura a crecimiento óptimo permite el crecimiento más rápido de las bacterias
durante un periodo de tiempo, usualmente entre 12 a 14 horas. La temperatura mínima
de crecimiento es aquella temperatura menor a la cual la especie puede crecer. La
temperatura de crecimiento máximo es la temperatura mayor en la cual el crecimiento
es posible. Los microorganismos se dividen en 3 grandes grupos en base a su
preferencia de rango de temperatura.

3) Frente a la acción de los antibióticos……

Los antibacteri luchan contra las bacterias infecciosas en el cuerpo. Atacan el proceso
de la enfermedad al destruir la estructura de las bacterias o su capacidad de dividirse o
reproducirse. Los científicos con frecuencia ordenan los antibacterianos por categorías
de la siguiente manera:

 Algunos antibacterianos (por ejemplo, penicilina, cefalosporin) matan las

bacterias absolutamente y se llaman bactericidas. Pueden atacar directamente la

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 pared de la célula bacterial, que lesiona la célula. Las bacterias ya no pueden
atacar al cuerpo, lo que evita que estas células hagan más daño dentro del
cuerpo.

 Otros antibacterianos (por ejemplo, tetraciclina, eritromicina) bloquean el

crecimiento y reproducción de las bacterias. Con frecuencia se llaman
antibióticos bacteriostáticos, evitan que los nutrientes lleguen a la bacteria, lo
que les impide dividirse y multiplicarse. Debido a que se necesitan millones de
bacterias para continuar con el proceso de la enfermedad, estos antibióticos
pueden detener la infección y darle al sistema inmunológico del cuerpo tiempo
para atacar.

4) La alteración del pH….

El pH afecta tanto a la carga superficial neta de la bacteria como al grado de

ionización del agente. En general, las formas ionizadas de los agentes disociables
pasan mejor a través de las membranas biológicas, y por lo tanto son más efectivos.

Los agentes aniónicos suelen ser más efectivos a pH ácidos.

Los agentes catiónicos muestran más eficacia a pH alcalinos

5) Explique…….

Para poder determinar la eficacia antimicrobiana se utilizan técnicas que descubran a los
sobrevivientes, esto se determina generalmente mediante métodos cuantitativos de
siembra en placa en lo que los sobrevivientes se detectan porque forman colonias.
Para establecer los procedimientos de esterilización hay que tener en consideración dos
factores: la tasa de mortalidad y el tamaño de la población inicial.
BIBLIOGRAFÍA
MADIGAN, M.T., Martinko, J.M. y Parker, J. Brock(1997) BIOLOGÍA DE LOS
MICROORGANISMOS . PRENTICE HALL, De. 8a ed. Madrid,

ALEXANDER, Martín. (1994)SOIL MICROBIOLOGY. Jhon Wiley & Sons Inc. De.
E.E.U.U.

MC KINNEY, ROSS E. (1945)Microbiología de Ingeniería Sanitaria. McGraw-Hill

Book Company, Inc., De. N.Y.

PELCZAR, M.J. y Reid, R.A.(1998) MICROBIOLOGÍA. McGraw-Hill, Ed..

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