UNIVERSIDAD NACIONAL AUTÓNOMA DE MÉXICO

FACULTAD DE ESTUDIOS SUPERIORES CUAUTITLÁN

Química Analítica Instrumental

(Prácticas para Farmacia)

Alma Luisa Revilla Vázquez

Berenice Gómez Zaleta
Ma. Gabriela Vargas Martínez
Miriam A. Castillo Rodríguez
Elia Granados Enríquez
UNIVERSIDAD NACIONAL AUTÓNOMA DE MÉXICO

FACULTAD DE ESTUDIOS SUPERIORES CUAUTITLÁN

DEPARTAMENTO DE CIENCIAS QUÍMICAS

Química Analítica Instrumental

(Prácticas para Farmacia)

Asignatura: Química analítica instrumental

Clave: 1640

Carrera: Licenciatura en Farmacia

Clave: 105-40

Autores:

Alma Luisa Revilla Vázquez

Berenice Gómez Zaleta

Ma. Gabriela Vargas Martínez

Miriam A. Castillo Rodríguez

Elia Granados Enríquez

Proyecto PAPIME PE201310

Revisión: 2012
Química Analítica Instrumental (Prácticas para Farmacia)

CONTENIDO Pág.

Introducción 9

Objetivos 9

Calendarización 11

Tabla de prácticas y temas que cubre el programa 13

Sistema de evaluación 13

Reglamento interno de laboratorio 15

Protección personal 17

Diseño experimental 17

PRÁCTICAS 19

Actividades contempladas para la semana 1 21

Actividades contempladas para la semana 2 22

Práctica 1. Determinación cuantitativa de azul de timol mediante 23

una curva de adición patrón
Práctica 2. Determinación cuantitativa de ácido ascórbico (vitamina 31
C) mediante una curva de calibración indirecta
Práctica 3. Determinación cuantitativa de cobre en un jarabe 37
mediante una curva de calibración por espectrofotometría de absorción
atómica
Práctica 4. Determinación de clorhidrato de fenilefrina por HPLC 45

Práctica 5. Determinación de alcohol etílico en enjuague bucal por 53

cromatografía de gases
Práctica 6. Determinación de hidroclorotiazida y captopril en un 61
medicamento por electroforesis capilar
Práctica 7. Determinación potenciométrica de hierro en muestras 71
farmacéuticas (tabletas y jarabe)

7
LICENCIATURA EN FARMACIA
 Química Analítica Instrumental (Prácticas para Farmacia)

Anexos 81

Fuentes consultadas 91

Fichas de seguridad 93

8
LICENCIATURA EN FARMACIA
Química Analítica Instrumental (Prácticas para Farmacia)

Introducción
Es amplia la gama de técnicas instrumentales de análisis con las que se cuenta
en la actualidad y es incesante su desarrollo, por eso es difícil abordarlas en su
totalidad en un curso de licenciatura. Dado lo anterior, es necesario adquirir los
conocimientos de manera general, lo que nos permitirá interpretar y manejar cual-
quiera de esas técnicas.

La mayoría de las técnicas instrumentadas de análisis se basan en una relación

que existe entre la propiedad (absorbancia, índice de refracción, pH, área de pico,
potencial, conductancia, intensidad de corriente, etc.) con la composición del sis-
tema (análisis cualitativo) o bien con la cantidad de alguno de sus componentes
(análisis cuantitativo). Por lo general, algunas de las técnicas se utilizan básica-
mente para el análisis cualitativo, otras más para el análisis cuantitativo y un buen
grupo de ellas puede aplicarse con ambas funciones.

La propiedad no es solamente afectada por la composición del sistema sino tam-

bién por variables como la temperatura, la presión, el tiempo, las perturbaciones
ocasionadas al realizar la medida, la presencia de sustancias químicas interferen-
tes, etcétera; es por esta razón que, si se desea estudiar la relación entre la pro-
piedad y la composición, es necesario ejercer un control efectivo sobre las demás
variables que, además de la composición, afectan la propiedad; todo esto con el fin
de obtener información útil desde el punto de vista analítico.

Este enfoque contribuye a la formación profesional en Química Analítica Instru-

mental y al perfil profesional en su área.

Objetivos
Objetivos generales de la asignatura
Presentar los fundamentos de técnicas como espectroscopía UV / VIS, absorción
atómica, cromatografía de líquidos de alta resolución y de gases, electroforesis ca-
pilar y electroquímica, con base en sus requerimientos instrumentales a fin de que
el alumno sea capaz de aplicarlos en la cuantificación de sustancias utilizadas en
muestras de interés en su área de trabajo, para que así desarrolle las habilidades,
las actitudes y el criterio apropiado para este tipo de mediciones.
9
LICENCIATURA EN FARMACIA
 Química Analítica Instrumental (Prácticas para Farmacia)

Objetivos del curso experimental

Prácticas convencionales. Reafirmar los conocimientos teóricos en la aplicación
de las metodologías analíticas, empleando un equipo instrumental para identificar
y cuantificar una sustancia en una muestra de interés en el área farmacéutica.

1) Conocer e identificar las partes básicas del equipo utilizado para aplicar el
manejo adecuado con la finalidad de obtener resultados confiables.

2) Conocer la información que el equipo genera y su uso para el análisis

cuantitativo.

3) Interpretar y relacionar variables a utilizar para efectuar el cálculo de

contenido de una sustancia en una muestra real.

Práctica de diseño. Proponer un diseño experimental fundamentado química e

instrumentalmente para cuantificar una sustancia de interés en su área:

1) Estructurar y justificar un diseño experimental con base en reacciones

químicas conocidas de uso común.

2) Consultar con el asesor la metodología propuesta con la finalidad de

mejorarla.

3) Aplicar el diseño para la cuantificación de una muestra real.

4) Contrastar los resultados con el diseño propuesto a fin de identificar fuentes

de error tanto de diseño teórico como experimental.

10
LICENCIATURA EN FARMACIA
Química Analítica Instrumental (Prácticas para Farmacia)

UNIVERSIDAD NACIONAL AUTÓNOMA DE MÉXICO

FACULTAD DE ESTUDIOS SUPERIORES CUAUTITLÁN

DEPARTAMENTO DE CIENCIAS QUÍMICAS

SECCIÓN DE QUÍMICA ANALÍTICA

CÓDIGO: FPE-CQ-DEX-01-02;
CALENDARIZACIÓN
FPE-CQ-DEX-03-02; FPE-CQ-DEX-04-02.
Núm. de Revisión:

Asignatura: QUÍMICA ANALÍTICA INSTRUMENTAL Grupo_______

Carrera: LICENCIADO EN FARMACIA Periodo:

OBSERVACIONES
SEMANA ACTIVIDAD FECHA
(Entrega de productos)
1 Presentación Entrega del examen

Aplicación del examen diagnóstico diagnóstico

2 Manejo de material y equipo común en el Cálculos efectuados del

laboratorio de Análisis Instrumental (peri- manejo de material

llas, pipetas volumétricas y graduadas, pH

metros, balanzas) resolución del examen

diagnóstico
3 Práctica 1. Determinación de azul timol por Cuestionario previo

espectrofotometría UV/VIS
4 Práctica 2. Determinación Entrega del informe de

espectrofotométrica de ácido ascórbico la Práctica 1

5 Práctica 3. Determinación de Cu(II) en Entrega del informe de

jarabe por absorción atómica la Práctica 2

6 Entrega y discusión de los ejercicios Unidad Entrega del informe de

I /Primer examen escrito la Práctica 3

7 Práctica 4. Determinación de fenilefrina por

HPLC

8 Práctica 5. Determinación de etanol por cro- Entrega del informe de

matografía de gases en enjuague bucal la Práctica 4

11
LICENCIATURA EN FARMACIA
 Química Analítica Instrumental (Prácticas para Farmacia)

9 Práctica 6. Determinación de Entrega del informe de

hidroclorotiazida y captopril en un la Práctica 5

medicamento por electroforesis capilar

10 Capítulo 7. Determinación potenciométrica Entrega del informe de

de hierro en muestras farmacéuticas la Práctica 6

(tabletas y jarabe)
11 Entrega y discusión de los de ejercicios Entrega del informe de

Unidad 2 /segundo examen escrito la Práctica 7

Asignación del proyecto

12 Revisión de avances del formato de diseño

experimental (FDE) y experimentos prelimi-

nares
13 1ª Sesión práctica de diseño experimental

14 2ª Sesión práctica de diseño experimental

15 Presentación oral del diseño experimental Entrega del informe de

trabajo del diseño ex-

perimental
16 Entrega de promedios finales Desocupar gavetas

Aplicación de la encuesta FPG02-FESC-01

12
LICENCIATURA EN FARMACIA
Química Analítica Instrumental (Prácticas para Farmacia)

Tabla de prácticas y temas que cubre el

programa
NÚMERO DE NÚMERO Y NOMBRE DE LA UNIDAD

PRÁCTICA NOMBRE DE LA PRÁCTICA TEMÁTICA EN EL PROGRAMA DE LA

ASIGNATURA
1 Determinación cuantitativa de azul de 1.1 Concordancia de una medición instru-

timol mediante una curva de adición mental

patrón 1.2 Preparación de patrones analíticos

2 Determinación cuantitativa de ácido 2.2 Conocer instrumentación y aplicación

ascórbico (vitamina C), mediante una de espectrofotómetro UV/Vis

curva de calibración indirecta

3 Determinación cuantitativa de cobre 2.4 Conocer instrumentación y aplicación

en un jarabe mediante una curva de de espectrofotómetro de absorción ató-

calibración por espectrofotometría de mica

absorción atómica
4 Determinación de clorhidrato de 3.2 Conocer instrumentación de cromato-

fenilefrina por HPLC grafía de líquidos de alta resolución

3.4 Aplicar la cromatografía de líquidos

para determinación de analitos de interés

5 Determinación de alcohol etílico en 3.2 Conocer instrumentación de cromato-

enjuague bucal por cromatografía de grafía de gases

gases
6 Determinación de hidroclorotiazida 3.3 Conocer instrumentación de electro-

y captopril en un medicamento por foresis capilar

electroforesis capilar 4.1 Aplicar la electroforesis capilar en la

determinación de analitos de interés
7 Determinación potenciométrica de 4.2 Aspectos básicos y necesidades en las

hierro en muestras farmacéuticas determinaciones potenciométricas

(tabletas y jarabe)

Sistema de evaluación
Consta de los siguientes aspectos:

1) Resultados experimentales (RE). Se evalúa la calidad de los resultados ex-

perimentales, así como su tratamiento.

13
LICENCIATURA EN FARMACIA
 Química Analítica Instrumental (Prácticas para Farmacia)

2) Informe de trabajo (IT). Se evalúa el informe en cuanto a claridad y pre-

sentación.

3) Manejo de equipo y material (ME). En este apartado se asigna una califi-

cación a la destreza adquirida en el manejo del equipo y material de labo-
ratorio.

4) Valor de análisis de la muestra (VA). Consiste en evaluar la consistencia

entre los resultados experimentales y el resultado del análisis reportado y
estimar si la información se procesó adecuadamente.

5) Cuestionario previo (CP). Se evalúa una pequeña investigación previa, así

como algunos cálculos necesarios en la realización de la práctica.

6) Formato del diseño experimental (FD). Se evalúa si el proyecto llevará de

manera adecuada a la solución del problema planteado.

7) Examen (EX). En el curso se proponen tres exámenes: dos escritos y uno

oral.

La puntuación recomendada en una escala de 100 puntos se presenta en la si-

guiente tabla:

TIPO DE ASPECTO A PUNTUACIÓN NÚMERO PUNTOS

ACTIVIDAD EVALUAR MÁXIMA/ACTIVIDAD DE ACTIVIDADES

REALIZADAS

Práctica ME, RE, VA, 8 7 56

convencional IT, CP
Práctica ME, RE, VA, 14 1 14

de diseño IT, FD
Examen VA, ME 10 3 30
TOTAL DE PUNTOS 100

14
LICENCIATURA EN FARMACIA
Química Analítica Instrumental (Prácticas para Farmacia)

Facultad de Estudios Superiores Cuautitlán

Departamento de Ciencias Químicas

Sección de Química Analítica

Reglamento interno de laboratorio

1. Es obligatorio el uso de bata y lentes de seguridad, en el laboratorio. No se
permite quitarse el equipo de seguridad durante la sesión experimental.

2. Se deberán conservar limpias las instalaciones (en especial campanas de ex-

tracción, canaletas y tarjas de las mesas de laboratorio), el material y el equipo de
trabajo (incluyendo balanzas analíticas) al inicio y al final de cada sesión experi-
mental.

3. Antes de iniciar las actividades experimentales, se le solicitará al laboratoris-

ta el material y equipo necesarios, para ello, una persona responsable del equipo
dejará su credencial (de la UNAM) en depósito y firmará un vale por el material y
equipo recibidos. En caso de que existiera un defecto en el material o equipo reci-
bido, deberá ser anotado en el vale de material.

4. En caso de extravío o daño del material o equipo de laboratorio, se extenderá

un vale de adeudo con los nombres de todos los integrantes del equipo y quedará
retenida la credencial del responsable del daño o extravío del material o equipo
hasta su reposición.

5. Se deberá guardar orden y disciplina dentro del laboratorio y durante la sesión

experimental, y queda prohibida la entrada a personas ajenas al mismo.

6. Queda estrictamente prohibido fumar y consumir alimentos dentro del labo-

ratorio, ya que muchas de las sustancias químicas que se emplean son inflamables
y/o tóxicas.

7. Después de haber manipulado sustancias químicas es necesario lavarse las

manos con agua y jabón.

8. Los desechos resultantes de cada experimento deberán eliminarse adecuada-

mente, previa consulta de las fichas de seguridad y con el apoyo del asesor.

15
LICENCIATURA EN FARMACIA
 Química Analítica Instrumental (Prácticas para Farmacia)

9. Cuando un residuo no pueda ser eliminado deberá resguardarse, en un con-

tenedor adecuado y debidamente etiquetado, y colocarse en el anaquel destinado
para ello.

10. Al término de la sesión experimental, las disoluciones empleadas deberán

regresarse a su lugar de resguardo ubicado en el anaquel.

11. Para la extracción de líquidos que contengan sustancias químicas, se debe-

rán emplear perillas de hule y nunca succionar con la boca.

12. Los reactivos químicos no deberán ser manipulados con las manos, debién-
dose usar los implementos adecuados como pipetas, espátulas, cucharas, etcétera.

13. Si se utilizan mecheros, parrillas o cualquier otro aparato, se deberá estar

atento en su manipulación para evitar un accidente.

14. Es importante que antes de trabajar, el usuario conozca las características

de las sustancias químicas que va a utilizar para que puedan ser manipuladas ade-
cuadamente (consultar fichas de seguridad).

15. En caso de ingestión, derrame o algún accidente dentro del laboratorio, de-
berá ser notificado al asesor o al laboratorista del grupo, con previa consulta de las
fichas de seguridad.

16. Los reportes de las prácticas y actividades realizadas deberán entregarse en

la fecha señalada por el asesor.

17. Cuando sea asignada a los alumnos una gaveta en el laboratorio, y por razo-
nes de olvido o pérdida de la llave no pueda accederse a ella, queda prohibido for-
zarla, deberán hacer la solicitud de apertura al responsable del laboratorio, previa
autorización del profesor del grupo en el que están inscritos los alumnos. La gaveta
podrá usarse hasta la semana 15 del semestre por lo cual se deberá desocupar en
dicha semana.

18. Los alumnos que adeuden material de laboratorio, deberán reponerlo a la

mayor brevedad posible o a más tardar el último día de realización de prácticas, de
lo contrario los deudores serán reportados al Departamento de Servicios Escolares
y no podrán inscribirse en el siguiente semestre.

19. El número máximo de alumnos que podrán permanecer en el cuarto de ba-

lanzas (L-101-102) será el mismo que el número de balanzas disponibles.

16
LICENCIATURA EN FARMACIA
Química Analítica Instrumental (Prácticas para Farmacia)

20. Es responsabilidad del alumno revisar el estado en que recibe el material, ya

que al término de la sesión experimental lo debe regresar en buenas condiciones y
perfectamente limpio.

Protección personal
Cuando empieces a trabajar en el laboratorio. Los responsables te indicarán
cómo se debe usar el material y los instrumentos que vayas a utilizar. Además, te
harán saber dónde se encuentran los extintores, el botiquín, la ducha, los aparatos
lavaojos y las salidas de emergencia.

Antes de empezar una reacción. Deberás conocer la peligrosidad de los reactivos

que vayas a usar, así como de los productos que se obtienen de la propia reac-
ción (toxicidad, inflamabilidad, riesgo de explosión, riesgos biológicos) y tomarás
las precauciones apropiadas (por ejemplo, trabajar en la campana extractora). En
cualquier caso:

SIEMPRE LLEVARÁS PUESTOS NUNCA

Bata Trabajarás solo
Gafas de protección Llevarás lentes oscuros
Guantes cuando lo indique la práctica Comerás, beberás, fumarás o correrás

Al terminar una reacción. Tendrás que tratar los residuos para eliminar su peli-
grosidad o los almacenarás adecuadamente clasificados y etiquetados hasta que
se retiren.

Al abandonar el laboratorio. Te asegurarás de que no quede activo ningún foco

de peligro: gases, agitadores, calentadores, etcétera.

Diseño experimental
El objetivo del diseño experimental es: proponer experimentos fundamentados
química e instrumentalmente para cuantificar una sustancia de interés en su área;
para ello se debe:

• Estructurarlo y justificarlo con base en reacciones químicas conocidas de uso

común.

• Consultar la metodología propuesta con el asesor con la finalidad de mejorarla.

• Aplicar el diseño para la cuantificación de una muestra real.

17
LICENCIATURA EN FARMACIA
 Química Analítica Instrumental (Prácticas para Farmacia)

• Contrastar los resultados con el diseño propuesto con el fin de identificar

fuentes de error tanto de diseño teórico como del experimental.

Para poder evaluar adecuadamente el desarrollo de los estudiantes en el diseño

de experimentos, se debe elaborar un formato que tiene que considerarse como
una guía para presentarlo a revisión con el asesor en la fecha señalada.

El formato de diseño experimental debe contener al menos los siguientes pun-

tos:

• Los objetivos que se persiguen con la experimentación.

• Listado de actividades generales.

• Programa desglosado por cada actividad general.

• Distribución equitativa del trabajo para cada integrante del equipo.

• Tratamiento que se dará a los resultados experimentales después de obtener-

los mediante un análisis estadístico.

• Fuentes consultadas.

El informe final de actividades (después de efectuar la experimentación corres-

pondiente) debe incluir los puntos anteriores así como el análisis de resultados y
los cálculos de contenido de sustancia en la muestra.

Por último, es necesario hacer una recomendación. La naturaleza misma del

diseño experimental es dinámica, ya que durante su desarrollo se requiere una re-
troalimentación continua y consciente para afinar los aspectos del diseño que se ha
contemplado. El hecho de que en esta asignatura se dé una guía para presentarlo
a revisión no niega su dinámica intrínseca; esto es, que durante su elaboración
cada estudiante debe retroalimentarse con la información que, poco a poco, va ob-
teniendo para ir modificando cada aspecto del diseño en forma lógica y armónica.

18
LICENCIATURA EN FARMACIA
Química Analítica Instrumental (Prácticas para Farmacia)

PRÁCTICAS

19
LICENCIATURA EN FARMACIA
Química Analítica Instrumental (Prácticas para Farmacia)

1) Los alumnos deben cubrir las prácticas que comprende este manual.

2) Los alumnos deben elaborar una bitácora; la cual debe contener el nombre
de la práctica o de la sesión de trabajo, la fecha, el cuestionario previo de
cada práctica; además, se deben anotar todos los cálculos realizados, las
mediciones (pesadas, preparación de disoluciones, medidas de propiedad,
cambios de procedimiento, observaciones, etc.) En caso de error, se reco-
mienda NO BORRAR NADA solo cruzar con una línea y escribir lo corregido
abajo o a un lado.

NOTA: Es requisito contar con:

ü El 80 % de asistencia al curso, después de 15 minutos de retardo se con-

sidera falta.

ü La entrega puntual de los productos a evaluar.

Actividades contempladas para la semana 1

Las actividades que se realizarán en la primera semana del curso de laboratorio
son las siguientes:

1. El profesor dará una introducción sobre el curso de laboratorio, explicando las

actividades por realizar y la forma de evaluación (ver apartado evaluación).

2. Se incluirán las fechas en las actividades calendarizadas en el manual de

prácticas.

3. Se le dará formato a la hoja de inscripción.

4. Se les solicitará el siguiente material a los estudiantes, el cual estará bajo

su propiedad y retirarán de las gavetas concluido el curso:

INDIVIDUAL POR EQUIPO POR GRUPO

(2-3 ESTUDIANTES)
Bata blanca Franela 1 candado con 2 llaves
Bitácora Etiquetas o masking tape Servitoallas
Marcador indeleble 1 frasco de plástico de 50 mL Detergente líquido
Lentes de protección 8 frascos de plástico de 50 mL
Guantes* 2 frascos de plástico de 250 mL
1 perilla de hule o propipeta

21
LICENCIATURA EN FARMACIA
 Química Analítica Instrumental (Prácticas para Farmacia)

2 barras magnéticas medianas

1 escobillón
Muestras para cada práctica*

* Será indicado por el profesor

5. Se aplicará y resolverá el examen diagnóstico.

6. Se formarán equipos de trabajo entre los alumnos del grupo.

Actividades contempladas para la semana 2

1. Se recordará el uso y manejo del material, de los reactivos y del equipo
que se utilizarán durante el curso de laboratorio, realizando experimentos
sencillos de cálculos, usando el material y haciendo pesadas en la balanza
analítica.

2. El profesor organizará y repartirá el manejo a los equipos de trabajo, de los

residuos generados en cada práctica.

3. Se resolverán los ejercicios del examen diagnóstico para retroalimentación

y mejora.

22
LICENCIATURA EN FARMACIA
Química Analítica Instrumental (Prácticas para Farmacia)

PRÁCTICA 1
Determinación cuantitativa de azul de timol
mediante una curva de adición patrón
I. Objetivos
• Cuantificar azul de timol en una muestra mediante una curva de adición pa-
trón.

• Evaluar la calidad y validez de los resultados experimentales mediante pará-

metros estadísticos.

II. Introducción
El uso de curvas de calibración para la cuantificación de analitos es un recurso
de gran importancia en la Química Analítica; sin embargo, existen varios tipos de
curvas dependiendo de las características particulares del problema a tratar.

El método o curva de adiciones patrón se utiliza particularmente para analizar

mezclas complejas, cuando es difícil suprimir interferencias físicas o químicas en
la matriz de la muestra problema; o bien, cuando la respuesta en la propiedad es
baja y no es posible concentrar la muestra.

El método consiste en hacer adiciones de estándar a una cantidad fija de la

muestra problema y medir la respuesta (P) para cada adición. De esta forma, cada
solución contendrá una proporción constante del analito proveniente del problema
(Cx= constante) y una proporción variable proveniente del estándar (Cs= variable).
Puesto que el medio químico es el mismo para todos los sistemas, se puede supo-
ner que la constante de proporcionalidad, K, es invariante y, por lo tanto, es posible
construir la función:

P=K [Cx + Cs] (1)

Entonces, si se mide la respuesta en la propiedad para cada sistema se obtiene

una serie de valores con los que se construye el gráfico de P en función de Cs. Un
ejemplo de esta curva se muestra en la figura 1, donde el eje “x” corresponde a
las concentraciones del analito agregado. Por tanto, la concentración desconocida
estará dada por el punto en el cual la línea extrapolada corta al eje “x”, o bien, se

23
LICENCIATURA EN FARMACIA
 Química Analítica Instrumental (Prácticas para Farmacia)

puede obtener de manera analítica a partir de la ecuación de la mejor recta ajus-

tada a los datos, considerando la ecuación (1).

Figura 1. Ejemplo de una curva de adiciones patrón

Cuando en la cuantificación de un analito se utiliza un método gráfico, la validez

y calidad del resultado está relacionado con la dispersión de los datos obtenidos,
donde una mayor dispersión implica menor precisión. Para evaluar la dispersión y,
por lo tanto, la calidad del valor que se reportará, se hace uso de los parámetros
estadísticos como lo son la desviación estándar o el coeficiente de variación, entre
otros.

Finalmente, para medir la respuesta de la propiedad P en este caso, se utilizará

espectrofotometría de ultravioleta-visible (UV/Vis), una técnica que se revisará
más a fondo, posteriormente.

III. Actividades previas a la práctica

El cuestionario previo se transcribe y se resuelve en la bitácora.

1. Explicar los tipos de errores que se consideran en el análisis instrumental,

así como la diferencia entre los conceptos de exactitud y precisión.

Dar ejemplos. (2 puntos)

2. Definir los parámetros estadísticos media, desviación estándar, porcentaje

de desviación estándar relativa o coeficiente de variación e intervalo de
confianza, y señalar su importancia en el análisis de datos. (3 puntos)

3. Explicar en qué consiste y para qué se utiliza el análisis de regresión en

general, y el método de mínimos cuadrados en particular. (3 puntos)

24
LICENCIATURA EN FARMACIA
Química Analítica Instrumental (Prácticas para Farmacia)

4. Explicar el modelo matemático que relaciona a la absorbancia con la con-

centración de una solución y que se utiliza generalmente en la técnica ana-
lítica de espectrofotometría. (2 puntos)

IV. Equipos, reactivos y materiales

Material y equipo Reactivos
3 matraces volumétricos de 10 mL Agua destilada
1 matraz volumétrico de 100 mL Estándar de azul de timol
2 matraces volumétricos de 50 mL

16 tubos de ensaye con gradilla

1 espátula
NaOH
Pipetas volumétricas de 1, 2, 5 y 10 mL Muestra problema de azul de timol
2 vasos de precipitados de 50 mL
1 piseta y un espectrofotómetro

V. Procedimiento experimental
1. Preparación de soluciones y sistemas

1.1 Preparación de soluciones

• Solución de NaOH 0.1 M

Pesar 0.5 g de reactivo analítico y aforar a 100 mL (por equipo)

R- 1
• Solución estándar

› Se prepara una solución concentrada por grupo con 20 mg del estándar de

azul de timol, disolver y aforar a 50 mL con agua destilada (Sol. 1).

› Se hace la dilución (Sol. 2) por equipo: tomar 5 mL de Sol. 1 y aforar a 50

mL con agua destilada.

• Solución problema

Se proporcionará por el profesor (a). Este sistema se prepara aproximadamente

a 20 ppm

1.2 Preparación de los sistemas. (No olvide etiquetar adecuadamente

cada uno)

25
LICENCIATURA EN FARMACIA
 Química Analítica Instrumental (Prácticas para Farmacia)

Para construir la curva de adición patrón se preparan 6 sistemas de acuerdo con

la tabla 1. Cada sistema se prepara con el volumen constante de la solución proble-
ma más el volumen indicado de solución estándar (Sol. 2) y completando el aforo
a 10 mL con agua destilada. Si se desea, se pueden incluir más sistemas.

Tabla 1. Preparación de los sistemas para la curva de adiciones patrón

(Se realiza por triplicado en tubos de ensaye del sistema 1-6)
Núm. de sistema/ volúmenes 0 1 2 3 4 5 6
de las soluciones en mL

Solución problema 0 2 2 2 2 2 2

Solución estándar de azul 0 0 1 2 3 4 5

de timol (Sol. 2)

Solución de NaOH 0.1 M 3 3 3 3 3 3 3

Agua destilada 7 5 4 3 2 1 0

R- 2
Reunir los resultados
de todos los sistemas (1-6)

2. Lectura de la propiedad para cada sistema utilizando el espectrofotómetro

2.1 Calibración del instrumento

Realizar la calibración del instrumento de acuerdo con el instructivo anexo y si-

guiendo las indicaciones del profesor.

2.2 Obtención del espectro de absorción. Determinación de la longitud de

onda (I) óptima

Tomar el sistema más concentrado en relación con la solución estándar.

Tomar lecturas de absorbancia y porcentaje (%) de transmitancia en el espec-

trofotómetro en el intervalo de 500 a 700 nm a intervalos de 20 nm.

Nota: por cada cambio de λ se debe calibrar el equipo.

Con los datos obtenidos, llenar la tabla 2 y construir la figura 2.

26
LICENCIATURA EN FARMACIA
Química Analítica Instrumental (Prácticas para Farmacia)

2.3 Lectura de absorbancia para cada sistema a la longitud de onda óptima

Tomar lectura de la absorbancia para cada uno de los sistemas a la longitud de

onda óptima (por triplicado).

Las lecturas se realizan del sistema más diluido al más concentrado, enjuagando
la celda con el sistema siguiente. Llenar la tabla 3.

VI. Análisis de resultados

Tabla 2. Datos experimentales del espectro de absorción
Longitud de onda (nm) 500 520 540 560 580 600 620 640 660 680 700
Absorbancia
% transmitancia

Figura 2. Determinación de λ óptima

Longitud de onda óptima determinada: __________nm

27
LICENCIATURA EN FARMACIA
 Química Analítica Instrumental (Prácticas para Farmacia)

Tabla 3. Datos experimentales para el análisis estadístico

Concentración azul de timol A1 A2 A3 AX STD %
RSD

STD= Desviación estándar (por sus siglas en inglés)

% RSD = Porcentaje de desviación estándar relativa (por sus siglas en inglés) o
coeficiente de variación.

Tabla 4. Curva de adiciones patrón

Sistema 1 2 3 4 5 6
Concentración de azul de

timol (mg/mL)
Absorbancia (AX )

Figura 3. Respuesta de la propiedad en función de la concentración

28
LICENCIATURA EN FARMACIA
Química Analítica Instrumental (Prácticas para Farmacia)

VII. Instrucciones para el informe de trabajo

Puntos mínimos que se evaluarán:

1. Formato: el informe de trabajo debe incluir: objetivos particulares, intro-

ducción, procedimiento experimental (diagrama de flujo, dibujos, etc.), re-
sultados experimentales, análisis de resultados, observaciones, conclusio-
nes y referencias bibliográficas. (2 puntos)

Incluir los siguientes aspectos para el análisis de resultados:

2. Calcular los parámetros estadísticos como: media, desviación estándar

(STD), porcentaje de desviación estándar relativa o coeficiente de variza-
ción (RSD) e intervalo de confianza, para cada punto de la curva. (3 pun-
tos)

3. Presentar y discutir el gráfico A = f ( λ ) (espectro de absorción). (1 punto)

4. Estimar el valor de la constante de proporcionalidad en las gráficas de las

curvas: A = f [molar (M) de azul timol] y A=f (μg/mL de azul timol). (1
punto)

5. Analizar la linealidad de la función que sigue la respuesta gráfica en la cur-

va de A=f (concentración) y calcular la concentración M y mg/ml de azul
timol. (2 puntos)

6. Concluir en términos del análisis estadístico realizado y la cuantificación del

azul de timol. (1 punto)

Datos: Peso molecular de azul de timol = 466.6 g/mol

pKa(s) de azul de timol = 2.0, 8.7 (rojo, amarillo, azul)

Figura 4. Estructura de azul de timol

29
LICENCIATURA EN FARMACIA
 Química Analítica Instrumental (Prácticas para Farmacia)

VIII. Orientaciones para el tratamiento de los

reactivos utilizados

Figura 5. Diagrama ecológico para el manejo de residuos

Nota. Mantener al azul de timol alejado de los siguientes reactivos:

• Agentes oxidantes fuertes, como percloratos, peróxidos y permanganatos

(reacción rápida y violenta con riesgo de incendio o explosión).

• Agentes reductores fuertes, como fosfuros, estaño II cloruro e hidruros metá-

licos (reacción violenta y vigorosa).

30
LICENCIATURA EN FARMACIA
Química Analítica Instrumental (Prácticas para Farmacia)

PRÁCTICA 2
Determinación cuantitativa de ácido
ascórbico (vitamina C), mediante una
curva de calibración indirecta

I. Objetivos
• Cuantificar ácido ascórbico en tabletas efervescentes mediante una curva de
calibración indirecta bajo condiciones químicas optimizadas.

• Seleccionar la longitud de onda adecuada de la especie absorbente para la

cuantificación de ácido ascórbico en tabletas efervescentes.

II. Introducción
Los principios de preparación y trazo de una curva de calibración ya fueron
estudiados en prácticas anteriores, donde se consideró que la respuesta del
instrumento es lineal respecto a la concentración de la sustancia a cuantificar;
sin embargo, debe considerarse, que si la curva es indirecta, existe una o varias
reacciones efectuadas en los sistemas de preparación, dado que la sustancia de
interés da señal muy pobre o no da señal, este reactivo que genera la reacción debe
encontrarse en exceso, considerando el siguiente estado de equilibrio de manera
general:

aX bY → cZ Keq’ > 1

Inicio Vst Cst

Agrega VyCy

Equilibrio aε VyCy-b/a VstCst c/a VstCst

En el caso de que Y dé la señal, el modelo matemático que describe la respuesta

gráfica es: P = Ky [Y] y considerando el estado de equilibrio anterior, entonces:

[Y] = VyCy - b/aVstCst / Vaforo. La función será:

P = Ky [(VyCy - b/a VstCst)/ Vaforo]

31
LICENCIATURA EN FARMACIA
 Química Analítica Instrumental (Prácticas para Farmacia)

Donde a, b, c representan los coeficientes estequiométricos de la reacción; Vst,

Vy, Vaforo, representan los volúmenes de los reactivos utilizados al preparar los sis-
temas del estándar, reactivo Y y el aforo utilizado; Cst, Cy representan las concen-
traciones molares del estándar (stock) y la concentración del reactivo Y agregado
para generar la reacción

Entonces se puede graficar P= f (Vst Cst / Vaforo), obteniéndose una función de

pendiente igual a - Kyb/a y ordenada al origen igual a KyVyCy/Vaforo

En esta práctica se propone la cuantificación indirecta de ácido ascórbico en una

forma farmacéutica, siguiendo las variaciones de una especie colorida (Y).

III. Actividades previas a la práctica

El cuestionario previo se transcribe y se resuelve en la bitácora.

1. Describir tres cuidados que se realizan cuando se utiliza un espectrofotó-

metro. (1 punto)

2. ¿Qué es un espectro de absorción y cómo se obtiene? (2 puntos)

3. Proponer la reacción que se efectuará en la parte experimental. (3 puntos)

4. Con base en una tabla de variación de cantidades molares, proponer la

función gráfica que se obtendrá, sabiendo que el triyoduro es la especie
absorbente. (2 puntos)

5. Efectuar los cálculos necesarios para calcular la concentración M de las so-

luciones de trabajo. (2 puntos)

IV. Equipos, reactivos y materiales

MATERIAL POR EQUIPO REACTIVOS

6 tubos de ensaye con gradilla Agua destilada

3 matraces volumétricos de 10 mL Ácido ascórbico estándar

1 pipeta volumétrica de 1, 2, 3, 4, 5 mL

1 vaso de precipitados de 250 mL

2 matraces volumétricos de 25 mL Ácido acético glacial

1 piseta

1 agitador magnético c/barra Tabletas efervescentes de ácido ascórbico

1 matraz volumétrico de 100 mL

32
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Química Analítica Instrumental (Prácticas para Farmacia)

1 espátula

Solución de triyoduro 0.1N

Un espectrofotómetro con celdas Acetato de sodio

V. Procedimiento experimental
1. Preparación de soluciones

Buffer de acetatos 0.1 M pH = 3.5: Se colocan aproximadamente 80 mL de agua

destilada en un vaso de precipitado de 250 mL, se pesan 80 mg del reactivo analíti-
co de acetato de sodio y se mezclan en el vaso con 0.5 mL de ácido acético glacial,
se ajusta el pH=3.5 (con NaOH o HCl 1M) aforo a 100 mL.

Solución estándar de ácido ascórbico: Se pesan 20 mg de ácido ascórbico, se

di­suelven y se aforan a 25 mL (solución A) con agua destilada, se toman 3 mL de
esta solución y se aforan a 25 mL (solución B) stock.

Solución de triyoduro 3 x 10-3 M: Se miden 3 mL de la solución concentrada 0.1

N de yodo, se colocan en un matraz de 50 mL; posteriormente, se adicionan 5 mL
de Buffer de acetatos pH = 3.5 y se afora, guardar en la oscuridad.

Solución problema: Se pesan 50 mg de polvo de tabletas* finamente pulveriza-

das y se afora a 25 mL con agua destilada, se toman 2 mL de esta solución y se
aforan a 10 mL con agua destilada.

*Se consideran tabletas de 1.0 g de ascórbico, si es la formulación de 2.0 g,

pesar 25 mg de polvo.

2. Preparación de sistemas

Para construir la curva de calibración, se preparan los siguientes sistemas a

partir de la solución A. Cada dilución es preparada tomando el volumen indicado y
aforando a 10 mL. Se preparan 8 sistemas, de acuerdo con la siguiente tabla.

33
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 Química Analítica Instrumental (Prácticas para Farmacia)

Sistema 0 1 2 3 4 5 6 7

Solución Buffer 1 1 1 1 1 1 1 1

Solución B (stock) de ascórbico

(5.45X10-4 M) 0 1 2 3 4 5 0 0

Solución de Triyoduro 3X10-3 M 0 1 1 1 1 1 1 1

Solución problema 0 0 0 0 0 0 2 1

Aforo con agua destilada 10 10 10 10 10 10 10 10

R- 3
Reunir los residuos de
todos los sistemas (0-7)
y el problema

3. Calibración del espectrofotómetro

El procedimiento de calibración se realizará de acuerdo con el instructivo ya

revisado en prácticas anteriores, utilizando al sistema cero como blanco reactivo.

4. Determinación de λ (longitud de onda) de trabajo

Identifica cuál es el sistema más concentrado y realiza el espectro de absorción,

el cuál obtendrá al variar la λ en el espectrofotómetro que, en este caso en parti-
cular, será de 360 a 450 nm a intervalos de 10 nm.

Nota: para cada cambio de λ se debe ajustar el espectrofotómetro con el blanco

nuevamente.

5. Registrar los datos de absorbancia y % de transmitancia

Primero en la tabla 1, y posteriormente se realizará el gráfico correspondiente.

6. Obtener la curva de calibración

Una vez que se ha elegido la longitud de onda, lea los sistemas de la curva de
calibración de menor a mayor concentración para evitar el enjuague entre cada
lectura; posteriormente, registre los datos en la tabla 2 de resultados.

34
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Química Analítica Instrumental (Prácticas para Farmacia)

VI. Tablas de resultados experimentales

Tabla 1. Datos experimentales del espectro de absorción
Longitud de onda (nm) 360 370 380 390 400 410 420 430 440 450

Absorbancia

Porcentaje transmitancia

Tabla 2. Curva de calibración indirecta

Sistema 1 2 3 4 5 6 7

Concentración de ascórbico (mg/mL)

Absorbancia

VII. Instrucciones para el informe de trabajo

Como mínimo, deberá contener los siguientes puntos:

1. Los objetivos particulares de la práctica y una breve introducción al tema,

incluyendo propiedades farmacológicas del ácido ascórbico (vitamina C)
y un diagrama de flujo con las actividades desarrolladas. El desglose del
procedimiento de cada actividad (puede emplear dibujos) debe describir
perfectamente el procedimiento de preparación de la muestra. (2 puntos)

2. Proponer la reacción efectuada y calcular la constante condicional. (2 pun-

tos)

3. Graficar: A) Espectro de absorción. B) Curva de calibración A =f (mg/mL de

ácido ascórbico) y analizar la linealidad de la función que sigue la respuesta
gráfica, identificando sus términos. (2 puntos)

4. Calcular el coeficiente de absortividad molar de la especie absorbente. (1

punto)

5. Calcular los mg de ascórbico en el producto analizado, calculando el por-

centaje en contenido, en la forma farmacéutica analizada. Dar su criterio de
aceptación o rechazo a la forma farmacéutica analizada, ya que el principio
activo debe estar entre el 95 y 105 %, según lo especificado en el marbe­te.
(3 puntos)

35
LICENCIATURA EN FARMACIA
 Química Analítica Instrumental (Prácticas para Farmacia)

6. Enunciar sus conclusiones y recomendaciones, de acuerdo con los objeti-

vos.

Datos:

Ácido ascórbico pKa = 4.05, 7.25

Acido ascórbico/ Ac. dehidroascórbico + 2H+ + 2e- Eo = 0.39 V

I3- / I- Eo = 0.58 V

VIII. Orientaciones para el tratamiento

y disposición de residuos
El ácido acético glacial debe trabajarse en la campana extractora utilizando una
perilla y nunca cerca de algún mechero; siempre se debe añadir agua al ácido y
tener precaución al preparar la mezcla debido al desprendimiento de calor. La inha-
lación de sus vapores es altamente tóxico y produce trastornos en las vías respira-
torias. Si hay contacto directo con la piel u ojos, deben de lavarse con abundante
agua.

Figura 1. Diagrama ecológico para el manejo de residuos

36
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Química Analítica Instrumental (Prácticas para Farmacia)

PRÁCTICA 3
Determinación cuantitativa de cobre en un
jarabe mediante una curva de calibración por
espectrofotometría de absorción atómica
I. Objetivos
• Conocer el fundamento, las partes básicas y el manejo del espectrofotómetro
de absorción atómica, para obtener resultados confiables en este tipo de ins-
trumento.

• Interpretar y relacionar las variables a utilizar para efectuar el cálculo de

contenido de un analito (cobre) en un jarabe comercial por una curva de ca-
libración directa.

II. Introducción
La cuantificación de un analito mediante una curva de calibración directa implica
el uso de estándares e instrumentos que registren alguna propiedad del compuesto
de interés (absorbancia, potencial, fluorescencia, radiactividad, área del pico, etc.),
la cual debe ser atribuida solo al analito de manera directa o indirecta y debe ser
directamente proporcional a la concentración del compuesto de interés.

La curva se prepara mediante diluciones de una solución estándar (stock) de

la misma naturaleza del analito a determinar en la muestra, en un intervalo que
pueda ser trabajado en el instrumento, y la muestra se prepara de manera tal que
la concentración del analito en la muestra o en su dilución se encuentre dentro de
dicho intervalo.

Las soluciones preparadas se llevan al instrumento de medición y se registra

una respuesta P para cada dilución de estándar y de muestra. Los resultados se
grafican P= f (concentración de cada dilución del estándar). Se debe evaluar la
linealidad de la respuesta en relación con a la concentración del analito mediante
la inspección gráfica y se efectúa, además, la regresión lineal para determinar la
mejor ecuación que exprese el comportamiento de la misma. La interpolación de
la señal de la muestra (o su dilución) en la recta permite conocer la concentración
de la muestra.

37
LICENCIATURA EN FARMACIA
 Química Analítica Instrumental (Prácticas para Farmacia)

La espectrometría de absorción atómica (EAA) se utiliza habitualmente en la

determinación cuantitativa de soluciones de iones metálicos Se ha aplicado la de-
terminación de hasta 70 elementos, en concentraciones trazas (ppb) y hasta 1 %.
Cabe mencionar, que esta técnica no diferencia estados de oxidación de los meta-
les, por lo que solo se mide la cantidad de metal total.

Previo a la cuantificación por EAA, es necesario realizar una digestión ácida con
el fin de eliminar la presencia de materia orgánica, aun en muestras líquidas, y
además para solubilizar los metales, sobre todo en muestras sólidas. Para ello se
utiliza normalmente ácido nítrico concentrado y calor, hasta que no se generen hu-
mos amarillos, reflejo de que todavía hay una reacción redox presente.

Figura 1. Esquema de un espectrofotómetro de absorción atómica con flama (EAA-F)

III. Actividades previas a la práctica

El cuestionario previo se transcribe y se resuelve en la bitácora.

1. ¿Qué tipo de sustancias pueden ser determinadas por EAA? (1.0 punto)

2. Explicar el fundamento fisicoquímico de la técnica de EAA. (2.0 puntos)

3. Describir brevemente los procesos involucrados para lograr la atomización

por flama de un analito. (2.0 puntos)

4. ¿Qué mezclas de gases pueden ser utilizadas por EAA-Flama y qué función
tiene cada gas? (1.5 puntos)

38
LICENCIATURA EN FARMACIA
Química Analítica Instrumental (Prácticas para Farmacia)

5. ¿Qué tipo de propiedad se utiliza para efectuar la cuantificación? (1.5 pun-

tos)

6. Cálculo de la preparación de 25 ml de Cu(II) a 40 ppm, a partir de reactivo

analítico (nitrato de cobre) del cálculo de la concentración de la solución
ácida y de la concentración teórica de cobre en la solución problema del
jarabe. (2.0 puntos)

IV. Equipos, reactivos y materiales

MATERIAL REACTIVOS EQUIPOS

1 piseta y 1 espátula Ácido nítrico R.A. 1 parrilla con agitador

1 probeta de 100 mL magnético con barra

1 pipeta graduada de 5 mL

6 tubos de ensaye con gradilla Espectrofotómetro de

2 vasos de precipitados de 50 mL Nitrato de cobre absorción atómica con

2 matraces aforados de 25 mL flama

2 matraces aforados de 10 mL

1 pipeta volumétrica de 0.5, 1, 2, 3, 4, 5 m Jarabe Vitaveran

Fólico

V. Procedimiento experimental
1. Preparación de soluciones

Solución ácida. Colocar aproximadamente 30 mL de agua destilada en una pro-

beta de 100 mL y adicionar, poco a poco, 4 mL de ácido nítrico concentrado R.A.,
llevar a 100 mL con agua destilada.

Solución estándar de Cu. Se mide 1 ml de una solución stock de Cu elemental en

1 000 con pipeta volumétrica y se afora a 25 mL con solución ácida.

Solución problema de Cu. Medir 1 mL del jarabe (Vitaveran Fólico), agregar, con
mucho cuidado, 2 mL de ácido nítrico concentrado, mezclando con agitación mag-
nética y con calentamiento en parrilla a 100 o C* (colocarla dentro de la campana
de extracción), para eliminar el azúcar contenido mediante su oxidación, hasta que
no se generen humos amarillos. Enfriar y aforar a 10 mL con solución ácida. (So-
lución problema). Verter a un tubo de ensaye y etiquetar.
39
LICENCIATURA EN FARMACIA
 Química Analítica Instrumental (Prácticas para Farmacia)

*No sobrepasar la temperatura y tener paciencia hasta que la solución quede lo

más transparente posible.

2. Preparación de sistemas

Para construir la curva de calibración, se preparan los siguientes sistemas, a

partir de la solución estándar de Cu. Cada dilución se prepara tomando el volumen
indicado en la tabla 1 y aforando a 10 mililitros.

Tabla 1. Preparación de sistemas para medición

0 1 2 3 4 5 6
Sistema
Blanco

Sol. ácida (mL) 3 3 3 3 3 3 3

Sol. Stock Cu (mL) 40 ppm 0 0.5 1 2 3 4 0

Sol. problema (mL) 0 0 0 0 0 0 6

Aforo con agua destilada 10 mL

R- 4
Reunir los residuos de
todos los sistemas (0-6)
y el problema

3. Obtención de resultados

a) Optimizar las condiciones de medición en el equipo (EAA-Fl)

Siguiendo el programa que controla el equipo, revisar que estén las siguientes
condiciones: muestreo manual, mezcla de gases = acetileno / aire, señal absor-
bancia, posición correcta de la lámpara, longitud de onda (λ) 324.8 nm, ancho de
banda = 0.7, voltaje de la lámpara = 30 µA, etcétera.

b) Optimización de la lámpara de cátodo hueco

El procedimiento se realizará siguiendo las indicaciones del profesor para alinear

la lámpara de cátodo hueco hacia el monocromador y la posición del quemador.

c) Medición de la absorbancia

Considerando las indicaciones del programa de trabajo del equipo, primero se

emplea agua destilada y después el blanco reactivo (sistema blanco) para calibrar
40
LICENCIATURA EN FARMACIA
Química Analítica Instrumental (Prácticas para Farmacia)

la señal a cero. Después, se solicitan las soluciones estándar, de la más diluida a

la más concentrada, anotar la lectura promedio de las tres mediciones que realiza
(Tabla 2) y graficar los resultados que se van obteniendo (Figura 2). Medir, por
último, la absorbancia del sistema 6 y verificar que se encuentre dentro de los pri-
meros cinco sistemas (curva de calibración) o que modifique dicho sistema hasta
que así sea.

VI. Tablas de resultados experimentales

Tabla 2. Resultados experimentales obtenidos
Sistema Cu (ppm) Abs.

estándar medida

1
2

Figura 2. Absorbancia en función de la concentración de cobre

41
LICENCIATURA EN FARMACIA
 Química Analítica Instrumental (Prácticas para Farmacia)

VII. Instrucciones para el informe de trabajo

Los puntos mínimos a evaluarse son:

1. Los objetivos particulares de la práctica y una breve introducción al tema

que incluya propiedades farmacéuticas del Cu. (1.0 punto)

2. Un diagrama de flujo con las actividades desarrolladas y el desglose del

procedimiento de cada actividad (puede incluir dibujos). Describir perfec-
tamente el procedimiento de preparación de la muestra problema. (1.0
punto)

3. Tablas de resultados, observaciones. (1.0 punto)

4. Elaborar gráficos de:

• Curva de calibración A = f ([M] Cu

)

• Curva de calibración A = f (ppm Cu

)

Discusión de las diferencias entre estos y de los resultados en general.

(2.0 puntos)

5. Establecer las ecuaciones que relacionan cada una de las variables en su

gráfico correspondiente, indicando el valor de la pendiente y de la ordenada
de origen en cada ecuación, mencionando sus unidades. Indicar la constan-
te de proporcionalidad. (1.5 puntos)

6. Los cálculos correspondientes para la determinación de los mg de Cu / 100

mL de jarabe, comparando sobre el contenido del membrete del producto
analizado (utilizando las dos curvas realizadas). (2.5 puntos)

7. Conclusiones con base en los objetivos. (1.0 punto)

42
LICENCIATURA EN FARMACIA
Química Analítica Instrumental (Prácticas para Farmacia)

VIII. Orientaciones para el tratamiento

y disposición de residuos
La inhalación de vapores de ácido nítrico y sus productos de reacción producen
trastornos en las vías respiratorias; usarlo siempre en la campana extractora.

La solución ácida sobrante de todo el grupo, se debe mezclar y guardar bien

etiquetada, indicando la fecha de preparación y la concentración aproximada en un
frasco de vidrio.

Figura 3. Diagrama ecológico para el manejo de residuos

43
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Química Analítica Instrumental (Prácticas para Farmacia)

PRÁCTICA 4
Determinación de clorhidrato de fenilefrina
por HPLC
I. Objetivos
• Conocer los componentes básicos del cromatógrafo de líquidos de alta resolu-
ción (HPLC, por sus siglas en inglés), así como su manejo y cuidados.

• Conocer un cromatograma y sus usos para análisis cualitativo y cuantitativo.

• Interpretar y relacionar variables a utilizar para efectuar el cálculo de conte-

nido de clorhidrato de fenilefrina por una curva de calibración en productos
comerciales.

II. Introducción
La cromatografía de líquidos de alta resolución (HPLC) es la técnica de separa-
ción más ampliamente utilizada en la industria, debido a su sensibilidad. Su fácil
adaptación a determinaciones cuantitativas es idónea para sustancias no volátiles
o termolábiles de aplicación en la industria, en muchos campos de la ciencia y para
la sociedad en general.

En la cromatografía de líquidos de alta resolución, se ponen en contacto dos

fases no miscibles, una móvil y la otra estacionaria. Una muestra que se introduce
en la fase móvil es transportada a lo largo de la columna que contiene a la fase
estacionaria distribuida. Los componentes separados emergen en orden creciente
de interacciones con la fase estacionaria. La migración depende de la solubilidad de
los solutos en fase móvil o estacionaria.

Los métodos de evaluación para las determinaciones cuantitativas por medio de

HPLC son variados. Entre ellos, tenemos: 1) la calibración con estándares, 2) la
utilización de un estándar interno y la normalización del área.

Sin lugar a duda, la calibración con estándares es el método más utilizado en

HPLC. Consiste en la preparación de estándares de concentración semejantes a la
del analito en la muestra y en el ensayo cromatográfico en las mismas condiciones
operativas, utilizando para ello la curva de calibración.

45
LICENCIATURA EN FARMACIA
 Química Analítica Instrumental (Prácticas para Farmacia)

En HPLC, el éxito de la separación para un compuesto dado depende de las con-

diciones de operación como son: tipo y longitud de columna, proporción y tipo de
fase móvil, velocidad de flujo de la fase móvil, etcétera.

Componentes básicos que integran un equipo de HPLC:

III. Actividades previas a la práctica

El cuestionario previo se resuelve en la bitácora.

1. Explicar el fundamento de la cromatografía de líquidos de alta resolución.

(1.5 puntos)

2. Mencionar los métodos de cuantificación más utilizados en HPLC. (2 puntos)

3. Mencionar las ventajas y desventajas de la cromatografía de líquidos. (1.5

puntos)

4. Describir los parámetros característicos de un cromatograma. (3 puntos)

5. Efectuar los cálculos de la concentración de soluciones de trabajo, conside-

rando también la preparación de su muestra problema. (2 puntos)

46
LICENCIATURA EN FARMACIA
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IV. Equipos, reactivos y materiales

Equipo y material Reactivos y símbolo de peligrosidad

Cromatógrafo de líquidos de alta resolución

HPLC
metanol grado HPLC

Balanza analítica

1 agitador magnético con barra

trietanolamina

3 matraces aforados de 25 mL

1 probeta de 500 mL (solo si prepara la fase

móvil ) ácido acético

1 espátula y 1 piseta

6 matraces aforados de 25 mL

2 vasos de precipitados de 50 mL
fenilefrina estándar

1 pipeta volumétrica de 1, 2, 3, 4, 5 mL

1 pipeta graduada de 5 mL

1 micropipeta

V. Procedimiento experimental
1. Preparación de soluciones

Fase móvil [ácido acético-trietanoamina-H2O (1.5:0.5:98)]

En una probeta, se mezclan aproximadamente 300 mL de agua desionizada con

6 mL de ácido acético reactivo analítico, 2 mL de trietanolamina reactivo analítico
y se lleva a 400 mL con agua desionizada.

Se filtra al vacío a través de una membrana con diámetro de poro de 0.45 mm.

Se coloca en un frasco perfectamente limpio y se lleva al ultrasonido aproxima-

damente 15 minutos.

Solución estándar

En un vaso de precipitados de 50 mL, se pesan, con balanza analítica, 20 mg del

estándar de fenilefrina, se disuelve en aproximadamente 15 mL de agua desioniza­
da con agitación y se afora a 25 mL con fase móvil (Sol. A).
47
LICENCIATURA EN FARMACIA
 Química Analítica Instrumental (Prácticas para Farmacia)

De la Sol. A se toma una alícuota, con pipeta volumétrica, de 2 mL llevando a un

aforo de 25 mL con agua desionizada (Sol. stock).

Solución problema

Solución oftálmica

Se toma una alícuota de 10 μL de la solución oftálmica*, se adicionan a aproxi-

madamente 5 mL de fase móvil y se afora a 10 mL con agua desionizada (Sol. P1).

*de acuerdo con el marbete: 10 g de fenilefrina / 100 mL de solución.

Tabletas

Pesar 5 tabletas y obtener el peso promedio por tableta (anotarlo).

Triturar 2 tabletas y pesar la cantidad de polvo equivalente a 1 mg* de fenilefrina.

Disolver muy bien el polvo en aproximadamente 5 mL de fase móvil.

Aforar a 10 mL, con agua desionizada, filtrar para eliminar los excipientes que
hayan quedado sin disolver. El filtrado es la Sol. P2.

*De acuerdo con el marbete del medicamento.

48
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Tabla 1. Preparación de sistemas para la curva de calibración

Sistemas 1 2 3 4 5 6 7

Sol. stock 1 2 3 4 5 0 0

Sol. P (1 ) 0 0 0 0 0 3 0

Sol. P (2) 0 0 0 0 0 0 3

Aforo a mL con agua desionizada 10 10 10 10 10 10 10

Trasvasar los sistemas debidamente etiquetados a frascos de plástico de

aproximadamente 20 mL y colocar las soluciones en el ultrasonido aproximada-
mente 5 minutos.
R- 5
Reunir los residuos de
todos los sistemas (0-7)
y los problemas
P (1) y P (2)

Tabla 2. Condiciones de la instrumentación para la corrida cromatográfica

Tipo Flujo Detector Longitud Volumen

de columna de fase móvil de onda de inyección

C-18 0.6 mL/min UV/VIS 272 nm 20 μL

Se obtienen con atenuación = 6

A) Fijar el flujo de la fase móvil de la bomba.

B) Ajustar la longitud de onda del detector.

49
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 Química Analítica Instrumental (Prácticas para Farmacia)

C) Dejar fluir la fase móvil por la columna durante 15 minutos para asegurar
que no esté contaminada la columna.

D) Inyectar 20 μL de las soluciones estándar, iniciando con la menos concen-

trada.

E) Finalizar con la inyección de las soluciones problema.

F) Después de la última inyección, lavar la columna con una fase móvil de

Metanol/Agua (50:50).

R- 6

VI. Tabla de resultados experimentales

Llenar la siguiente tabla con los resultados obtenidos del cromatograma obte-
nido o, en su caso, efectuar el cálculo para cada una de las soluciones inyectadas.

Sistema Concentración Tr W Área Altura N AEPT

(ppm) (min) de pico

Tr = Tiempo de retención. W = Ancho de pico a la base. N = Número de platos

teóricos. AEPT = Altura equivalente de un plato teórico, ppm (partes por millón)

50
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VII. Instrucciones para el informe de trabajo

Puntos mínimos a evaluar

1. Formato completo (1punto):

• Objetivos particulares de la práctica y una breve introducción.

• Diagrama de flujo detallado con las actividades de la práctica.

2. Cálculo de las concentraciones obtenidas para cada sistema estándar, indi-

cando las unidades utilizadas. (1 punto)

3. Curva de calibración de fenilefrina (área vs concentración (ppm). (1 punto)

4. Curva de calibración (altura vs concentración (ppm). (1 punto)

*Adjuntar copia de los cromatogramas que se obtienen.

5. Análisis de linealidad de ambas curvas de calibración. Ecuación que sigue la

respuesta. (1 punto)

6. Calcular el Tr promedio, el número de platos teóricos promedio y la AEPT

promedio (así como el intervalo de confianza para cada uno de ellos.
(1 punto)

7. Calcular los mg de fenilefrina por tableta y por cada 100 mL de solución

oftálmica y comparar con lo que especifica el marbete. (3 puntos)

8. Calcular el porcentaje en contenido, si se considera que debe estar entre 96

a 105 % ¿Es aceptable el resultado? (0.5 puntos)

9. Conclusiones de la práctica y referencias. (0.5 puntos)

51
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VIII. Orientaciones para el tratamiento

y disposición de residuos
Procurar generar y guardar la menor cantidad de residuos. Aquellas soluciones
que puedan ser reutilizadas deben emplearse o bien ser desechadas adecuada-
mente.

Figura 1. Diagrama ecológico para el manejo de residuos

52
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Química Analítica Instrumental (Prácticas para Farmacia)

PRÁCTICA 5
Determinación de alcohol etílico en enjuague
bucal por cromatografía de gases
I. Objetivos
• Aplicar los conocimientos teóricos adquiridos para emplear el método de adi-
ción del estándar interno al realizar un análisis cuantitativo.

• Conocer e identificar las partes básicas del cromatógrafo de gases para capa-
citarse en su manejo con el fin de obtener resultados confiables.

II. Introducción
En cromatografía de gases (CG) la muestra se inyecta y volatiliza en la cabeza
de una columna cromatográfica. La elución produce, por el flujo de una fase móvil,
un gas inerte (no interacciona con las moléculas del analito) cuya única función es
la de transportar el analito a través de la columna (fase estacionaria). Al pasar por
la columna, los solutos son separados y eluyen hacia el detector, cuya respuesta se
visualiza en un integrador o una computadora.

Los estándares internos tienen su máxima utilidad cuando hay pérdidas inevi-
tables de la muestra; por ejemplo, durante una inyección manual en CG. Si se
agrega un estándar interno a una mezcla antes de cualquier pérdida, la fracción de
estándar que se pierde es la misma que la fracción de la muestra que se pierde y
el cociente (Cmta/Cstd) permanece constante.

Para ser utilizado como estándar interno (EI), un compuesto debe reunir los
siguientes requisitos: a) que el pico de respuesta esté cercano, pero resuelto de
los componentes a determinar, b) que sea estable y químicamente inerte, c) tener
estructura similar al componente a determinar, d) no estar presente en la muestra
original, y e) tener alto grado de pureza.

Los enjuagues bucales llevan la finalidad primordial de corregir el mal aliento

y tornarlo agradable. Para ello, deben controlar el desarrollo bacteriano y dejar la
boca agradablemente fresca, por eso integran etanol en su composición .

53
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1. Fase móvil (gas)

2. Puerto de inyección
3. Columna (FE)
4.Horno de la columna
5. Detector
6. Computadora

Figura 1. Esquema de un cromatógrafo de gases

III. Actividades previas a la práctica

El cuestionario previo se transcribe y se resuelve en la bitácora.

1. ¿Cuál es el fundamento de la CG (gas – líquido y gas – sólido)? (2 puntos)

2. ¿Qué tipo de sustancias se pueden determinar por medio de esta técnica?

(1.5 puntos)

3. ¿Qué tipo de compuestos se emplean como fase estacionaria? (1.5 puntos)

4. Mencionar los componentes básicos de un cromatógrafo de gases y expli-

que brevemente la función de cada uno de ellos. (3 puntos)

5. Efectuar el cálculo de la concentración (% v/v) de las soluciones a preparar

en la práctica. (2 puntos)

IV. Equipos, reactivos y materiales

REACTIVOS MATERIAL EQUIPOS

Alcohol etílico 6 tubos de ensaye de volumen pequeño Cromatógrafo de

con gradilla gases con detector de

4 vasos de precipitado de 50 mL ionización de flama

1 piseta

Alcohol propílico 1 jeringa para CG de 10 uL

1 micropipeta de 100 a 1000 uL

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V. Procedimiento experimental
1. Preparación de soluciones

Solución estándar externo. Tomar 200 uL de etanol y adicionar 800 uL de agua

destilada en un tubo de ensaye (Sol. 1).

R- 7

Solución estándar interno. Tomar 100 uL de n-propanol, colocarlos en un tubo

de ensaye y adicionar 900 uL de agua destilada (Sol. 2).

R- 8

Mezcla de estándares. Colocar en un tubo de ensaye 100 uL de la Sol. 1 y 100

uL de la Sol. 2 y adicionar 800 uL de agua destilada.

R- 8

Solución problema. Colocar en un tubo de ensaye 100 uL de la Sol. 2 y 100 uL

del enjuague bucal y adicionar 800 uL de agua destilada.

R- 8

2. Obtención de resultados

• Conectar y verificar las conexiones eléctricas del equipo.

• Abrir las válvulas de los tanques de gas (nitrógeno e hidrógeno) y las llaves
de paso.

• Encender el equipo y dejarlo calentar.

a) Seleccionar las condiciones de medición en el equipo (CG-FID)

Siguiendo la pantalla y el programa que controla el equipo, revisar que estén las
siguientes condiciones.

55
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Tabla 1. Parámetros a emplear para la separación de alcoholes por CG-FID

PARÁMETRO CONDICIONES

Columna DB-wax 30 m Megabore

Gas acarreador Nitrógeno, a 5 psi

Presión de aire 7 psi

Presión de hidrógeno 20 psi

Temperatura del inyector 200 °C

Temperatura del detector 250 °C

• Encender el detector y verificar su encendido.

b) Obtención de los cromatogramas

◊ Inyectar 1.0 μL de la Sol. 1, esperar a que se registre el pico del alcohol.

Hacer la inyección por duplicado.

◊ Inyectar 1.0 μL de la mezcla de estándares, esperar a que se registren los

picos. Hacer la inyección por duplicado.

◊ Inyectar 1.0 μL de la Sol. problema y esperar a que se registren los picos

de los alcoholes.

Una vez obtenidos los cromatogramas, anotar los datos promedio de cada inyec-
ción en la tabla 2.

NOTA:

Al terminar las inyecciones, llevar a cabo el proceso de lavado, que consiste en

dejar 10 minutos el flujo del gas de arrastre y luego apagar el equipo y cerrar los
gases.

56
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VI. Tabla de resultados experimentales

Tabla 2. Resultados experimentales y procesamiento de los mismos
Inyección Sol. 1 Mezclas estándares Solución problema

analito etanol etanol propanol etanol propanol

Conc. % (v/v)

Tiempo retención

Área de pico

Ancho de pico

Platos teóricos

Resolución

Calcular los parámetros asociados con la separación (número de platos teóricos y

resolución) a partir de los datos de tiempo de retención (Tr), ancho y área de pico.

VII. Instrucciones para el informe de trabajo

Los puntos mínimos a evaluarse son:

1. Los objetivos de la práctica y una breve introducción al tema, incluyendo

las propiedades fisicoquímicas del alcohol etílico y su uso en enjuagues.
(1 punto)

2. Un diagrama de flujo con las actividades desarrolladas y desglosar el pro-

cedimiento de cada actividad (pueden incluirse dibujos). (1 puntos)

3.
Los gráficos de las corridas cromatográficas, estándares y muestra.
(1 puntos)

4. Tabla completa con los resultados obtenidos y parámetros requeridos, refe-

ridos a la eficiencia de la separación (N y R). (1.5 puntos)

5. Los cálculos de la concentración de etanol en la muestra analizada, en %

v/v, considerando el método utilizado. (3 puntos)
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 Química Analítica Instrumental (Prácticas para Farmacia)

6. Investigar sobre el contenido de etanol en productos del tipo analizado y

comparar con el resultado obtenido. (1 punto)

7. Análisis de resultados y conclusiones. (1 punto)

8. Referencias bibliográficas. (0.5 puntos)

Datos de los reactivos y de la columna para la práctica

Columna: DB-WAX 304

30 m x 0.32 mm DI, película 0.25 µm, fase estacionaria: columna tubular capilar
de polietilen glycol (PEG). Polar

Temperatura mínima 20 °C. Límite de máxima temperatura: 250 oC.

Gases para el detector de ionización de flama (FID): Hidrógeno alta pureza -

aire.

etanol, J. T. Baker, P.M. 46.0 g/mol, n-propanol J. T. Baker, P.M. 60.097 g/mol,
99.85 % de pureza, densidad 0.79 g/ml, 99.0 % de pureza, densidad 0.80 g/ml,
punto de ebullición: 78.3 °C punto de ebullición: 97.2 °C

58
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VIII. Orientaciones para el tratamiento

y disposición de residuos
Los remanentes de la solución se deben almacenar para su tratamiento posterior
dado el poco volumen generado.

Figura 2. Diagrama ecológico para el manejo de residuos

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PRÁCTICA 6
Determinación de hidroclorotiazida y
captopril en un medicamento
por electroforesis capilar
I. Objetivos
• Conocer la forma de calibración y manejo del instrumento de electroforesis
capilar, para obtener resultados confiables en este tipo de instrumentos.

• Seleccionar las condiciones óptimas para la cuantificación de hidroclorotiazida

y captopril en un medicamento por electroforesis capilar, usando el método de
adición del estándar interno.

• Comparar el contenido encontrado experimentalmente, con el reportado en

el marbete.

II. Introducción
La electroforesis capilar es una técnica analítica que permite la separación y,
al mismo tiempo, la cuantificación de sustancias de interés de una forma rápida,
barata y con muy poca generación de residuos tóxicos. Esta técnica se basa en
las diferencias de movilidades de los analitos, generadas cuando están bajo la in-
fluencia de un campo eléctrico. Los analitos se encuentran en un medio conductor
(electrolito soporte o buffer) y el campo eléctrico es generado en el medio conduc-
tor al aplicar una diferencia de potencial entre 2 electrodos situados cada uno en el
extremo del tubo capilar. El potencial de corriente aplicado impulsa a los iones de la
muestra a migrar hacia uno u otro de los electrodos: las moléculas con una carga
neta negativa se desplazarán hacia el ánodo (electrodo positivo) y las moléculas
con una carga neta positiva migrarán hacia el cátodo (electrodo negativo). Esta
migración diferencial se expresa en la siguiente ecuación:
𝑄𝑄 carga
µi = = masa
6πηri
Ec. 1

Donde µi es la movilidad del ión, Q es la carga del ión, η es la viscosidad del bu-
ffer, ri es el radio del ión con su esfera de solvatación y 6π se utiliza al considerar
que las moléculas son esféricas. También podría decirse que los fundamentos de
61
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 Química Analítica Instrumental (Prácticas para Farmacia)

la separación por electroforesis capilar se basan en las diferencias en la relación

carga/masa entre los analitos, cuando están bajo un campo eléctrico, como lo con-
firma la Ec. 1. De esta forma, la movilidad que puede tener un ión en electroforesis
capilar, puede ser positiva (cationes), negativa (aniones) o nula (cero) para molé-
culas neutras. La velocidad con la que los analitos lleguen al detector será diferente
al lograr esta diferencia en movilidades como lo indica la siguiente ecuación:

Ec. 2

Donde v es la velocidad del ión, µi es la movilidad del ión y E es el campo eléc-

trico generado en el buffer. De esta forma, podemos obtener gráficos de la señal vs
tiempo llamados electroferogramas, donde el área bajo la curva del pico o la altura
del pico son las propiedades que son proporcionales a la concentración de los ana-
litos de interés y así podemos lograr cuantificarlos.

Figura 1. Muestra de un electroferograma

y las señales proporcionales a la concentración

Los componentes básicos de un equipo de electroforesis capilar se muestran a

continuación:

Figura 2. Componentes básicos de un equipo de electroforesis capilar (EC)

62
LICENCIATURA EN FARMACIA
Química Analítica Instrumental (Prácticas para Farmacia)

El tiempo de migración puede ser usado como herramienta de diagnóstico para

determinar cualitativamente la presencia de una sustancia en la muestra, contras-
tando contra un estándar.

III. Actividades previas a la práctica

1. ¿Cuál es el fundamento de la electroforesis capilar? (2 puntos)

2. ¿Qué tipo de sustancias pueden separarse por EC? (1 punto)

3. Elaborar una lista de grupos funcionales ácidos o básicos (según Brønsted

y Lowry) más frecuentes. (1 punto)

4. Anotar las estructuras y propiedades fisicoquímicas de hidroclorotiazida y

captopril e identifique en las estructuras los grupos ácidos y básicos que
contiene. (2 puntos)

5. Dar las partes básicas de un equipo de EC. (2 puntos)

6. Realizar cálculos de las concentraciones de las soluciones a preparar. (2

puntos)

IV. Equipos, reactivos y materiales

MATERIAL POR EQUIPO MATERIAL POR GRUPO

1 matraz aforado de 100 mL Equipo de electroforesis

1 matraz aforado de 50 mL Balanza analítica

2 matraces aforados de 10 mL Potenciómetro con electrodo de pH

1 embudo con papel filtro 1 matraz aforado de 100 mL

1 pipeta volumétrica de 3 mL 1 matraz aforado de 50 mL

1 pipeta volumétrica de 1 mL 1 matraz aforado de 25 mL

1 vaso de precipitado de 200 mL 2 pipeta volumétrica de 3 mL

1 espátula 1 pipeta volumétrica de 1 mL

1 mortero con pistilo 1 pipeta volumétrica de 1 mL

1 piseta con agua destilada 1 agitador magnético con barra

63
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 Química Analítica Instrumental (Prácticas para Farmacia)

REACTIVOS SÍMBOLO DE PELIGROSIDAD

Tetraborato de sodio Estándar de hidroclorotiazida

Agua desionizada Estándar de captopril

Metanol Ácido bórico

Solución NaOH 0.1 M Ácido salicílico

V. Procedimiento experimental
1. Preparación de soluciones estándar

a) Buffer de boratos, 50 mM, pH = 8.5 (buffer de separación). Pesar la cantidad

equivalente de reactivo analítico de ácido bórico para tener una solución de 0.05 M,
disolver en aproximadamente 60 mL, ajustar el pH a 8.5 con NaOH 0.1 M, y aforar
a 100 mL con agua destilada.

b) Soluciones estándar de hidroclorotiazida (HCT). Pesar 10 mg de reactivo es-

tándar de hidroclorotiazida y disolver en 5 mL de metanol puro, asegurándose de
disolver en su totalidad por agitación magnética durante 10 minutos, posterior-
mente, aforar a 100 mL con agua destilada.

R- 10

c) Soluciones estándar de captopril. Pesar y disolver 10 mg de reactivo estándar

de captopril en 5 mL de metanol puro, asegurándose de disolver en su totalidad
con agitación magnética por 10 min, posteriormente, aforar a 50 mL con agua
destilada.

R- 10

64
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Química Analítica Instrumental (Prácticas para Farmacia)

d) Soluciones estándar interno (EI) de ácido salicílico. Pesar y disolver 10 mg de

reactivo estándar de ácido salicílico en 15 mL de agua destilada y aforar a 25 mL
con este mismo disolvente.

2. Preparación de soluciones problema

Muestra de medicamento

Pesar 6 tabletas de algún medicamento que contenga hidroclorotiazida, captopril

o ambos y obtener el peso promedio, triturar y moler perfectamente al menos 3
tabletas. Y dependiendo de lo que se quiere cuantificar en el medicamento, ya sea
hidroclorotiazida o captopril, se preparará una de las siguientes soluciones:

a) Solución problema de hidroclorotiazida. Pesar lo equivalente en polvo de ta-

bleta a 12 mg de hidroclorotiazida, disolver en 5 mL de metanol, asegurándose de
su disolución total con agitación magnética por 10 min, adicionar 60 mL de agua
destilada y agitar 5 min más. Finalmente, filtrar y aforar a 100 mL con agua des-
tilada (Sol. A)

R- 9

b) Solución problema de captopril. Pesar lo equivalente en polvo de tableta a 12

mg de captopril, disolver en 5 mL de metanol, asegurándose de su disolución total
con agitación magnética por 10 min, adicionar 25 mL de agua destilada y agitar 5
min más. Finalmente, filtrar y aforar a 50 mL con agua destilada (Sol. B).

R- 9

3. Preparación de soluciones para la determinación de los analitos de interés

por el método de factor de respuesta

a) Preparación de la mezcla de estándares

65
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 Química Analítica Instrumental (Prácticas para Farmacia)

Tabla 1. Volúmenes de la mezcla de estándares para la obtención

del factor de respuesta

SOLUCIÓN A UTILIZAR mL

Sol. STD de HCT* 4

Sol. STD de captopril** 4

Sol. EI (ácido salicílico) 0.5

Aforo con agua destilada 10

R- 9

*Preparada en la sección 1b, **preparada en el inciso 1c

Tabla 2. Volúmenes para preparación del sistema problema y conocer

su concentración

SOLUCIÓN A UTILIZAR mL

Sol. A y/o Sol. B*** 4

Sol. E.I. (Ac. Salicílico) 0.5

Aforo con agua destilada 10

R- 9

*** Agregar las soluciones A y B mezcladas (por ejemplo, del equipo 1 y 2) si es

que los medicamentos de origen contienen solamente captopril o hidroclorotiazida.
De esta forma, en un solo sistema problema cuantificarán 2 equipos. Si el medica-
mento de origen es una mezcla de ambos, no hacer esta mezcla.

3. Mediciones en el equipo de electroforesis capilar

a) Condiciones de la columna capilar. Se deberá tener montado en un cartucho,

un capilar de sílice fundido de 40 cm de largo total, 29.5 cm al detector y 50 µm de
diámetro interno. Usando el software Karat, se deberá acondicionar previamente
usando la opción del menú Direct Control y en la opción pressure, lavar el capilar
con NaOH 0.1 M por 20 min a 20 psi, 3 min con agua desionizada a 20 psi y, final-
mente, 10 min con el buffer de separación.

b) Condiciones del método. Abrir el método Captopril.met, ubicado en Mis Do-

cumentos Docencia, y se verá la ventana time program. Asegurarse de que en la
primera pestaña de la izquierda esté fijada la temperatura de 25 oC; en la segunda
66
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Química Analítica Instrumental (Prácticas para Farmacia)

pestaña, la longitud de onda de 214 nm, y en la tercera pestaña, las órdenes, ex-
presadas en la tabla 3.

Tabla 3. Condiciones de método en la opción time program del software Karat

Start Status Conditions Inlet Vial Outlet Vial Comments

Rinse 20 psi, 1.0 min BI: C1 BO: A1 Forward

Inject 0.5 psi, 0.5 s SI: A1 BO: A1 Forward

0.0 Separte 30 kV, 5 min* BI: D1 BO: D1 Ramp 0.17 min

0.0 Autozero

5.0* End

*Si observas que obtienes las 3 señales de los analitos a un tiempo menor, pue-
des modificar disminuyendo el tiempo de separación.

BI = charola frontal izquierda, BO = charola frontal derecha, SI = charola pos-

terior izquierda de las muestras. A1, C1, D1 = sitios de introducción de los viales.

c) Medición de Sistemas. Llena los viales con las soluciones preparadas en las
tablas 1 y 2. Para medirlos, introdúcelos en el lugar SI: A1 y oprime el botón Start
(en verde) del menú. De esta forma, obtendrás los electroferogramas de la mezcla
de estándares y del problema. Después de la última inyección, lava el capilar con
agua desionizada por 5 min para eliminar los restos de sales en el capilar.

VI. Tablas de resultados experimentales

Abre los electroferogramas obtenidos en el apartado 4c y usando el botón dere-
cho, define los parámetros que quieres obtener. Analízalos con el botón Analyze.
Con esos resultados, llena las siguientes tablas:

Tabla 4. Parámetros obtenidos de la medición de la solución mezcla

de estándares, preparada en la tabla 1
Analito tµ Área Altura, h N Rs

STD HCT

STD C

E.I. (ácido salicílico)

tµ = tiempo de migración, N = eficiencia (o número de platos teóricos), Rs =

resolución

Factor de respuesta obtenido de la mezcla de estándares __________________

67
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Tabla 5. Resultados de las corridas de soluciones problema

de hidroclorotiazida y captopril
Analito tµ Área w N R

Prob. HCT

Prob. C

E.I. (Acido Salicílico)

Observaciones

VII. Instrucciones para el informe de trabajo

Debe contener al menos los siguientes puntos:

1. Objetivos particulares de la práctica y una breve introducción al tema, in-

cluyendo propiedades farmacológicas de los principios activos.

2. Diagrama de flujo con las actividades realizadas durante la práctica y des-

glosar el procedimiento para cada actividad (describir perfectamente el
procedimiento de preparación de las muestras problema). Anexar las tablas
de registro obtenidas. (2 puntos)

3. ¿Cuál fue el orden de migración de los compuestos a las condiciones del aná-
lisis? Justificar la respuesta (utilizar las escalas de pH anexas). (2 puntos)

4. Calcular el contenido (mg) de los principios activos por tableta, comparar

con el marbete y dar el porcentaje de contenido por dos vías: a) usando
área como variable, y b) usando altura como variable (medir la distancia de
la línea base hasta el máximo del pico). (3 puntos)

5. Calcular el número de platos teóricos y la resolución de las condiciones del

análisis. (2 puntos)
68
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Química Analítica Instrumental (Prácticas para Farmacia)

6. Adjuntar copia de las corridas que se obtienen.

7. Conclusiones de la práctica y bibliografía. (1 punto)

Datos:

HCT P.M. = 297.74 g/mol

C = P.M. = 217.29 g/mol

HSal = P.M. = 138.12 g/mol

Figura 3. Escalas de zonas de predominio

Recuerda que utilizaste metanol (neutro) como cosolvente y, por lo tanto,

observa­rás su señal al tiempo del flujo electroosmótico.

69
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 Química Analítica Instrumental (Prácticas para Farmacia)

VIII. Orientaciones para el tratamiento

y disposición de residuos
1. Los remanentes de las soluciones introducidas en los viales para su me-
dición se pueden desechar en la tarja dada la mínima cantidad utilizada
(menos de 1 mL cada vial).

2. Los remanentes de la solución de ácido salicílico se pueden desechar en

la tarja, pues en medio acuoso se degradan rápidamente. Los residuos de
buffer de boratos se neutralizan y se desechan en la tarja con abundante
agua.

Figura 4. Diagrama ecológico para el manejo de residuos

70
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PRÁCTICA 7
Determinación potenciométrica de hierro en
muestras farmacéuticas (tabletas y jarabe)
I. Objetivos
• Efectuar la cuantificación de FeSO4 en muestras de uso farmacéutico por me-
dio de una curva de valoración potenciométrica.

• Aplicar los conocimientos teóricos adquiridos para efectuar la identificación de

las partes básicas del potenciómetro para reconocer su manejo adecuado con
el fin de obtener resultados confiables.

II. Introducción
El método de titulación potenciométrica consiste en medir el potencial (voltaje)
en una solución por medio de un electrodo como función de volumen de agente
titulante. El potencial que se mide se puede transformar a unidades de concentra-
ción de una especie en solución. La ventaja de medir el potencial es que se mide
por medio de un electrodo que es selectivo a la especie o analito que se quiere
determinar. Por lo tanto, el voltaje que se mide en la solución es representativo de
la concentración de la especie en solución. Este alto grado de selectividad (señal
analítica que puede mostrar un pequeño grupo de analitos en una solución que
contiene múltiples especies químicas) se debe a la propiedad física del electrodo
con que se mide el voltaje. La medida del potencial se puede emplear para poner
de manifiesto el punto final en reacciones ácido-base, redox, precipitación y for-
mación de complejos; para ello se selecciona el electrodo indicador adecuado y un
electrodo de referencia que cierra la celda.

Para determinar el punto final se pueden utilizar varios métodos; el más directo
se basa en representar el potencial en función del volumen de valorante. Otro pro-
cedimiento más exacto consiste en representar el ( ∆E / ∆V ).

En esta práctica, el hierro presente en las muestras se disuelve en ácido, se va-

lora con dicromato de potasio y las variaciones del potencial durante el proceso se
siguen con un potenciómetro, para obtener una gráfica de E = f (mL de valorante)
mediante la cual se determinará el volumen gastado para llegar al punto de equi-
valencia y así poder cuantificar el contenido de hierro.
71
LICENCIATURA EN FARMACIA
 Química Analítica Instrumental (Prácticas para Farmacia)

El grado en que ocurre la reacción (y por tanto, el cambio de pendiente en el

punto de equivalencia) depende de la constante condicional de formación, el efec-
to del pH en la titulación es un parámetro a considerar en el amortiguamiento del
medio de reacción.

III. Actividades previas a la práctica

1. Efectuar los cálculos para preparar 100 mL de una solución de K2Cr2O7 0.01
M y describir la preparación experimental. (2 puntos)

2. Buscar en referencias bibliográficas las características de un reactivo para

emplearse como valorante. (2 puntos)

3. Anotar las especificaciones de los reactivos que empleará durante la sesión

experimental. (2 puntos)

Nombre del Marca Fórmula y peso Ensayo o Densidad

reactivo molecular pureza

4. Dibujar el montaje experimental de la sesión experimental, y nombrar las

partes que lo componen. (2 puntos)

5. Describir cómo se determina el volumen del punto de equivalencia, usando

el método de las tangentes. (2 puntos)

72
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Química Analítica Instrumental (Prácticas para Farmacia)

IV. Equipos, reactivos y materiales

MATERIAL REACTIVOS EQUIPOS

1 piseta Ácido fosfórico R.A. 1 parrilla con agitador

2 copas tequileras magnético

1 pipeta graduada de 5 mL

1 bureta de 25 mL Potenciómetro con

1 pipeta volumétrica de 2.10 mL Ácido nítrico R.A. electrodo de platino y de

calomel (o combinado)

1 probeta de 25 mL

2 vasos de precipitados de 50 mL Dicromato de potasio R.A.

1 soporte universal completo

Tabletas y jarabe que

contengan sulfato ferroso

V. Procedimiento experimental
1. Preparación de soluciones

Solución ácida. En una probeta de 25 mL, se coloca un poco de agua destilada

y se agregan 2 mL de ácido fosfórico concentrado y se lleva al volumen con agua
destilada.

R- 12

Solución problema. Siga el procedimiento de acuerdo con la muestra.

73
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 Química Analítica Instrumental (Prácticas para Farmacia)

Tabletas. Se pesan tres tabletas y se obtiene el peso promedio, se muelen y

se pesa el equivalente a 25 mg de sulfato ferroso en un vaso de precipitados y se
agregan 10 mL de solución ácida con agitación.

R- 12

Jarabe. Se coloca el equivalente a 25 mg de sulfato ferroso en un vaso de pre-

cipitado y se agregan con mucho cuidado 2 mL de ácido nítrico concentrado, mez-
clando con agitación magnética y con calentamiento en parrilla a 100oC (colocarla
dentro de la campana de extracción), para eliminar el azúcar contenido mediante
su oxidación. Adicionar otros 2 mL de ácido nítrico y calentar, repetir hasta que no
se generen humos amarillos con la adición del ácido. Enfriar y agregar 10 mL de
solución ácida (ácido fosfórico).

R- 12

2. Valoración potenciométrica

Efectuar el montaje del potenciómetro, calibrando previamente. Llenar la bureta

con el valorante (dicromato de potasio), comenzar la titulación agregando 0.5 mL
consecutivamante.

R- 11

3. Obtención de resultados

a) Registrar el valor del potencial experimental en la tabla 1 y representarlos en

la figura 1 para cada volumen de K2Cr2O7 0.01 M, para la valoración de las tabletas,
corrigiendo respecto al potencial del electrodo de calomel.

b) Registrar el valor del potencial experimental en la tabla 2 y representarlos

en la figura 2 para cada volumen de K2Cr2O7 0.01 M, para la valoración del jarabe,
corrigiendo respecto al potencial del electrodo de calomel.

74
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VI. Resultados experimentales

Tabla 1. Datos experimentales de la valoración potenciométrica del Fe(II)
en las tabletas
Volumen 0.0 0.5 1.0 1.5 2.0 2.5 3.0 3.5 4.0 4.5 5.0 5.5 6.0

K2Cr2O7(mL)

E’ECS(mV)

E’ENH(mV)

Figura 1. Curva de valoración potenciométrica

Tabla 2. Datos experimentales de la valoración potenciométrica del Fe(II)

en jarabe
Volumen 0.0 0.5 1.0 1.5 2.0 2.5 3.0 3.5 4.0 4.5 5.0 5.5 6.0

K2Cr2O7(mL)

E’ECS(mV)

E’ENH(mV)

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Figura 2. Curva de valoración potenciométrica

VII. Instrucciones para el informe de trabajo

El informe de trabajo debe incluir:

1. Objetivos particulares, introducción, procedimiento experimental (diagra-

ma de flujo, dibujos, etc.), resultados experimentales, análisis de resulta-
dos, observaciones, conclusiones y referencias bibliográficas. (1 punto)

2. Una tabla con volumen y cantidad de muestra analizada/Molaridad del

Cr2O7 2-)/volumen del Cr2O7 2-
gastado para el punto de equivalencia. Colo-
carla en el análisis de resultados. (1 punto)

3. Calcular el pH y pPO4´ en el sistema de valoración. (1 punto)

4. Plantear el equilibrio representativo de la reacción de valoración, utilizando

los diagramas anexos. (1 punto)

5. Realizar los gráficos E = f( vol. Cr2O7 2-) y determinar el volumen de punto de

equivalencia para cada valoración, así como el gráfico ∆E / ∆V . (1.5 puntos)

6. Estimar el valor del Eº‘’ del par Fe(II)/Fe(III) y calcular el valor de la

Keq´´experimental (en cualquiera de los dos gráficos). (1 punto)

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7. Efectuar el cálculo de los mg de FeSO4 / tableta, y los mg de FeSO4 / 100

mL de jarabe, contrastando con lo referido en el membrete de cada uno de
los productos analizados. (2.5 puntos)

8. Conclusiones con base en los objetivos. (1 punto)

9. Referencias utilizadas.

Datos:

H3PO4 pKa’s = 2.2 , 7.2 , 12.3

Complejos de Fe(II) Fe(OH)n+ Log β1= 4.5

Fe2+ + H2PO4- → Fe H2PO4+ log K = 2.7

Fe2+ + HPO42- → Fe HPO4 log K = 3.6

Complejos de Fe(III)

Fe(OH)n3-n Log β1= 11.0 , Log β2= 21.7

Fe3+ + H2PO4- → Fe H2PO42+ log K = 3.47

Fe3+ + HPO42- → Fe HPO4+ log K = 8.3

Complejos de Cr(III)

Cr(OH)n3-n Log β1= 10.2, Log β2= 18.3

Cr3+ + H2PO4- → Cr H2PO42+ log K = 2.56

Cr(OH)3↓ pKs = 30.3

Figura 3. Diagramas de zonas de predominio pPO4’ = f (pH) para Fe(II)

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Figura 4. Diagramas de zonas de predominio pPO’ = f (pH) para Fe(III)

Figura 5. Diagramas de zonas de predomnio pPO’ = f (pH) para Cr(III)

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Figura 6. Diagrama de existencia-predominio para el sistema Cr(III) -PO4 -H2O

VIII. Orientaciones para el tratamiento

y disposición de residuos
Se deberá disponer de un frasco debidamente etiquetado como residuos de
K2Cr2O7 y deberá mantenerse bien tapado, alejado de materiales combustibles y
protegidos de calor, daño físico y flamas y en lugares secos.

El tratamiento posterior se realizará como sigue:

Figura 7. Diagrama ecológico para manejo de residuos

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Figura 8. Diagrama ecológico para manejo de residuos

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ANEXOS
INSTRUCTIVO PARA EL MANEJO
DEL ESPECTROFOTÓMETRO
BAUSCH & LOMB SPECTRONIC 20
Este instrumento se utiliza para medir la radiación absorbida por las moléculas,
cuando una onda electromagnética de longitud de onda definida incide sobre una
sustancia dada, la cual es una función de la concentración de la sustancia en la
trayectoria de la luz y del espesor de la muestra. Este instrumento solo posee lám-
para para el espectro visible, por lo que si se desean hacer lecturas en el espectro
ultravioleta o infrarrojo, es necesario cambiar la lámpara.

Pasos a seguir al usar Specctronic 20

Encender el instrumento usando la
perilla izquierda del frente. Permitir 5
minutos para calentamiento en el primer
encendido.

81
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Seleccionar la longitud de onda apro-

piada para la muestra a analizar.

Con el portamuestra vacío y cerrado,

ajustar la aguja de lectura a 0 % T  usan-
do la perilla de ajuste de cero.

Llenar a la mitad una celda con agua.

Se conoce como blanco. Colocarlo en el
portamuestra y cerrar la cubierta.

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Con el blanco en el porta muestra y la

cubierta cerrada, ajustar la aguja, meter
a 100 % T, usando la perilla de control de
luz en el frente derecho del instrumento.

Retirar el blanco y colocar la muestra

a analizar en el portamuestra y cerrar la
cubierta.

Registrar el valor de absorbancia (o %

T) from meter. En este caso, las lecturas
son 20 % T y 0.70 absorbancia.

Repetir este paso con estándares si se

está realizando una curva de calibración
o verificando proporcionalidad (Ley de
Beer).

Repetir este paso con una muestra de

concentración desconocida, de manera
que su absorbancia pueda ser compara-
da con la absorbancia de un estándar de
concentración conocida.

83
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Cuidados generales
Celdas
• Manipularlas solo por la parte superior.

• Limpiarlas solo si se requiere, con papel suave.

• Llenarlas hasta la marca para asegurar la lectura representativa.

• Introducirlas verificando que la marca de éstas coincida con la muesca del

equipo, para que siempre entre en la misma posición.

• No utilizar tubos de ensaye como sustitutos de celda, pues no están hechos

del vidrio adecuado.

Soluciones
Solo se realizan mediciones de soluciones translúcidas en el instrumento, la pre-
sencia de partículas suspendidas causaría un error muy grave.

Los valores de absorbancia que presentan un error relativo muy pequeño se

encuentran dentro de 0.2 y 0.8 (63 y 16 % T, respectivamente), por lo que debe
realizarse el procedimiento de manera correcta para que las lecturas estén dentro
de ese rango.

Lámparas
No trabajar a longitudes de onda mayores a 600 nm o menores a 400, ya que
están fuera del alcance de la lámpara de espectro visible, que es la que, general-
mente, tiene este tipo de instrumento, solo se deben utilizar soluciones coloridas.
Para trabajar en región infrarrojo o ultravisible, se tiene que conseguir la lámpara
adecuada.

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INSTRUCTIVO PARA EL MANEJO DEL

CROMATÓGRAFO DE LÍQUIDOS DE ALTA
RESOLUCIÓN PERKIN ELMER MODELO
Preparación de la fase móvil

A) Mezclar los solventes previamente, ajustado el pH.

B) Filtrar y llevar al ultrasonido para eliminar microburbujas de aire.

I. Encendido y programado de las condiciones de análisis

A) Encendido del equipo. Presionar el botón power de la bomba, del detector y

del registrador, dejar calentar por 15 minutos, colocar la fase móvil en el canal A o
B y la columna de trabajo.

B) Programación del flujo y la composición. Al encender, aparece en la panta-

lla electrónica de la bomba.

STP MIN FLW %A CURV

Etapa Tiempo Flujo % del disolvente del Gradiente

o paso canal A fase móvil

85
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Estos parámetros aparecen con algún número dado por la memoria del análisis
anterior

Para efectuar algún cambio en ellos

1) Presionar program y seleccionar del 1-9 en el teclado adjunto a la pantalla.

2) Presionar nuevamente el botón de program y aparecerá STP remarcado por

negro lo que indica que el cursor se encuentra allí localizado.

3) Presionar enter y el cursor se localizará en el siguiente evento de la panta-

lla; es decir, Min, si desea cambiarlo, se debe teclear de 1 a 999.

4) Presionar enter nuevamente y el cursor pasará a Flw, si desea cambiar el

flujo teclee el valor deseado (normalmente los flujos de fase móvil van de
0- 5 ml/ min, aunque los de trabajo común son de 0-2).

5) Si desea cambiar el porcentaje de disolvente, en canal A presione enter y

teclee la proporción, ya que, si es menor a 100, el restante para completar-
lo tomará la bomba del canal B por default (esto se realiza solo si el análisis
es por gradiente de fase móvil, ya que es una bomba binaria).

Cuando se termina el programa, aparecerá el paso o etapa 1 en la pantalla, el

cual se programará al igual que el paso 0.

6) Para ejecutar el programa presione las teclas run method y exit method.

7) Presione la tecla start bomb y la bomba comenzará a trabajar con el flujo

programado, espere unos 10 minutos para estabilizar el flujo y limpiar la
columna con el solvente utilizado como fase móvil.

Calibrado del detector

Una vez encendido y calentado durante 10 minutos, se ajusta manualmente la

longitud de onda deseada, cuidando que el seguro, colocado en la parte inferior (pe-
rilla negra), se ajuste hacia la izquierda y se cierre al contrario, una vez ajustada.

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1) Si se desea trabajar en longitudes de la región visible, se debe jalar el dis-

positivo colocado junto a la celda del detector.

2) Se presiona el botón naranja para ajustar el cero de absorbancia y así cali-

brar, ya que la fase móvil que ya está pasando por éste, es el blanco reac-
tivo.

C) Encendido y programación del integrador

1) Ajustar parámetros a fin de mejorar la presentación de la respuesta

• Zero, línea base (números enteros).

• Attn2 (números enteros, no mayores a 10).

• Ch sp (velocidad del papel).

• Thrsh, límite de ruido (números enteros del 1-4).

• Wd pk, ancho de pico.

• Ar Rej, área mínima del pico (8 valores desde 1 000 a 1 000 000).

• Estos tres últimos valores permiten tener respuesta que no se considera ruido.

Para obtener un cambio en estos valores, se oprime la tecla correspondiente, se

teclea con los valores numéricos el valor deseado y se oprime la tecla enter.

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II. Procedimiento de inyección

1. Colocar la jeringa en inyect, cargar la muestra.

2. Girar a lood.*

3. Retirar la jeringa.

4. Girar a inyect nuevamente.

*Al mismo tiempo se oprime la tecla star del integrador, para efectuar la co-
rrida.

III. Cuidados del equipo

1. Purgado de la bomba

a) Se retira la columna y se gira el botón de la parte baja frontal de la bomba

(ver figura).

b) Se incrementa el flujo de la bomba hasta 3-5 mL / minutos.

c) Se conecta la entrada de una jeringa de plástico sin aguja en la entrada del

botón y se extrae la fase móvil hasta que el flujo sea continuo y sin aire.

d) Se retira la jeringa y se regula nuevamente el flujo de trabajo en la bomba.

e) Se conecta nuevamente la columna.

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2. Cuidados de la jeringa

a) Al inyectar, deberá hacerse con mano firme y de forma rápida.

b) En caso necesario, enjuagar varias veces con la fase móvil la jeringa.

3. Cuidados del inyector

a) Si tiene fuga hacia enfrente (válvula de inyección), se debe cambiar el empa-

que interno (ver el Manual de Inyector).

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FUENTES CONSULTADAS

Ramette, A. (1988). Equilibrio y análisis químico. México: Fondo Educativo

Interamericano, pp. 72-74, 140-144, 148-155 y 158-161.

Harris, D. C. (1999). Análisis químico cuantitativo. México: Grupo Editorial

Iberoamérica, pp. 327-330.

Christian G. Química Analítica. México: Limusa. Capítulos. 15, 17, 22.

Skoog, D. y West D. (1988). Química Analítica. Madrid: McGraw-Hill /

Interamericana de España.

Skoog, D. y West D. (2001). Principios de análisis instrumental. Madrid: McGraw-

Hill / Interamericana de España.

Smith, R. y Martell, A. (1989). Critical Stability Constants. Estados Unidos:

Plenum Press.

Rovessac Annick F. Métodos y técnicas Instrumentales modernas. Ed. McGraw-

Hill Capítulos 2, 9,10,11, 20, 22

NOM-001-ECOL-1996 (1997). Norma Oficial Mexicana en Diario Oficial de la

Federación. México.

SEDUE (1988). Reglamento de la Ley General de Equilibrio Ecológico y la

protección al ambiente en materia de residuos peligrosos, en Diario Oficial de la
Federación. México: Diario Oficial

Rubinson/Rubinson. Química analítica contemporánea. México: Pearson

Educación

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FICHAS DE SEGURIDAD
Nombre Ácido bórico Fórmula H3BO3
PRIMEROS Inhalación Proporcionar aire limpio y reposo. Proporcionar asistencia médica.
AUXILIOS Ingestión Enjuagar la boca y proporcionar asistencia médica.
Contacto Enjuagar con agua abundante durante varios minutos (quitar las lentes de contacto,
con ojos si puede hacerse con facilidad) y proporcionar asistencia médica.
Contacto Quitar las ropas contaminadas. Aclarar y lavar la piel con agua y jabón.
con piel Proporcionar asistencia médica.
FUGAS Y Precauciones personales: utilizar todos los elementos de protección personal correspondientes
DERRAMES incluyendo respirador de filtro P2 contra partículas nocivas. Métodos de limpieza: barrer
la sustancia derramada e introducirla en un recipiente; si fuera necesario, humedecer el polvo
para evitar su dispersión. Eliminar el residuo con agua abundante.
DESECHOS Los restos de producto químico deben disponerse de acuerdo con la tecnología aprobada
y con la legislación local. El envase contaminado debe tratarse como el propio residuo químico.
No vertir en ningún sistema de alcantarillado, sobre el piso o extensión de agua.

Nombre Cafeína Fórmula C8H10N4O2

PRIMEROS Inhalación Aire limpio, reposo. Proporcionar asistencia médica.
AUXILIOS Ingestión Enjuagar la boca. Dar a beber una papilla de carbón activado y agua. Provocar
el vómito (ÚNICAMENTE EN PERSONAS CONSCIENTES). Proporcionar asistencia
médica.
Contacto Enjuagar con agua abundante durante varios minutos (quitar las lentes de contacto,
con ojos si puede hacerse con facilidad) y proporcionar asistencia médica.
Contacto Quitar las ropas contaminadas. Aclarar la piel con agua.
con piel Proporcionar asistencia médica.
FUGAS Y Precauciones personales: utilizar todos los elementos de protección personal correspondientes,
DERRAMES incluyendo respirador de filtro P2 contra partículas nocivas. Métodos de limpieza: barrer la sustancia
derramada e introducirla en un recipiente, si fuera necesario, humedecer el polvo para evitar su
dispersión. Recoger cuidadosamente el residuo, a continuación, trasladarlo a un lugar seguro.

DESECHOS Los restos de producto químico deberán disponerse de acuerdo con tecnología aprobada
y con la legislación local. El envase contaminado debe tratarse como el propio residuo químico.
No vertir en ningún sistema de alcantarillado, sobre el piso o extensión de agua.

Nombre Ácido acetilsalicílico Fórmula C9H8C4

PRIMEROS Inhalación
AUXILIOS Ingestión
Contacto con ojos
Contacto con piel
FUGAS Y
DERRAMES
DESECHOS

Enjuagar la boca y someter a atención médica.

Enjuagar con agua abundante durante varios minutos (quitar las lentes de contacto, si
puede hacerse con facilidad). Después, consultar a un médico.
Aclarar la piel con agua abundante o ducharse y solicitar atención médica.
NO verter en el alcantarillado. Barrer la sustancia derramada e introducirla en un recipiente, eliminar el
residuo con agua abundante y trasladarlo a continuación a un lugar seguro. (Protección personal
adicional: equipo autónomo de respiración).
Esta sustancia puede ser peligrosa para el ambiente. Debería prestarse atención especial al agua.

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Nombre Alcohol etílico Fórmula CH3CH2OH

PRIMEROS Inhalación Trasladar al aire fresco. Si la persona no respira, administrar respiración artificial.
AUXILIOS Si respira con dificultad, suministrar oxígeno. Mantener a la víctima abrigada y en reposo.
Buscar atención médica inmediatamente.
Ingestión Lavar la boca con agua. Inducir al vómito. No administrar eméticos, carbón animal ni leche.
Buscar atención médica inmediatamente (puede tratarse de alcohol desnaturalizado).
Contacto Lavar con abundante agua, mínimo durante 15 minutos. Levantar y separar los párpados
con ojos para asegurar la remoción del químico. Si la irritación persiste, repetir el lavado.
Buscar atención médica.
Contacto Lavar la piel con abundante agua. Retirar la ropa contaminada y lavarla con abundante agua
con piel y jabón.
FUGAS Y Mantener alejadas las fuentes de ignición. Cubrir el área de derrame con rocío de agua para
DERRAMES diluir el producto y eliminar vapores. En caso de pequeños derrames, utilizar material inerte
absorbente. Evitar que el producto sea conducido al drenaje.
DESECHOS Se puede realizar una incineración controlada del material una vez ha sido absorbido o se puede dejar evaporar.

Nombre Tetraborato de sodio Fórmula Na2B4O7

PRIMEROS Inhalación Aire limpio, reposo.
AUXILIOS Ingestión Provocar el vómito (UNICAMENTE EN PERSONAS CONSCIENTES), someter a
atención médica.
Contacto Enjuagar con agua abundante durante varios minutos (quitar las lentes de contacto,
con ojos si puede hacerse con facilidad) y proporcionar asistencia médica.
Contacto Lavar con agua corriente durante 15 min. Al mismo tiempo, quitarse la ropa
con piel contaminada y calzado. Solicite atención médica.
FUGAS Y Precauciones personales: respirador de filtro P2 para partículas nocivas. Precauciones ambientales:
DERRAMES en caso de incendio en el entorno, estan permitidas. Métodos de limpieza: barrer la sustancia
derramada e introducirla en un recipiente, recoger cuidadosamente el residuo, a continuación,
trasladarlo a un lugar seguro.
DESECHOS Los restos de producto químico deberían disponerse de acuerdo a tecnología aprobada y con
la legislación local. El envase contaminado, debe tratarse como el propio residuo químico.
No vertir en ningún sistema de alcantarillado, sobre el piso o extensión de agua.

Nombre Alcohol propílico Fórmula H3C-CH2-CH2OH

PRIMEROS Inhalación Trasladar al aire fresco. Si la víctima no respira administrar respiración artificial. Si respira
AUXILIOS con dificultad, suministrar oxígeno. Mantener la víctima abrigada y en reposo. Buscar
atención médica inmediatamente.
Ingestión Tomar carbón activado. Buscar atención médica inmediatamente.
Contacto con Lavar con abundante agua, mínimo durante 15 minutos. Levantar y separar los párpados
ojos para asegurar la remoción del químico. Si la irritación persiste, repetir el lavado. Buscar
atención médica.
Contacto con Retirar la ropa y lavar la piel con abundante agua y jabón.
piel
FUGAS Y Mantener alejadas fuentes de ignición. Cubrir el área de derrame con rocío de agua para diluir el
DERRAMES producto y eliminar vapores. En caso de pequeños derrames utilizar material inerte absorbente.
Evitar que el producto sea conducido al drenaje.
DESECHOS Se puede realizar una incineración controlada del material, una vez que haya sido absorbido
o se puede dejar evaporar.

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Nombre Hidróxido de sodio Fórmula NaOH

PRIMEROS Inhalación Trasladar al aire fresco. Si la persona no respira, administrar respiración
AUXILIOS artificial. Si respira con dificultad, suministrar oxígeno. Mantener a la persona
abrigada y en reposo.
Ingestión Lavar la boca con agua. Si está consciente, suministrar abundante agua. No
inducir el vómito. Buscar atención médica inmediatamente.
Contacto Lavar con abundante agua, mínimo durante 15 minutos. Levantar y separar
con ojos los párpados para asegurar la remoción del químico. Colocar una venda
esterilizada. Buscar atención médica.
Contacto Retirar la ropa y calzado contaminado. Lavar la zona afectada con abundante
con piel agua y jabón, mínimo durante 15 minutos. Si la irritación persiste, repetir el
lavado. Buscar atención médica.
FUGAS Y Evacuar o aislar el área de peligro. Restringir el acceso a personas inexpertas y sin la
DERRAMES debida protección. Ubicarse a favor del viento. Usar equipo de protección personal. Ventilar
el área. No permitir que la sustancia caiga en fuentes de agua y alcantarillas. Los residuos
deben recogerse con medios mecánicos no metálicos y colocarse en contenedores
apropiados para su posterior disposición.
DESECHOS Debe tenerse presente la legislación ambiental local vigente relacionada con la disposición
de residuos para su adecuada eliminación. Los residuos de este material pueden ser
llevados a un relleno sanitario legalmente autorizado para residuos químicos para su debida
neutralización.

Nombre Ácido acético Fórmula CH3COOH

PRIMEROS Inhalación Trasladar a la persona al aire fresco. Si no respira, administrar respiración
AUXILIOS artificial. Evitar la reanimación boca a boca. Si respira con dificultad,
suministrar oxígeno. Mantenerla abrigada y en reposo. Buscar atención
médica inmediatamente.
Ingestión Lavar la boca con agua. Si está consciente, suministrar abundante agua. No
inducir el vómito. Mantener a la víctima abrigada y en reposo. Buscar atención
médica inmediatamente.
Contacto Lavar con abundante agua, mínimo durante 15 minutos. Levantar y separar
con ojos los párpados para asegurar la remoción del químico. Si la irritación persiste,
repetir el lavado. Buscar atención médica.
Contacto Retirar la ropa y calzado contaminados. Lavar la zona afectada con
con piel abundante agua y jabón, mínimo durante 15 minutos. Si la irritación persiste,
repetir el lavado. Buscar atención médica inmediatamente. Extraer la
sustancia con un algodón impregnado de polietilenglicol 400.
FUGAS Y Evacuar o aislar el área de peligro (entre 50 y 100 metros en todas las direcciones), marcar
DERRAMES las zonas. Restringir el acceso a personas inexpertas y sin la debida protección. Ubicarse a
favor del viento. Usar equipo de protección personal. Ventilar el área. No permitir que caiga
en fuentes de agua y alcantarillas. Eliminar toda fuente de ignición. No inhalar los vapores ni
tocar el producto derramado. Absorber con material inerte como arena o tierra. Recoger y
depositar en contenedores con cierre hermético, cerrados, limpios, secos y marcados. Lavar
con abundante agua el piso. Usar agua en forma de rocío para reducir los vapores (líquido)
o las nubes de polvo (sólido). Recoger con palas no metálicas. Evitar el paso de la sustancia
al alcantarillado, neutralizar con sosa. Recoger la sustancia utilizando los absorbentes
adecuados.
DESECHOS Neutralizar con sosa cáustica diluida, recoger el residuo y enterrar según las leyes locales.
Puede considerarse su neutralización, dilución y vertimiento al desagüe. Tenga en cuenta
las leyes vigentes. Disponga de acuerdo con las reglamentaciones ambientales locales.

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Nombre Ácido clorhídrico Fórmula HCl

PRIMEROS Inhalación Trasladar a la víctima al aire fresco. Si no respira, administrar respiración
AUXILIOS artificial (evitar el método boca a boca). Si respira con dificultad suministrar
oxígeno. Mantener a la persona abrigada y en reposo. Buscar atención
médica inmediatamente.
Ingestión Lavar la boca con agua. Si está consciente, suministrar abundante agua.
No inducir el vómito. Si se produce de manera natural, inclinar a la persona
hacia el frente para evitar la broncoaspiración. Suministrar más agua.
Buscar atención médica.
Contacto Lavar con abundante agua, mínimo durante 15 minutos. Levantar y separar los
con ojos párpados para asegurar la remoción del químico. Si la irritación persiste, repetir
el lavado. Buscar atención médica.
Contacto Retirar la ropa y calzado contaminados. Lavar la zona afectada con abundante
con piel agua y jabón, mínimo durante 15 minutos. Si la irritación persiste, repetir el
lavado. Buscar atención médica.
FUGAS Y Evacuar o aislar el área de peligro. Restringir el acceso a personas innecesarias y sin debida
DERRAMES protección. Ubicarse a favor del viento. Usar equipo de protección personal. Ventilar el área.
No tocar el líquido, ni permitir el contacto directo con el vapor. Eliminar toda fuente de calor.
Evitar que la sustancia caiga en alcantarillas, zonas bajas y confinadas, para ello construya
diques con arena, tierra u otro material inerte. Mezclar con sosa o cal para neutralizar. Lavar
la zona con agua.
DESECHOS Debe tenerse presente la legislación ambiental local vigente relacionada con la disposición
de residuos para su adecuada eliminación. Considerar el uso del ácido diluido para
neutralizar residuos alcalinos. Adicionar cuidadosamente ceniza de sosa o cal, los productos
de la reacción se pueden conducir a un lugar seguro, la disposición en tierra es aceptable.

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Nombre Ácido nítrico Fórmula HNO3

PRIMEROS Inhalación Evaluar los signos vitales: pulso y velocidad de respiración;
AUXILIOS detectar cualquier trauma. En caso de que la persona no tenga
pulso, proporcionar rehabilitación cardiopulmonar; si no hay
respiración, dar respiración artificial y si es dificultosa, suministrar
oxígeno y sentar a la víctima.
Ingestión En caso de inconciencia, proceder como en el caso de inhalación.
Si la persona está consciente, lavar la boca con agua corriente,
sin que sea ingerida. No inducir el vómito ni tratar de neutralizarlo.
El carbón activado no tiene efecto. Dar a la persona 1 taza de agua
o leche, solo si se encuentra consciente. Continuar tomando agua,
aproximadamente una cucharada cada 10 minutos.

Contacto Lavarlos con agua tibia corriente de manera abundante, hasta su

con ojos eliminación total.
Contacto Lavar cuidadosamente el área afectada con agua corriente de
con piel manera abundante.
FUGAS Y Ventilar el área dependiendo de la magnitud del siniestro. Mantener el material
DERRAMES alejado de agua, en caso necesario, construir diques con sacos de arena, tierra
o espuma de poliuretano. Para absorber el derrame, puede utilizarse mezcla
de bicarbonato de sodio-cal sodada o hidróxido de calcio en relación 50:50,
mezclando lenta y cuidadosamente, pues se desprende calor. Una vez neutralizado,
lavar con agua. Para absorber el líquido, también puede usarse arena o cemento,
los cuales se deberán neutralizar posteriormente. Rociar agua para bajar
los vapores, el líquido generado en este paso, debe ser almacenado para
su tratamiento posterior, pues es corrosivo y tóxico. Tanto el material derramado,
el utilizado para absorber, contener y el generado al bajar vapores, deben ser
neutralizados con cal, cal sodada o hidróxido de calcio, antes de desecharlos.

DESECHOS Con cuidado (se generan calor y vapores), diluya con agua-hielo
- y ajuste el pH
a neutro con bicarbonato de sodio o hidróxido de calcio. El residuo neutro puede
tirarse al drenaje con agua en abundancia.

Nombre Agua desionizada Fórmula H3O y OH

PRIMEROS Inhalación No requerido
AUXILIOS Ingestión No requerido
Contacto No requerido
con ojos
Contacto No requerido
con piel
FUGAS Y Disponer conforme a las regulaciones locales vigentes para este tipo de sustancia, se
DERRAMES puede verter el producto por el desagüe.
DESECHOS No hay peligro ambiental.

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Nombre Fosfato de potasio Fórmula K2HPO4

PRIMEROS Inhalación Traslade a un lugar con ventilación adecuada. Si respira con dificultad, suministrar
AUXILIOS oxígeno. Solicite atención médica de inmediato.
Ingestión Dé a beber inmediatamente agua o leche. Nunca dé nada por la boca a una persona
que se encuentre inconsciente. Solicitar asistencia medica de inmediato.
Contacto Lavar suavemente con agua corriente durante 15 minutos, abriendo ocasionalmente
con ojos los párpados.
Contacto Lavar con agua corriente durante 15 minutos. Al mismo tiempo, quitarse la ropa
con piel contaminada y el calzado. Solicite atención médica.
FUGAS Y Use equipo de protección personal; con una pala limpia (plástico), coloque cuidadosamente el
DERRAMES material dentro de un recipiente limpio (cubeta de plastico o bolsa de polietileno), seco y cubra;
retire del área. Lave el área del derrame con agua, pero evitando que el agua de lavado escurra,
contener para evitar la introducción a las vías fluviales, alcantarillas, sótanos o áreas confinadas.
DESECHOS

Nombre Hidróxido de sodio Fórmula NaOH

PRIMEROS Inhalación Trasladar al aire fresco. Si no respira, administrar respiración artificial. Si respira con
AUXILIOS dificultad, suministrar oxígeno. Mantener a la persona abrigada y en reposo.
Ingestión Lavar la boca con agua. Si está consciente, suministrar abundante agua. No inducir
el vómito. Buscar atención médica inmediatamente.
Contacto Lavar con abundante agua, mínimo durante 15 minutos. Levantar y separar los
con ojos párpados para asegurar la remoción del químico. Colocar una venda esterilizada.
Buscar atención médica.

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