UNIVERSIDAD DE CONCEPCIÓN

FACULTAD DE CIENCIAS NATURALES

Y OCEANOGRÁFICAS

Evaluación del crecimiento en el Salmón del Atlántico (Salmo salar Linnaeus, 1758)
alimentado con probiótico BX-1 en cautiverio.

FRANCISCO ANGEL JORQUERA GONZÁLEZ

Seminario de Título presentado al

DEPARTAMENTO DE OCEANOGRAFÍA
DE LA UNIVERSIDAD DE CONCEPCIÓN

Para optar al Título de

BIÓLOGO MARINO

Concepción - Chile
2023
 AUTORIZACIÓN DE PUBLICACIÓN

Quien suscribe, Francisco Angel Jorquera González, 19.589.602-k, alumno de la

carrera de Biología Marina, de la Facultad de Ciencias Naturales y Oceanográficas, de la
Universidad de Concepción, declara ser autor de la tesis “Evaluación del crecimiento en
el Salmón del Atlántico (Salmo salar Linnaeus, 1758) alimentado con probiótico BX-1 en
cautiverio” y conceder derecho de publicación, comunicación al público y reproducción
de esa obra, en forma total o parcial en cualquier medio y bajo cualquier forma del mismo,
a la Universidad de Concepción, Chile, para formar parte de la colección material o digital
de cualquiera de las bibliotecas de la Universidad de Concepción y del Repositorio UDEC.
Esta autorización es de forma libre y gratuita, y considera la reproducción de la obra con
fines académicos y de difusión tanto nacional como internacionalmente.

Asimismo, quien suscribe declara que dicha obra no infringe derechos de autor de
terceros.

FIRMA

ii
Este Seminario de Título ha sido realizado en el Departamento de Oceanografía de la
Facultad de Ciencias Naturales y Oceanográficas.

Profesor Guía

Dr. Ariel Valenzuela Saldías

Departamento de Oceanografía
Universidad de Concepción, Concepción

Ha sido aprobada por la

Mg. Jorge Silva Acosta
Siguiente Comisión Evaluadora:
Departamento de Oceanografía
Universidad de Concepción, Concepción

Dr. Paul Sepúlveda Mellado

Ph.D. in Technology, Luleå University of
Technology, Suecia
TS Swedish Innovation Products SPA

Dr. Ariel Valenzuela Saldías

Departamento de Oceanografía
Universidad de Concepción, Concepción

Jefe de Carrera

Dr. Ariel Valenzuela Saldías

Departamento de Oceanografía
Universidad de Concepción, Concepción

iii
 DEDICATORIA

A mi madre, a mi padre Orlando, a mi hermana, y a mi abuelo Porfirio...

Gracias a ellos por formar parte de este camino

“Underneath darkened skies

There's a light kept alive”
“It's just a spark but it's enough to keep me going
And when it's dark out and no one's around it keeps glowing”

iv
 AGRADECIMIENTOS

Agradezco a mi madre por su apoyo incondicional, por ayudarme a crecer, por su

sabiduría, por sus consejos, por su amor y sus retos durante estos años. A papá Colicheo
por sus consejos y por el apoyo incondicional pese a todo. A mi hermana por estar
presente en este camino. A mi abuela por su amor y a mi abuelo que ya no está aquí por
sus sabias palabras, por esos momentos de pesca y por enseñarme lo valioso en la vida.

A Alex por ser mi compañero durante años en una ciudad donde todo era nuevo,
gracias por estar ahí cuando más lo necesite. A su familia, en especial a su padre por su
apoyo.
A Coni por su apoyo, amistad y paciencia en momentos difíciles.

Al Dr. Ariel Valenzuela por aceptar ser mi profesor guía, por su paciencia, su
confianza, por sus consejos, por su apoyo durante este tiempo y por brindarme un espacio
en su laboratorio.

A Mg. Jorge Silva por aceptar ser parte de mi comisión, por su conocimiento y por
su apoyo en los muestreos.

Al Dr. Paul Sepúlveda por aceptar ser parte de mi comisión, por confiarnos el
proyecto y por su financiamiento que hizo posible el desarrollo de la investigación.

A Niza Agurto por su apoyo, paciencia, conocimiento y disposición durante los

ensayos.

A Bernardo Fuentealba por su conocimiento y disposición para resolver dudas.

v
 ÍNDICE

ÍNDICE DE FIGURAS………………………………………………………………...ix
ÍNDICE DE TABLAS…………………………………………………………………xii
ÍNDICE ANEXOS…………………………………………………………………….xiii
1 RESUMEN ................................................................................................................ 1

2 ABSTRACT .............................................................................................................. 2

3 INTRODUCCIÓN ................................................................................................... 3

3.1 Hipótesis ............................................................................................................ 10

3.2 Objetivo general ................................................................................................ 10

3.2.1 Objetivos específicos ................................................................................. 10

4 MATERIALES Y METODOS.............................................................................. 11

4.1 Descripción del sistema de cultivo .................................................................... 11

4.2 Procedencia y aclimatación de los peces ........................................................... 11

4.3 Elaboración y caracterización del alimento ....................................................... 12

4.4 Alimentación ..................................................................................................... 13

4.5 Recambio de agua y limpieza de los estanques ................................................. 13

4.6 Parámetros fisicoquímicos del agua .................................................................. 13

4.7 Diseño experimental .......................................................................................... 13

4.7.1 Ensayo 1-A ................................................................................................. 14

4.7.2 Ensayo 1-B ................................................................................................. 14

4.7.3 Ensayo 2 ..................................................................................................... 15

4.8 Evaluación de crecimiento y eficiencia de alimentación .................................. 16

4.8.1 Muestreos biométricos ............................................................................... 16

4.8.2 Evaluación de crecimiento ......................................................................... 17

4.8.3 Evaluación de la eficiencia de alimentación .............................................. 18

vi
 4.9 Evaluación del bienestar animal ........................................................................ 18

4.9.1 Factor de condición (FC) ........................................................................... 18

4.9.2 Mortalidad .................................................................................................. 18

4.9.3 Análisis de parámetros sanguíneos ............................................................ 19

4.10 Análisis estadístico ........................................................................................ 20

5 RESULTADOS....................................................................................................... 21

5.1 Ensayo 1-A ........................................................................................................ 21

5.1.1 Crecimiento ................................................................................................ 21

5.1.2 Factor de conversión de alimento (FCR) ................................................... 22

5.1.3 Factor de condición (FC) y mortalidad ...................................................... 23

5.2 Ensayo 1-B ........................................................................................................ 25

5.2.1 Crecimiento ................................................................................................ 25

5.2.2 Factor de conversión de alimento (FCR) ................................................... 26

5.2.3 Factor de condición (FC) y nivel de mortalidad ........................................ 27

5.3 Ensayo 2 ............................................................................................................ 28

5.3.1 Crecimiento ................................................................................................ 28

5.3.2 Factor de conversión de alimento (FCR) ................................................... 29

5.3.3 Factor de condición (FC) y nivel de mortalidad ........................................ 30

5.4 Análisis de parámetros sanguíneos .................................................................... 31

6 DISCUSIÓN ........................................................................................................... 34

6.1 Crecimiento ....................................................................................................... 34

6.2 Eficiencia de alimentación ................................................................................ 36

6.3 Bienestar animal de los peces ............................................................................ 37

7 CONCLUSIONES .................................................................................................. 41

8 BIBLIOGRAFÍA .................................................................................................... 42

vii
9 ANEXOS ................................................................................................................. 49

viii
 ÍNDICE DE FIGURAS

Figura 1. Producción acuícola mundial,1991-2020. Fuente: FAO, 2022b. ..................... 3

Figura 2. (a) Cosechas por grupo de especies, mayo de 2022. (b) Principales cosechas por
recurso acumuladas a mayo del 2022 Fuente: SUBPESCA, 2022. ................................... 4
Figura 3. Efecto de la dieta mezclada con BX-1 en la supervivencia de pollos infectados
en el campo con virus de la enfermedad de Newcastle (VEN). Fuente: Murakami et al.
(2020). ................................................................................................................................ 6
Figura 4. (a) Fotografía del sistema de recirculación acuícola (SRA) y (b) los estanques
del Laboratorio de Piscicultura y Patología Acuática (LPPA) de la Universidad de
Concepción. ...................................................................................................................... 11
Figura 5. Fotografías de los instrumentos utilizados para los estudios biométricos (a)
balanza, (b) ictiómetro. .................................................................................................... 17
Figura 6. Centrifuga MiniSpin Eppendorf con las muestras sanguíneas en tubos
Eppendorf. ........................................................................................................................ 20
Figura 7. Fluctuación del (a) peso y (b) longitud en los ejemplares del ensayo 1-A durante
70 días. Los valores corresponden al promedio ± error estándar. (Línea segmentada azul
marino) grupo control con dieta D-0, (azul) grupo con dieta D-1, (azul grisáceo) grupo
con dieta D-2 y (gris) grupo con dieta D-2 a ración (0,9 %). .......................................... 21
Figura 8. Fluctuación de la (a) tasa de crecimiento específico (SGR) y del (b) coeficiente
térmico de crecimiento (TGC3) en los ejemplares del ensayo 1-A durante 70 días. Los
valores corresponden al promedio del grupo. (Línea segmentada azul marino) grupo
control con dieta D-0, (azul) grupo con dieta D-1, (azul grisáceo) grupo con dieta D-2 y
(gris) grupo con dieta D-2 a ración (0,9 %). .................................................................... 22
Figura 9. Factor de conversión de alimento (FCR) de los ejemplares del ensayo 1-A.
(azul) FCR biológico, (gris) FCR económico, (CT-1A) grupo control con dieta D-0 del
ensayo 1-A, (D1-1A) grupo con dieta D-1 del ensayo 1-A, (D2-1A) grupo con dieta D-2
del ensayo 1-A, (D2/0,9-1A) grupo con dieta D-2 a ración (0,9 %) del ensayo 1-A....... 23
Figura 10. Fluctuación del factor de condición (FC) en los ejemplares del ensayo 1-A
durante 70 días. Los valores corresponden al promedio ± error estándar. (Azul marino)

ix
grupo control con dieta D-0, (azul) grupo con dieta D-1, (azul grisáceo) grupo con dieta
D-2 y (gris) grupo con dieta D-2 a ración (0,9 %). .......................................................... 24
Figura 11. Fluctuación de la mortalidad en los ejemplares del ensayo 1-A durante 70 días.
(Gris) mortalidad acumulada, (azul) total de los ejemplares muertos (CT-1A) grupo
control con dieta D-0 del ensayo 1-A, (D1-1A) grupo con dieta D-1 del ensayo 1-A, (D2-
1A) grupo con dieta D-2 del ensayo 1-A, (D2/0,9-1A) grupo con dieta D-2 a ración (0,9
%) del ensayo 1-A. ........................................................................................................... 24
Figura 12. Fluctuación del (a) peso y (b) longitud en los ejemplares del ensayo 1-B
durante 42 días. Los valores corresponden al promedio ± error estándar. (Línea
segmentada azul marino) grupo control con dieta D-0, (azul) grupo con dieta D-1, (azul
grisáceo) grupo con dieta D-2 y (gris) grupo con dieta D-2 a ración (0,9 %). ................ 25
Figura 13. Fluctuación de la (a) tasa de crecimiento específico (SGR) y del (b) coeficiente
térmico de crecimiento (TGC3) en los ejemplares del ensayo 1-B durante 42 días. Los
valores corresponden al promedio ± error estándar. (Línea segmentada azul marino) grupo
control con dieta D-0, (azul) grupo con dieta D-1, (azul grisáceo) grupo con dieta D-2 y
(gris) grupo con dieta D-2 a ración (0,9 %). .................................................................... 26
Figura 14. Factor de conversión de alimento (FCR) de los ejemplares del ensayo 1-B.
(azul) FCR biológico, (gris) FCR económico, (CT-1B) grupo control con dieta D-0 del
ensayo 1-B, (D1-1B) grupo con dieta D-1 del ensayo 1-B, (D2-1B) grupo con dieta D-2
del ensayo 1-B, (D2/0,9-1B) grupo con dieta D-2 a ración (0,9 %) del ensayo 1-B. ...... 27
Figura 15. Fluctuación del factor de condición (FC) en los ejemplares del ensayo 1-B
durante 42 días. Los valores corresponden al promedio ± error estándar. (Azul marino)
grupo control con dieta D-0, (azul) grupo con dieta D-1, (azul grisáceo) grupo con dieta
D-2 y (gris) grupo con dieta D-2 a ración (0,9 %). .......................................................... 28
Figura 16. Fluctuación del (a) peso, (b) longitud, (c) tasa de crecimiento específico (SGR)
y (d) coeficiente térmico de crecimiento (TGC3) en los ejemplares del ensayo 2 durante
39 días. Los valores corresponden al promedio ± error estándar. (Línea segmentada azul
marino) grupo control con dieta D-0, (azul) grupo con dieta D-1 y (azul grisáceo) grupo
con dieta D-2. ................................................................................................................... 29

x
Figura 17. Factor de conversión de alimento (FCR) de los ejemplares del ensayo 2. (azul)
FCR biológico, (gris) FCR económico, (CT-2) grupo control con dieta D-0 del ensayo 2,
(D1-2) grupo con dieta D-1 del ensayo 2 y (D2-2) grupo con dieta D-2 del ensayo 2. ... 30
Figura 18. Fluctuación del factor de condición (FC) en los ejemplares del ensayo 2
durante 39 días. Los valores corresponden al promedio ± error estándar. (Azul marino)
grupo control con dieta D-0, (azul) grupo con dieta D-1 y (azul grisáceo) grupo con dieta
D-2. .................................................................................................................................. 31
Figura 19. Fluctuación de la glucosa (a), proteínas totales (b), colesterol (c), triglicéridos
(d), fosfatasa alcalina (e) y cortisol (f) en S. salar en los (1-A) ensayo 1-A, (1-B) ensayo
1-B y (2) ensayo 2. Los valores corresponden al promedio ± error estándar. (azul marino)
grupo control con dieta D-0, (azul) grupo con dieta D-1, (azul grisáceo) grupo con dieta
D-2 y (gris) grupo con dieta D-2 a ración (0,9 %). .......................................................... 33

xi
 ÍNDICE DE TABLAS

Tabla 1. Ingredientes y composición proximal de las dietas........................................... 12

Tabla 2. Parámetros fisicoquímicos iniciales del agua en los ensayos 1-A, 1-B y 2. Los
valores corresponden al promedio ± error estándar. ........................................................ 13
Tabla 3. Diseño experimental del ensayo 1-A con datos iniciales por grupos de S. Salar
de las condiciones, del alimento y los parámetros fisicoquímicos del agua. Los valores
corresponden al promedio ± error estándar. ..................................................................... 14
Tabla 4. Diseño experimental del ensayo 1-B con datos iniciales por grupos de S. Salar
de las condiciones, del alimento y los parámetros fisicoquímicos del agua. Los valores
corresponden al promedio ± error estándar. ..................................................................... 15
Tabla 5. Diseño experimental del ensayo 2 con datos iniciales por grupos de S. Salar de
las condiciones, del alimento y los parámetros fisicoquímicos del agua. Los valores
corresponden al promedio ± error estándar. ..................................................................... 16

xii
 ÍNDICE DE ANEXOS

Anexo 1. Fotografias de los residuos desprendidos del pellet de calibre 2 mm. Residuos
de las dieta (a) D-0, (b) D-1 y (c) D-2.............................................................................. 49

xiii
 1 RESUMEN

En la acuicultura, la alimentación suele representar la tasa más alta en costos. Se

ha descrito que el uso de probióticos confiere beneficios a los peces como mejorar la salud,
el crecimiento y la conversión alimenticia. Uno de los probióticos que brinda los
beneficios anteriores es el BX-1 a través de microorganismos como la bacteria ácido
láctico (BAL) Pediococcus sp. y las levaduras Pichia sp. y Dekkera sp. Sin embargo, estos
beneficios a la salud y crecimiento solo se conocen en especies terrestres y no así para las
acuáticas. Se postula que considerando los efectos positivos descritos para las especies
que conforman el consorcio microbiano del probiótico BX-1 sobre crecimiento y el estado
de salud de los animales, la utilización de este nuevo probiótico en el alimento para S.
salar en la etapa de agua dulce inducirá un mayor rendimiento en crecimiento y sin efectos
negativos en la salud de los peces.
Se evaluó el efecto del probiótico BX-1 en S. salar en tres dietas: dieta comercial
sin dosis probiótico BX-1(D-0), dieta comercial + dosis probiótico BX-1 (1%) (D-1) y
dieta comercial + dosis probiótico BX-1 (2%) (D-2). El estudio consistió en tres ensayos
1-A, 1-B y 2, donde se evaluó el crecimiento mediante el peso, longitud, la tasa de
crecimiento específico (SGR) y el coeficiente térmico de crecimiento (TGC3). La
eficiencia de alimentación por el factor de conversión de alimento (FCR). El bienestar
animal por medio del factor de condición (FC), mortalidad y análisis de parámetros
sanguíneos.
Los resultados del crecimiento en talla y peso en los ensayos (1-A, 1-B, 2) no
mostraron diferencias significativas, pero si una tendencia al aumento en peso y una
disminución en el SGR y TGC3 en los grupos alimentados con el probiótico. En la
eficiencia de alimentación de los ensayos, el SFR se mantuvo en promedio entre 90-100g
y los FCR no mostraron diferencias significativas, pero si una tendencia a la disminución
en los grupos alimentados con probiótico. Los resultados para la evaluación del estado de
salud en el análisis de parámetros sanguíneos mostraron que los peces estaban en buen
estado. En conclusión, el uso del probiótico BX-1 como aditivo en la dieta de S. salar
podría mejorar el crecimiento, la eficiencia de alimentación y el estado de salud.

1
 2 ABSTRACT

In aquaculture, feed usually represents the highest rate of cost. The use of
probiotics has been described as conferring benefits to fish such as improved health,
growth and feed conversion. One of the probiotics that provides the above benefits is BX-
1 through microorganisms such as the lactic acid bacterium (LAB) Pediococcus sp. and
the yeasts Pichia sp. and Dekkera sp. However, these benefits to health and growth are
only known for terrestrial species and not for aquatic ones. It is postulated that considering
the positive effects described for the species that make up the microbial consortium of the
probiotic BX-1 on growth and the health status of the animals, the use of this new probiotic
in food for S. salar in the water stage sweet will induce a higher growth performance and
without negative effects on the health of the fish.
The effect of the probiotic BX-1 on S. salar was evaluated in three diets:
commercial diet without BX-1 probiotic dose (D-0), commercial diet + BX-1 probiotic
dose (1%) (D-1) and diet commercial + BX-1 probiotic dose (2%) (D-2). The study
consisted of three trials 1-A, 1-B and 2, where growth was evaluated by weight, length,
specific growth rate (SGR) and thermal growth coefficient (TGC3). Feed efficiency by
feed conversion factor (FCR). Animal welfare through the condition factor (FC), mortality
and analysis of blood parameters.
The results of the growth in height and weight in the trials (1-A, 1-B, 2) did not
show significant differences, but a tendency to increase in weight and a decrease in SGR
and TGC3 in the groups fed with the probiotic. In the feeding efficiency of the trials, the
SFR remained on average between 90-100g and the FCR did not show significant
differences, but a downward trend in the groups fed with probiotics. The results for the
evaluation of the state of health in the analysis of blood parameters showed that the fish
were in good condition. In conclusion, the use of the probiotic BX-1 as an additive in the
diet of S. salar could improve growth, feeding efficiency and health status.

2
 3 INTRODUCCIÓN

La acuicultura es el cultivo de organismos acuáticos (peces, moluscos, crustáceos

y plantas) tanto en zonas costeras como del interior que implica intervenciones en el
proceso de cría para aumentar la producción (FAO, 2022a). La producción acuícola
mundial en 2020 alcanzó un récord de 122,6 millones de toneladas (Figura 1) donde un
49,2% perteneció a la acuicultura de animales acuáticos predominando especies como la
carpa herbívora (Ctenopharyngodon idellus) con un 11,8% en la acuicultura continental y
el salmón del atlántico (S. salar) con un 32,6% en acuicultura marina y costera (FAO,
2022b). Los salmónidos han contribuido a la acuicultura como especies versátiles y de
alto valor donde destacan importantes productores como Noruega, Chile, Reino Unido de
Gran Bretaña e Irlanda del Norte, Canadá, Japón y Grecia (FAO, 2020). Para el 2020 en
términos de valor las exportaciones de salmón fueron de 27.6 mil millones de USD
liderado por Noruega y Chile, donde este último figuró como el segundo productor más
grande del mundo (FAO, 2022b).

Figura 1. Producción acuícola mundial,1991-2020. Fuente: FAO, 2022b.

En la acuicultura chilena se registraron desembarques en cosechas acumuladas a

mayo del 2022 de 625 mil toneladas, cifra 2,7% menor al año 2021 (Figura 2 (a)), donde
los peces aportaron con el 60,4% del total de la acuicultura mientras que los moluscos un

3
38,7% y algas 0,9%; siendo las principales especies de salmónidos cosechados el salmón
del atlántico (S. salar) con un 46,9%, salmón del pacífico (O. kisutch) un 8,2% y trucha
arcoíris (O. mykiss) un 5,3% (Figura 2 (b)) (SUBPESCA, 2022). La salmonicultura en
Chile ha experimentado un crecimiento de ingresos por exportaciones debido al aumento
de los precios y a la fuerte demanda mundial en las Américas, Europa y Asia, donde las
exportaciones destacaron con el 83,1% correspondiente a salmónidos (FAO, 2020;
SUBPESCA, 2022).

a)

b)
Ostra del Pacífico
Spirulina
Otros (abalones, etc.)
Ostión del Norte
Pelillo
Trucha Arcoiris
Salmon del Pacífico
Chorito
Salmón del Atlántico
0% 10% 20% 30% 40% 50%

Figura 2. (a) Cosechas por grupo de especies, mayo de 2022. (b) Principales cosechas
por recurso acumuladas a mayo del 2022 Fuente: SUBPESCA, 2022.

Sin embargo, existe considerable evidencia por World Wildlife Fund (WWF)
indicando el impacto de la salmonicultura en los ecosistemas como por contaminación
local por nutrientes, desechos de alimentos y fecas, contaminación química local por uso
de tratamientos químicos, efecto sobre la fauna silvestre por peces escapados e impacto
ambiental global, entre otros (FAO, 2009). Se prevé que para 2030 un 62% de la

4
producción acuícola mundial este compuesta en su mayoría por especies de agua dulce,
así mismo un aumento en la producción de especies de mayor valor (camarón, salmón y
trucha) y un aumento en los costos de alimentación debido a una menor disponibilidad de
harina y aceite de pescado (FAO, 2020). De este modo en el cultivo de salmones la
alimentación se vuelve fundamental ya que suele representar la tasa más alta en costos en
la acuicultura, alrededor del 50% de las operaciones (Salmonexpert, 2018).

En este contexto es que cualquier medio que permita alcanzar los objetivos de
producción definidos como: 1.- tener la mayor cantidad de peces en el menor volumen de
agua posible y 2.- tener el máximo de peces en el menor tiempo posible, son siempre
deseables y apuntan a medios que permitan incrementar el crecimiento. Uno de los
aditivos al alimento que estimula el crecimiento, pero además la respuesta inmune, la
sobrevivencia, aumenta la resistencia a enfermedades, aumenta el apetito, mejora la
conversión alimenticia, favorecen el estado de salud y de este modo el crecimiento en
peces de cultivos son los probióticos (Pérez-Chabela et al., 2020). Los probióticos han
sido definidos por la FAO (Organización de las Naciones Unidas para la Agricultura y la
Alimentación) y la OMS (Organización Mundial de la Salud) como microorganismos
vivos que cuando son administrados en cantidades adecuadas confieren beneficios para la
salud del huésped (FAO, 2001). En acuicultura el uso de estos es amplia, variada y con
diversos efectos productivos, generalmente se están evaluando nuevos probióticos para su
uso en cultivo de peces y uno nuevo para la salmonicultura como BX-1 de TSST-Energy
Ltda.

BX-1 es un probiótico obtenido desde una fuente natural compuesto

principalmente de microorganismos como la bacteria ácido láctica (BAL) Pediococcus sp.
y levaduras como Pichia sp. y Dekkera sp., es decir es un consorcio microbiano vivo en
estado latente. Es utilizado como un aditivo alimenticio cuyas principales propiedades son
tolerancia a pH bajo en el tracto intestinal, multiplicación celular rápida, establecimiento
rápido en el tracto digestivo de los animales y activo a bajas concentraciones. (TSST,
2022). Del consorcio microbiano se conoce su aplicación sobre especies terrestres (e.g.
cerdos, aves y ratas) pero no así para especies acuáticas, aun cuando el proveedor del
5
probiótico sugiere que existe un efecto importante en camarones. Sin embargo, estos datos
no se encuentran respaldados por artículos científicos. Según Murakami et al. (2020) el
probiótico disminuye la mortalidad en aves infectadas con el paramixovirus (agente
causante de la enfermedad de Newcastle) (Figura 3), debido a que podrían mejorar la
función biológica en las aves y suprimir la infección viral o reducir la gravedad de la
enfermedad, debido a la ingesta de bacterias que activaría a los linfocitos natural killer
(NK) lo que sugiere una relación entre la microflora en el tracto digestivo y la inmunidad.

Figura 3. Efecto de la dieta mezclada con BX-1 en la supervivencia de pollos infectados

en el campo con virus de la enfermedad de Newcastle (VEN). Fuente: Murakami et al.
(2020).
El probiótico está constituido por BAL caracterizadas por producir ácido láctico
como el principal producto de la fermentación, comprendiendo un diverso grupo de
organismos Gram-positivos (König & Fröhlich, 2017). Pediococcus sp. es un tipo de
BAL en forma de coco, Gram-positivo, inmóvil y homofermentativo con características
anaeróbicas facultativas y de degradación de carbohidratos (Jiang et al., 2021). Son
aislados de los alimentos en especial los fermentados, como encurtidos, productos lácteos
y salchichas, también se encuentran en carnes, vegetales y heces humanas (Qi et al., 2021).
Son utilizadas en alimentos para proporcionar una amplia variedad de beneficios tales
como reducción del pH en el intestino, producción de enzimas digestivas y vitaminas,

6
producción de sustancias antibacterianas como bacteriocinas, reconstrucción y
construcción de la microflora intestinal, entre otros (Parra, 2010).

La mayoría de los Pediococcus aislados tienen efectos probióticos con actividad

antibacteriana, antioxidantes, bioconservantes, entre otros (Qi et al., 2021). Sin embargo,
se desconoce los efectos secundarios, usos y dosis (Jiang et al, 2021). Estudios en diversas
especies de peces como el pargo japonés (Pagrus major) muestran que estimula la ingesta
de alimento, mejora el crecimiento y las condiciones de salud de esta especie (Dawood et
al., 2016). En la carpa común (Cyprinus carpio) recomiendan su uso para mejorar el
rendimiento del crecimiento, la actividad de las enzimas digestivas y las respuestas
hemato-inmunológicas (Ahmadifar et al., 2020) y en S. salar se demostró que la
suplementación en la dieta puede modular la respuesta antiviral (Jaramillo-Torres et al.,
2019). Por otro lado, se ha encontrado evidencia de que en S. salar los BAL además de
producir compuestos antimicrobianos contra los patógenos poseen la capacidad de
colonización en el tracto gastrointestinal, donde tolera las condiciones gastrointestinales
(estómago e intestino) con una alta capacidad de crecimiento y adhesión al moco intestinal
(Amin, et al., 2017).

Las levaduras pueden interactuar con las BAL de forma natural logrando favorecer
su crecimiento mediante la producción de aminoácidos y nitrógeno para su supervivencia
(Zoumpourtikoudi et al., 2018). De este modo BX-1 se compone de levaduras como
Millerozyma (Pichia) y Brettanomyces (Dekkera). Son de importancia en la producción
de alimentos y se encuentran en suelos, aguas dulces y saladas, tracto digestivo de
mamíferos y como simbióticas en insectos (Cepero de García, 2012). También se sabe
que las levaduras presentan propiedades antimicrobianas, probióticas y se ha informado
que actúan como probióticos para humanos, ganado, pez cebra y artemia
(Zoumpourtikoudi et al., 2018).

Pichia es una levadura diploide halotolerante que puede producir altos

rendimientos de glicerol y xilitol, aislada desde la producción de alimentos (e. g. bebidas
alcohólicas fermentadas, pasta de soja, entre otros) y la fermentación, destacando
7
características como la producción de toxinas antibacterianas (Hong et al., 2018).
Estudios han demostrado sus propiedades probióticas en ratones observando una notable
actividad antibacteriana contra Salmonella typhimurium (França et al., 2015) y en aves de
corral (Gil de los Santos et al., 2018). Por otra parte, según Wang & Kim (2019) han
demostrado que la adición del probiótico complejo (Bacillus subtilis y Pichia farinosa) en
las dietas mejoró el crecimiento en los cerdos y la ganancia diaria promedio aumento
significativamente en las dietas con 0,2 % de probiótico, así mismo, indican que una
concentración más baja de probiótico al 0,1% no fue adecuada para alterar las poblaciones
microbianas intestinales de los cerdos lo que afectaría el rendimiento del crecimiento.
Dekkera sp. es una levadura anaeróbica facultativa que se encuentra en diferentes
alimentos fermentados (e. g. vino, refrescos, lácteos) (Schifferdecker et al., 2014).
Destacando características como producción de ácido acético en condiciones aeróbicas,
absorción de azúcar y metabolismo energético eficiente (Passoth et al., 2007). Utiliza
nitrato y posee tolerancia alta a inhibidores como otros microbios o químicos presentes en
el medio de fermentación (Steensels et al., 2015).

En el contexto de probióticos utilizados en salmonicultura el probiótico BX-1 es

un aditivo, el cual basado en las propiedades de cada uno de sus componentes ofrecería
ventajas sobre otros probióticos. Sin embargo, el complejo microbiano no ha sido
evaluado en su conjunto en ninguna de las etapas del desarrollo en salmónidos. La
industria de alimentos de salmones es una actividad de alta exigencia que demanda
estudios científicos que prueben la factibilidad del uso de estos nuevos aditivos ya sea por
sus propiedades beneficiosas, así como por la evaluación de efectos secundarios
negativos.

De este modo para la utilización del probiótico BX-1 en S. salar es relevante

evaluar la tolerancia e inocuidad del probiótico mediante análisis sanguíneos que permitan
monitorear tanto el estado de salud como nutricional de los peces a través de enzimas y
metabolitos en la sangre (Sáez et al., 2018). La glucosa es la principal fuente de energía
y sustrato esencial para el metabolismo celular (Malini et al., 2018). Los aumentos en la
glucemia se inducen por la presencia de factores estresantes como cambios en la
8
composición de la dieta, tratamiento con hormonas, privación de alimentos e hipoxia
(Polakof et al., 2012). Las proteínas totales (albúmina y globulina) se utilizan como un
indicador de la condición fisiológica de los peces, en la evaluación de la salud, el estado
de estrés y la condición corporal (Peyghan et al., 2014; Kandalski et al., 2019). Su
disminución se asocia a ayuno, desnutrición, disfunción hepática, infecciones producidas
por patógenos, entre otras (Cáceres, 2018). El colesterol es un precursor de hormonas que
se utiliza como indicador del estado nutricional, de la función endocrina y de la integridad
de órganos vitales (hígado y riñones) (Mohamed et al., 2019). Se ha asociado su aumento
a una alta proporción de grasas en la composición de los alimentos y a la administración
de plaguicidas en ambientes acuáticos (Sáez et al., 2018; Vega, 2013). Los triglicéridos
son lípidos sintetizados en el hígado que constituyen el almacenamiento de energía
(Müller & Bittencourt, 2021). Se utiliza como indicador del estado nutricional, de la
función endocrina y de la integridad de órganos vitales (hígado y riñones) (Mohamed et
al., 2019). La fosfatasa alcalina es una enzima que está presente en los tejidos como
intestino, riñón, hueso e hígado, su aumento indica lesiones intestinales, daños renales,
raquitismo, entre otros efectos (Washington & Van Hoosier, 2012). Es sensible a cambios
de temperatura, episodios de ayuno y mal nutrición (Müller & Bittencourt, 2021). El
cortisol es la principal hormona corticosteroide en los peces, utilizado como indicador del
bienestar y su producción responde a condiciones de estrés como enfermedades, mala
calidad del agua, anestésicos, entre otros (Ellis et al., 2012).
En resumen, debido a la inexistencia de antecedentes de los efectos del probiótico
BX-1 en S. salar y los potenciales beneficios que la incorporación de esta mezcla de
probióticos puede significar para la actividad salmonera es relevante abordar esta
problemática para aportar con un probiótico probado y seguro para esta industria.
Especialmente si junto a sus propiedades mejora el crecimiento de los peces y a su vez
promueve el estado de la salud lo que se traduciría en la disminución de los costos
productivos asociados a la alimentación debido a que con la misma cantidad de alimento
los peces crecerán en menor tiempo por una mejora en la absorción de nutrientes
promovido por el aditivo BX-1.

9
3.1 Hipótesis

Considerando los efectos positivos descritos para las especies que conforman el
consorcio microbiano del probiótico BX-1 sobre crecimiento y el estado de salud de los
animales, la utilización de este nuevo probiótico en el alimento para S. salar en la etapa
de agua dulce inducirá un mayor rendimiento en crecimiento y sin efectos negativos en la
salud de los peces.

3.2 Objetivo general

Evaluar el efecto del probiótico BX-1 en la especie de S. salar cultivado en un

sistema de recirculación acuícola (SRA).

3.2.1 Objetivos específicos

• Evaluar el crecimiento y la eficiencia de alimentación en los peces alimentados

con probiótico BX-1 como aditivo por medio de los parámetros zootécnicos.

• Evaluar el bienestar animal de los peces alimentados con el probiótico BX-1 por
medio de los parámetros sanguíneos, la mortalidad y el factor de condición.

10
 4 MATERIALES Y METODOS

4.1 Descripción del sistema de cultivo

Los estudios se realizaron en el Laboratorio de Piscicultura y Patología Acuática

(LPPA) de la Universidad de Concepción, el que cuenta con sistemas de recirculación
acuícola (SRA) (Figura 4), sistema de control de temperatura y de aireación constante.
Previa recepción de los peces se realizó la sanitización del sistema, además del ajuste de
parámetros fisicoquímicos y el análisis microbiológico del agua.
a) b)

Figura 4. (a) Fotografía de la planta de tratamiento de recirculación acuícola (SRA) y

(b) los estanques del Laboratorio de Piscicultura y Patología Acuática (LPPA) de la
Universidad de Concepción.
4.2 Procedencia y aclimatación de los peces

Se obtuvieron 750 juveniles de S. salar con un peso inicial de 45g en promedio,

procedentes de Salmones Camanchaca del centro “unidad productora de smolts (UPS)
Petrohue”, los que fueron trasladados a las instalaciones del LPPA. La aclimatación se
realizó durante un periodo de dos semanas en estanques de 400 L con 250 peces en cada
uno, como medida profiláctica se mantuvieron durante todos los ensayos al 5‰ de
salinidad para prevenir infecciones por hongos. Los peces fueron alimentados con dieta
comercial a una ración diaria del 1 % de la biomasa de cada estanque.

11
4.3 Elaboración y caracterización del alimento

El alimento utilizado a partir de la mezcla comercial fue proporcionado por la

empresa Salmofood y la adición de BX-1 al pellet se realizó en el Laboratorio de Nutrición
y Fisiología de Peces del Departamento de Ciencias Agropecuarias y Acuícolas de la
Universidad Católica de Temuco. Se formularon tres dietas (D-0: dieta comercial sin dosis
probiótico BX-1, D-1: dieta comercial + dosis probiótico BX-1 (1%) y D-2: dieta
comercial + dosis probiótico BX-1 (2%)) en calibres de 2 y 4 mm cuya composición
proximal e ingredientes se muestran en la Tabla 1.

Tabla 1. Ingredientes y composición proximal de las dietas.

Ingredientes (%) D-0 D-1 D-2
Harina de pescado 51,25 51,25 51,25
Concentrado proteico de soya 12,44 12,44 12,44
Sub productos de trigo 12 12 12
Gluten de maíz 5 5 5
Biomasa (proplex) 2 2 2
Lisina sulfato 1,07 1,07 1,07
Premix vit min 0,8 0,8 0,8
Fosfato Monoamónico 0,3 0,3 0,3
Astaxantina 10% 0,04 0,04 0,04
Antioxidante 0,03 0,03 0,03
Aceite de pescado 8,61 8,61 8,61
Aceite vegetal 6,46 5,46 4,46
Probiótico BX1 0 1 2
Análisis proximal (%)
Materia seca 105°C 96,69 96,76 96,73
Proteína 53,23 54,12 54,56
Extracto Etéreo 19,25 18,29 17,01
Fibra 1,38 1,18 1,35
Cenizas Totales 9,45 9,55 9,81
Extracto no nitrogenado 16,7 16,87 17,28
Fósforo 1,44 1,41 1,41
Energía Bruta (MJ/Kg) 23,73 23,39 23,24
Nota: (D-0) dieta comercial sin dosis probiótico BX-1, (D-1) dieta comercial + dosis probiótico BX-1 (1%), (D-2) dieta
comercial + dosis probiótico BX-1 (2%).

12
4.4 Alimentación

La alimentación de los ejemplares se especifica según las dietas, raciones, calibre

y frecuencia para el ensayo 1-A (Tabla 3), ensayo 1-B (Tabla 4) y ensayo 2 (Tabla 5).
Las raciones se suministraron de modo manual dos veces al día (mañana y tarde).

4.5 Recambio de agua y limpieza de los estanques

Se realizaron recambios de agua (20% del total) dos veces por semana y a diario
la limpieza de los estanques que consistió en retirar la materia orgánica y los restos de
alimento.

4.6 Parámetros fisicoquímicos del agua

Los parámetros fisicoquímicos del agua en los ensayos (1-A, 1-B y 2) se realizaron
bajo condiciones semejantes (Tabla 2), se midieron y registraron a diario.

Tabla 2. Parámetros fisicoquímicos iniciales del agua en los ensayos 1-A, 1-B y 2. Los
valores corresponden al promedio ± error estándar.
Ensayos
Parámetros fisicoquímicos
1-A 1-B 2
Temperatura (°C) 15,49 ± 0,33 15,49 ± 0,33 15,49 ± 0,33
Salinidad (‰) ≤5 ≤5 ≤5
pH 6 - 6,5 6 - 6,5 6 - 6,5
Oxígeno disuelto (mg/L) 9,82 ± 0,49 9,82 ± 0,49 9,82 ± 0,49
Nota: (1-A) ensayo 1-A, (1-B) ensayo 1-B, (2) ensayo 2.

4.7 Diseño experimental

Los peces fueron distribuidos según las dietas (D-0, D-1, D-2) en 12 estanques de
180L para los ensayos (1-A y 1-B) y en 3 estanques de 400 L para el ensayo 2, con un
fotoperiodo de 12 horas de luz y 12 horas de oscuridad. Los grupos fueron (CT) control

13
con dieta D-0, (D1) grupo con dieta D-1, (D2) grupo con dieta D-2 y (D2/0,9) grupo
con dieta D-2 a ración (0,9 %) para cada ensayo.

4.7.1 Ensayo 1-A

Se distribuyeron los peces de forma aleatoria en estanques de 200 L, los datos

iniciales por grupo (CT-1A, D1-1A, D2-1A y D2/0,9-1A) de las condiciones, del alimento
y los parámetros fisicoquímicos del agua en el ensayo se muestran en la Tabla 3. Cada
grupo se trabajó en triplicado durante un periodo de 70 días.

Tabla 3. Diseño experimental del ensayo 1-A con datos iniciales por grupos de S. salar
de las condiciones, del alimento y los parámetros fisicoquímicos del agua. Los valores
corresponden al promedio ± error estándar.

Grupos
Datos Iniciales
CT-1A D1-1A D2-1A D2/0,9-1A
Número de individuos 40 40 40 40
Peso (g) 44,57 ± 2,34 45,87 ± 2,82 46,13 ± 2,32 45,07 ± 2,71
Talla (cm) 15,80 ± 0,49 15,90 ± 0,39 15,90 ± 0,28 15,87 ± 0,55
Densidad de cultivo (Kg/m3) 9,90 10,19 10,25 10,02
Alimento
Dieta D-0 D-1 D-2 D-2
Ración (%) 1 1 1 0,9
Calibre (mm) 2 2 2 2
Frecuencia diaria 2 2 2 2
Parámetros fisicoquímicos
Temperatura (°C) 15,49 ± 0,33 15,49 ± 0,33 15,49 ± 0,33 15,49 ± 0,33
Salinidad (‰) ≤5 ≤5 ≤5 ≤5
pH 6 - 6,5 6 - 6,5 6 - 6,5 6 - 6,5
Oxígeno disuelto (mg/L) 9,82 ± 0,49 9,82 ± 0,49 9,82 ± 0,49 9,82 ± 0,49
Nota: (D-0) dieta comercial sin dosis probiótico BX-1, (D-1) dieta comercial + dosis probiótico BX-1 (1%), (D-2) dieta
comercial + dosis probiótico BX-1 (2%), (CT-1A) grupo control con dieta D-0 del ensayo 1-A, (D1-1A) grupo con dieta
D-1 del ensayo 1-A, (D2-1A) grupo con dieta D-2 del ensayo 1-A, (D2/0,9-1A) grupo con dieta D-2 a ración (0,9 %)
del ensayo 1-A.

4.7.2 Ensayo 1-B

El ensayo 1-B corresponde la continuación del ensayo 1-A con un cambio en el

calibre del alimento de 2 a 4mm. Los peces permanecieron en los estanques de 200L con

14
los cuatro grupos (CT-1B, D1-1B, D2-1B y D2/0,9-1B), cuyos datos iniciales de las
condiciones por grupo, del alimento y los parámetros fisicoquímicos del agua se muestran
en la Tabla 4. Cada grupo se trabajó en triplicado durante un periodo de 42 días.

Tabla 4. Diseño experimental del ensayo 1-B con datos iniciales por grupos de S. salar
de las condiciones, del alimento y los parámetros fisicoquímicos del agua. Los valores
corresponden al promedio ± error estándar.

Grupos
Datos Iniciales
CT-1B D1-1B D2-1B D2/0.9-1B
Número de individuos 20 20 20 20
Peso (g) 99,66 ± 15,37 100,55 ± 14,49 100,59 ± 15,63 91,65 ± 14,05
Talla (cm) 20,19 ± 1,03 20,10 ± 0,98 20,14 ± 1,03 19,66 ± 1,01
Densidad de cultivo (Kg/m3) 11,07 11,17 11,18 10,18
Alimento
Dieta D-0 D-1 D-2 D-2
Ración (%) 1 1 1 0,9
Calibre (mm) 4 4 4 4
Frecuencia diaria 2 2 2 2
Parámetros fisicoquímicos
Temperatura (°C) 15,49 ± 0,33 15,49 ± 0,33 15,49 ± 0,33 15,49 ± 0,33
Salinidad (‰) ≤5 ≤5 ≤5 ≤5
pH 6 - 6,5 6 - 6,5 6 - 6,5 6 - 6,5
Oxígeno disuelto (mg/L) 9,82 ± 0,49 9,82 ± 0,49 9,82 ± 0,49 9,82 ± 0,49
Nota: (D-0) dieta comercial sin dosis probiótico BX-1, (D-1) dieta comercial + dosis probiótico BX-1 (1%), (D-2) dieta
comercial + dosis probiótico BX-1 (2%), (CT-1B) grupo control con dieta D-0 del ensayo 1-B, (D1-1B) grupo con dieta
D-1 del ensayo 1-B, (D2-1B) grupo con dieta D-2 del ensayo 1-B, (D2/0,9-1B) grupo con dieta D-2 a ración (0,9 %)
del ensayo 1-B.

4.7.3 Ensayo 2

En simultaneo al ensayo 1-B se implementó el ensayo 2, donde los peces se

distribuyeron en tres grupos (CT-2, D1-2 y D2-2) de manera aleatoria en estanques de
400L del cual sus datos iniciales de las condiciones por grupo, del alimento y los
parámetros fisicoquímicos del agua se muestran en la Tabla 5. Cada grupo se trabajó
durante un periodo de 39 días.

15
Tabla 5. Diseño experimental del ensayo 2 con datos iniciales por grupos de S. salar de
las condiciones, del alimento y los parámetros fisicoquímicos del agua. Los valores
corresponden al promedio ± error estándar.
Grupos
Datos iniciales
CT-2 D1-2 D2-2
Número de individuos 20 20 20
Peso (g) 85,30 ± 3,05 85,20 ± 3,56 84,05 ± 3,33
Talla (cm) 19,28 ± 0,44 19,10 ± 0,70 18,93 ± 0,78
Densidad de cultivo (Kg/m3) 4,27 4,26 4,20
Alimento
Dieta D-0 D-1 D-2
Ración (%) 2 2 2
Calibre (mm) 4 4 4
Frecuencia diaria 2 2 2
Parámetros fisicoquímicos
Temperatura (°C) 15,49 ± 0,33 15,49 ± 0,33 15,49 ± 0,33
Salinidad (‰) ≤5 ≤5 ≤5
pH 6 - 6,5 6 - 6,5 6 - 6,5
Oxígeno disuelto (mg/L) 9,82 ± 0,49 9,82 ± 0,49 9,82 ± 0,49
Nota: (D-0) dieta comercial sin dosis probiótico BX-1, (D-1) dieta comercial + dosis probiótico BX-1 (1%), (D-2) dieta
comercial + dosis probiótico BX-1 (2%), (CT-2) grupo control con dieta D-0 del ensayo 2, (D1-2) grupo con dieta D-1
del ensayo 2, (D2-2) grupo con dieta D-2 del ensayo 2.

4.8 Evaluación de crecimiento y eficiencia de alimentación

4.8.1 Muestreos biométricos

En los ensayos (1-A, 1-B y 2) se realizaron estudios biométricos que consistieron

en muestreos en el que se registró el peso y la longitud de todos los ejemplares previo
ayuno de 12 horas, realizándose al inicio y cada quince días. Para su manipulación fueron
sedados con una solución acuosa de benzocaína al 20% en una concentración de 2 ml por
cada 10 litros de agua. Una vez sedados se registró el peso a través de una balanza Ohaus
(+/- 0,5g) (Figura 5 (a)) y la longitud de horquilla por medio de un ictiómetro (+/- 0,5cm)
(Figura 5 (b)), por último, los peces son recuperados de la sedación y regresados a los
estanques.

16
 a) b)

Figura 5. Fotografías de los instrumentos utilizados para los estudios biométricos (a)
balanza, (b) ictiómetro.

4.8.2 Evaluación de crecimiento

Para la evaluación del crecimiento de los peces en los ensayos (1-A, 1-B y 2) se midieron
los siguientes parámetros:

4.8.2.1 Tasa de Crecimiento Específico (SGR)

(ln FW –ln IW)

SGR = ( ) × 100
n

Donde; IW= peso inicial (g), FW= peso final (g), n= número de días del período,
Ln= logaritmo natural (neperiano).

4.8.2.2 Coeficiente Térmico de Crecimiento (TGC3)

( (FW)^(1/3)− (IW)^(1/3))
TGC= 1000 × UTA

Donde; IW= peso inicial (g), FW= peso final (g), UTA= Unidades Térmicas Acumuladas

17
4.8.3 Evaluación de la eficiencia de alimentación

Para la evaluación de la eficiencia del alimento en los ensayos (1-A, 1-B y 2) se midieron
los siguientes parámetros:

4.8.3.1 Factor de Conversión de Alimento (FCR) económico (FCRe) y biológico

(FCRb).

Peso total de alimento entregado

FCRe = (Biomasa Final – Biomasa inicial)

Peso total de alimento entregado

FCRb = (Biomasa Final – Biomasa inicial +𝐵𝑖𝑜𝑚𝑎𝑠𝑎 𝑑𝑒 𝑝𝑒𝑐𝑒𝑠 𝑚𝑢𝑒𝑟𝑡𝑜𝑠)

4.9 Evaluación del bienestar animal

Para la evaluación del bienestar animal de los peces en los ensayos (1-A, 1-B y 2),
se midieron los siguientes parámetros:

4.9.1 Factor de condición (FC)

W x 100
FC = L3

Donde; W: peso (g) y L: longitud de cada pez (cm)

4.9.2 Mortalidad

4.9.2.1 Registro y clasificación de la mortalidad

La mortalidad de los peces sometidos en los ensayos fue registrada a diario,

extraída y clasificada, esta considero en el acumulado aquellas producidas sin causa

18
aparente o ejemplares dados de baja por su inviabilidad para continuar en los ensayos,
como presentar problemas agudos con hongos o no tolerar manejos profilácticos. Para
realizar el cálculo de la mortalidad acumulada se utilizó la siguiente formula:

𝑛ú𝑚𝑒𝑟𝑜 𝑑𝑒 𝑚𝑢𝑒𝑟𝑡𝑜𝑠 𝑝𝑜𝑟 𝑐𝑎𝑢𝑠𝑎

Mortalidad por estanque = × 100
𝑡𝑜𝑡𝑎𝑙 𝑑𝑒 𝑝𝑒𝑐𝑒𝑠 𝑎𝑙 𝑖𝑛𝑖𝑐𝑖𝑜 𝑑𝑒𝑙 𝑑í𝑎

𝑛ú𝑚𝑒𝑟𝑜 𝑡𝑜𝑡𝑎𝑙 𝑑𝑒 𝑚𝑢𝑒𝑟𝑡𝑜𝑠 𝑝𝑜𝑟 𝑐𝑎𝑢𝑠𝑎

Mortalidad total diaria = × 100
𝑡𝑜𝑡𝑎𝑙 𝑑𝑒 𝑝𝑒𝑐𝑒𝑠 𝑎𝑙 𝑖𝑛𝑖𝑐𝑖𝑜 𝑑𝑒𝑙 𝑑í𝑎

4.9.3 Análisis de parámetros sanguíneos

4.9.3.1 Toma de muestras sanguíneas

Se realizo la toma de muestras sanguíneas al inicio del periodo de los ensayos (1-
A, 1-B) y al termino para el ensayo 2. Los peces fueron elegidos al azar de los estanques
y anestesiados con benzocaína al 20% en una concentración de 2 ml por cada 10 litros de
agua. Una vez evidenciado el efecto de la sedación en el pez (disminución de la tasa de
ventilación medida por la frecuencia del movimiento opercular) se procedió a la obtención
de las muestras, donde a cada ejemplar se le extrajo 1 ml de sangre mediante la punción
del pedúnculo caudal con jeringas de 1 ml, trasvasada en tubos Eppendorf con
anticoagulante (heparina). Las muestras fueron centrifugadas en una MiniSpin Eppendorf
(Figura 6) a 7000 rpm por 10 minutos para la separación del plasma sanguíneo, el que
fue almacenado a -20°C para su conservación y posterior análisis. Por último, los peces
son recuperados de la sedación en recipientes sin anestesia con aeración constante y
regresados a los estanques.

19
Figura 6. Centrifuga MiniSpin Eppendorf con las muestras sanguíneas en tubos
Eppendorf.

4.9.3.2 Técnicas para la determinación de los parámetros sanguíneos

La técnica analítica para la determinación de los parámetros sanguíneos (glucosa,

proteínas totales, colesterol, triglicéridos, fosfatasa alcalina y cortisol) consistió en la
espectrofotometría de absorbancia. Para determinar los parámetros del plasma se
utilizaron kits de ensayos clínicos Spinreact y HumaTrol N estandarizados para su uso en
peces, y para las mediciones se usó un espectrofotómetro Riele 5010.

4.10 Análisis estadístico

El análisis estadístico de los resultados obtenidos consistió en analizar y definir

los parámetros de crecimiento, eficiencia de alimentación y del bienestar animal de los
peces. Donde se evaluó la normalidad de los datos mediante la prueba de Shapiro Wilks,
para determinar la homocedasticidad se aplicó un test de Bartlett, posteriormente para
comparar las medias T Student para muestras independientes o un test no paramétrico
Kruskal-Wallis.

20
 5 RESULTADOS

5.1 Ensayo 1-A

5.1.1 Crecimiento

Los resultados en peso y longitud en los ejemplares del ensayo 1-A por grupos
(CT-1A, D1-1A, D2-1A y D2/0,9-1A) generados en 70 días se muestran en la Figura 7.
En ambas variables se observa un incremento de todos los grupos, siendo menor desde el
día 28 para D2/0,9-1A en comparación a CT-1A, D1-1A y D2-1A. Sin embargo, estas
diferencias que aumentan con el tiempo no son estadísticamente significativas (p>0.05).

a) b)
120 22
110 21
100 20
Longitud (cm)

90
Peso (g)

19
80
18
70
60 17

50 16
40 15
0 14 28 42 56 70 0 14 28 42 56 70
Tiempo (días) Tiempo (días)

Figura 7. Fluctuación del (a) peso y (b) longitud en los ejemplares del ensayo 1-A durante
70 días. Los valores corresponden al promedio ± error estándar. (Línea segmentada azul
marino) grupo control con dieta D-0, (azul) grupo con dieta D-1, (azul grisáceo) grupo
con dieta D-2 y (gris) grupo con dieta D-2 a ración (0,9 %).

La tasa de crecimiento específico (SGR) y el coeficiente térmico de crecimiento

(TGC3) del ensayo 1-A por grupos generados en 70 días se muestran en la Figura 8. En
ambas tasas se observa una disminución al día 28 en todos los grupos para luego
incrementar y presentar diferencias en el tiempo en específico entre CT-1A y D2/0,9-1A,

21
este último mostro las menores tasas de crecimiento. Sin embargo, estas diferencias no
son estadísticamente significativas (p>0.05).

a) b)
1,5% 0,14
1,4% 0,13
1,3% 0,12
1,2%
SGR (%/día)

0,11
1,1%

TGC3
0,1
1,0%
0,09
0,9%
0,8% 0,08
0,7% 0,07
0,6% 0,06
0,5% 0,05
14 28 42 56 70 14 28 42 56 70
Tiempo (días) Tiempo (días)

Figura 8. Fluctuación de la (a) tasa de crecimiento específico (SGR) y del (b) coeficiente
térmico de crecimiento (TGC3) en los ejemplares del ensayo 1-A durante 70 días. Los
valores corresponden al promedio del grupo. (Línea segmentada azul marino) grupo
control con dieta D-0, (azul) grupo con dieta D-1, (azul grisáceo) grupo con dieta D-2 y
(gris) grupo con dieta D-2 a ración (0,9 %).

5.1.2 Factor de conversión de alimento (FCR)

Los factores de conversión de alimento (FCR) biológico (FCRb) y económico

(FCRe) se muestran en la Figura 9, donde los mayores factores los exhibe el grupo D2-
1A y los menores el grupo D1-1A. Sin embargo, estas diferencias no son estadísticamente
significativas (p>0.05).

22
 0,96
0,94
0,92
0,90
0,88

FCR
0,86
0,84
0,82
0,80
0,78
0,76
CT-1A D1-1A D2-1A D2/0,9-1A
Grupos

Figura 9. Factor de conversión de alimento (FCR) de los ejemplares del ensayo 1-A.
(azul) FCR biológico, (gris) FCR económico, (CT-1A) grupo control con dieta D-0 del
ensayo 1-A, (D1-1A) grupo con dieta D-1 del ensayo 1-A, (D2-1A) grupo con dieta D-2
del ensayo 1-A, (D2/0,9-1A) grupo con dieta D-2 a ración (0,9 %) del ensayo 1-A.

5.1.3 Factor de condición (FC) y mortalidad

El factor de condición (FC) del ensayo 1-A de los ejemplares por grupos (CT-1A,
D1-1A, D2-1A y D2/0,9-1A) generados en 70 días se muestra en la Figura 10, sus valores
se han mantenido en promedio entre 1,05 y 1,25 para todos grupos. Así mismo, no se
observa diferencias estadísticamente significativas en los grupos del ensayo (p>0.05).

La mortalidad del ensayo 1-A se muestra en la Figura 11, donde el grupo D2-1A
presento la tasa más alta en mortalidad acumulada de 23% y para CT-1A de 20%, mientras
que para los grupos D1-1A y D2/0,9-1A bajo el 12%.

23
 1,5

1,4

1,3

1,2
FC
1,1

1,0

0,9

0,8
0 14 28 42 56 70
Tiempo (días)

Figura 10. Fluctuación del factor de condición (FC) en los ejemplares del ensayo 1-A
durante 70 días. Los valores corresponden al promedio ± error estándar. (Azul marino)
grupo control con dieta D-0, (azul) grupo con dieta D-1, (azul grisáceo) grupo con dieta
D-2 y (gris) grupo con dieta D-2 a ración (0,9 %).

9 25%
8
Cantidad de ejemplares

7 20%

% de ejemplares
6
15%
5
4
10%
3
2 5%
1
0 0%
CT-1A D1-1A D2-1A D2/0,9-1A
Grupos

Figura 11. Fluctuación de la mortalidad en los ejemplares del ensayo 1-A durante 70
días. (Gris) mortalidad acumulada, (azul) total de los ejemplares muertos (CT-1A) grupo
control con dieta D-0 del ensayo 1-A, (D1-1A) grupo con dieta D-1 del ensayo 1-A, (D2-
1A) grupo con dieta D-2 del ensayo 1-A, (D2/0,9-1A) grupo con dieta D-2 a ración (0,9
%) del ensayo 1-A.

24
5.2 Ensayo 1-B

5.2.1 Crecimiento

Los resultados en peso y longitud del ensayo 1-B por grupos (CT-1B, D1-1B, D2-
1B y D2/0,9-1B) generados en 42 días se muestran en la Figura 12. En ambas variables
se observa un incremento en el tiempo en todos los grupos, siendo mayor para el grupo
D2-1B en comparación a CT-1B, D1-1B y D2/0,9-1B. Sin embargo, estas diferencias no
son estadísticamente significativas (p>0.05).

a) b)
26
180 25
160 24
Longitud (cm)

23
Peso (g)

140
22
120 21
20
100
19
80 18
0 14 28 42 0 14 28 42
Tiempo (días) Tiempo (días)

Figura 12. Fluctuación del (a) peso y (b) longitud en los ejemplares del ensayo 1-B
durante 42 días. Los valores corresponden al promedio ± error estándar. (Línea
segmentada azul marino) grupo control con dieta D-0, (azul) grupo con dieta D-1, (azul
grisáceo) grupo con dieta D-2 y (gris) grupo con dieta D-2 a ración (0,9 %).

La tasa de crecimiento específico (SGR) y el coeficiente térmico de crecimiento

(TGC3) del ensayo 1-B por grupos (CT-1B, D1-1B, D2-1B y D2/0,9-1B) generados en 42
días se muestran en la Figura 13. En ambas tasas se observa una disminución al día 42 en
todos los grupos exhibiendo diferencias en el tiempo en específico entre D1-1B, D2/0,9-
1B y CT-1B, este último mostro las menores tasas de crecimiento. Sin embargo, estas
diferencias no son estadísticamente significativas (p>0.05).
25
a) b)
1,4% 0,16

0,14
SGR (%/día) 1,2%
0,12
1,0%

TGC3
0,1
0,8%
0,08
0,6% 0,06

0,4% 0,04
14 28 42 14 28 42
Tiempo (días) Tiempo (días)

Figura 13. Fluctuación de la (a) tasa de crecimiento específico (SGR) y del (b) coeficiente
térmico de crecimiento (TGC3) en los ejemplares del ensayo 1-B durante 42 días. Los
valores corresponden al promedio ± error estándar. (Línea segmentada azul marino)
grupo control con dieta D-0, (azul) grupo con dieta D-1, (azul grisáceo) grupo con dieta
D-2 y (gris) grupo con dieta D-2 a ración (0,9 %).

5.2.2 Factor de conversión de alimento (FCR)

Los factores de conversión de alimento (FCR) biológico (FCRb) y económico

(FCRe) se muestran en la Figura 14, donde los mayores factores se exhiben en los grupos
D2/0,9-1B y CT-1B, y los menores en D1-1B y D2-1B. Sin embargo, estas diferencias no
son estadísticamente significativas (p>0.05).

26
 1,2

0,8

FCR 0,6

0,4

0,2

0
CT-1B D1-1B D2-1B D2/0,9-1B
Grupos

Figura 14. Factor de conversión de alimento (FCR) de los ejemplares del ensayo 1-B.
(azul) FCR biológico, (gris) FCR económico, (CT-1B) grupo control con dieta D-0 del
ensayo 1-B, (D1-1B) grupo con dieta D-1 del ensayo 1-B, (D2-1B) grupo con dieta D-2
del ensayo 1-B, (D2/0,9-1B) grupo con dieta D-2 a ración (0,9 %) del ensayo 1-B.

5.2.3 Factor de condición (FC) y nivel de mortalidad

El factor de condición (FC) del ensayo 1-B de los ejemplares por grupos (CT-1B,
D1-1B, D2-1B y D2/0,9-1B) generados en 42 días se muestra en la Figura 15, sus valores
se han mantenido en promedio entre 1,18 y 1,24 para todos grupos. Así mismo, no se
observa diferencias estadísticamente significativas en los grupos del ensayo (p>0.05).

De la mortalidad del ensayo 1-B solo el grupo D1-1B presento la mortalidad de un

individuo, lo que representa en términos acumulados un 5%.

27
 1,5

1,4

1,3

1,2

FC
1,1

1,0

0,9

0,8
0 14 28 42
Tiempo (días)

Figura 15. Fluctuación del factor de condición (FC) en los ejemplares del ensayo 1-B
durante 42 días. Los valores corresponden al promedio ± error estándar. (Azul marino)
grupo control con dieta D-0, (azul) grupo con dieta D-1, (azul grisáceo) grupo con dieta
D-2 y (gris) grupo con dieta D-2 a ración (0,9 %).

5.3 Ensayo 2

5.3.1 Crecimiento

Los resultados en peso y longitud en los ejemplares del ensayo 2 por grupos (CT-
2, D1-2 y D2-2) generados en 39 días se muestran en la Figura 16 (a) y (b). En ambas
variables se observa un incremento de todos los grupos siendo mayor desde el día 25 para
D1-2 y D2-2 en comparación a CT-2. Sin embargo, estas diferencias que aumentan con el
tiempo no son estadísticamente significativas (p>0.05).

La tasa de crecimiento específico (SGR) y el coeficiente térmico de crecimiento

(TGC3) del ensayo 2 por grupos (CT-2, D1-2 y D2-2) generados en 39 días se muestran
en la Figura 16 (c) y (d). En ambas tasas se observa un aumento en el grupo D2-2 en
comparación a D1-2 y CT-2, siendo menor este último. Sin embargo, estas diferencias no
son estadísticamente significativas (p>0.05).

28
a) b)

180
24
160

Longitud (cm)
Peso (g)

140 22
120
100 20
80
60 18
0 11 25 39 0 11 25 39
Tiempo (días) Tiempo (días)

c) d)
2,0% 0,22
1,8% 0,2

1,6% 0,18
SGR (%/día)

0,16
1,4%
TGC3 0,14
1,2%
0,12
1,0%
0,1
0,8% 0,08
0,6% 0,06
11 25 39 11 25 39
Tiempo (días) Tiempo (días)

Figura 16. Fluctuación del (a) peso, (b) longitud, (c) tasa de crecimiento específico (SGR)
y (d) coeficiente térmico de crecimiento (TGC3) en los ejemplares del ensayo 2 durante
39 días. Los valores corresponden al promedio ± error estándar. (Línea segmentada azul
marino) grupo control con dieta D-0, (azul) grupo con dieta D-1 y (azul grisáceo) grupo
con dieta D-2.

5.3.2 Factor de conversión de alimento (FCR)

Los factores de conversión de alimento (FCR) biológico (FCRb) y económico

(FCRe) se muestran en la Figura 17, el cual exhibe diferencias entre los tratamientos y el
control, donde los mayores factores se observan en los grupos CT-2 (1,88) y los menores

29
en D1-2 (1,3) y D2-2 (1,28). Sin embargo, estas diferencias no son estadísticamente
significativas (p>0.05).

2
1,8
1,6
1,4
1,2
FCR

1
0,8
0,6
0,4
0,2
0
CT-2 D1-2 D2-2
Grupos

Figura 17. Factor de conversión de alimento (FCR) de los ejemplares del ensayo 2. (azul)
FCR biológico, (gris) FCR económico, (CT-2) grupo control con dieta D-0 del ensayo 2,
(D1-2) grupo con dieta D-1 del ensayo 2 y (D2-2) grupo con dieta D-2 del ensayo 2.

5.3.3 Factor de condición (FC) y nivel de mortalidad

El factor de condición (FC) del ensayo 2 de los ejemplares por grupos (CT2, D1-
2 y D2-2) generados en 39 días se muestra en la Figura 18, sus valores se han mantenido
en promedio entre 1,15 y 1,29 para todos grupos. Sin embargo, estas diferencias no son
estadísticamente significativas (p>0.05).

De la mortalidad mencionar que no se ha producido en los ejemplares sometidos

durante el transcurso del ensayo 2.

30
 1,5

1,4

1,3

1,2

FC 1,1

1,0

0,9

0,8
0 11 25 39
Tiempo (días)

Figura 18. Fluctuación del factor de condición (FC) en los ejemplares del ensayo 2
durante 39 días. Los valores corresponden al promedio ± error estándar. (Azul marino)
grupo control con dieta D-0, (azul) grupo con dieta D-1 y (azul grisáceo) grupo con dieta
D-2.

5.4 Análisis de parámetros sanguíneos

Los resultados del análisis de parámetros sanguíneos en los ejemplares del ensayo
1-A, 1-B y 2 por grupos se muestran en la Figura 19.

En el ensayo 1-A se observan diferencias en los resultados de la glucosa, proteínas

totales, colesterol, fosfatasa alcalina y cortisol en los grupos con las dietas D-1, D-2 y D-
2/0.9 respecto al control. Sin embargo, estas diferencias no son estadísticamente
significativas (p>0.05). En los triglicéridos se obtuvieron diferencias estadísticamente
significativas en los grupos, se observó una disminución en el grupo con dieta D-1
(t(24)3.65, p=0.001) y un aumento en los grupos D-2 (t(23)-2.17, p=0.04) y D-2/0.9 (t(17)-
2.41, p=0.03) respecto al control.

En el ensayo 1-B se observan diferencias en los resultados de la glucosa y cortisol

en los grupos con dieta D-1, D-2 y D-2/0.9 respecto al control. Sin embargo, estas
diferencias no son estadísticamente significativas (p>0.05). Se obtuvieron diferencias
estadísticamente significativas en las proteínas totales que muestran una disminución en
los grupos con las dietas D1 (t(58)3.08, p=0.003), D-2 (t(52)5.45, p=0.000001) y en D-2/0.9
31
(t(58)2.08, p=0.04), en el colesterol un aumento en D1(t(58)-3.68, p=0.0005) y una
disminución en D-2/0.9 (t(58)2.49, p=0.02), en los triglicéridos una disminución en D2
(t(55)2.14, p=0.03) y un aumento en D-2/0.9 (t(54)-2.65, p=0.01) , en la fosfatasa alcalina
una disminución en D2 (t(50)2.97, p=0.004) y un aumento en D-2/0.9 (t(58)-3.13,
p=0.002) respecto a los controles.

En el ensayo 2 se observan diferencias en los resultados de la glucosa, proteínas

totales, fosfatasa alcalina y cortisol en los grupos con dieta D-1 y D-2 respecto al control.
Sin embargo, estas diferencias no son estadísticamente significativas (p>0.05). Se
obtuvieron diferencias estadísticamente significativas en los triglicéridos que muestran
una disminución en los grupo con dieta D-1 (t(18)2.56, p=0.02) y en el colesterol un
aumento en D-2 (t(18)-2.93, p=0.009) respecto al control.

32
 a) b)
120 8

Proteínas totales (g/dl)

100 7

Glucosa (mg/dl)
6
80 5
60 4
40 3
2
20
1
0 0
1-A 1-B 2 1-A 1-B 2
Ensayos Ensayos

c) d)
500 500

Triglicéridos (mg/dl)
Colesterol (mg/dl)

400 400

300 300

200 200

100 100

0 0
1-A 1-B 2 1-A 1-B 2
Ensayos Ensayos

e) f)
300 200
Fosfatasa alcalina (U/L)

250
Cortisol (ug/L)

150
200
150 100
100
50
50
0 0
1-A 1-B 2 1-A 1-B 2
Ensayos Ensayos

Figura 19. Fluctuación de la glucosa (a), proteínas totales (b), colesterol (c), triglicéridos
(d), fosfatasa alcalina (e) y cortisol (f) en S. salar en los (1-A) ensayo 1-A, (1-B) ensayo
1-B y (2) ensayo 2. Los valores corresponden al promedio ± error estándar. (azul marino)
grupo control con dieta D-0, (azul) grupo con dieta D-1, (azul grisáceo) grupo con dieta
D-2 y (gris) grupo con dieta D-2 a ración (0,9 %).

33
 6 DISCUSIÓN

6.1 Crecimiento

El crecimiento en términos de peso y longitud en los ensayos (1-A, 1-B y 2)

exhibieron un incremento en el tiempo en todos los grupos, en específico los evaluados
con probiótico BX-1 como aditivo en la dieta en comparación a los controles. Sin
embargo, estas diferencias en los tratamientos no fueron significativas y solo permitieron
establecer que los grupos poseen igual comportamiento en términos de peso y talla con
tendencia a un mayor peso. Similares resultados obtuvieron Abid et al., (2013) en S. salar
mediante el uso de bacterias como Pediococcus que mostro como resultados una tendencia
al aumento en el peso que no fue significativo. Al contrario, Lashtoaghaei et al., (2020) y
Hosseini et al., (2014) en la trucha común (Salmo trutta caspius) mencionaron diferencias
entre los grupos al utilizar Pediococcus con un aumento en el peso en los tratamientos en
comparación al control. Respecto a las levaduras como probiótico Tovar-Ramírez et al.,
(2004) menciono que el uso de Debaryomyces hansenii en larvas de lubina (Dicentrarchus
labrax) aumentaba el peso de los ejemplares.
En los ensayos el crecimiento en peso y longitud no mostró diferencias con el uso
del probiótico en los peces en posible consecuencia de factores como una deficiente
extrusión del alimento que afecto al ensayo 1-A donde las dietas (D-0, D1 y D-2) de
calibre 2 mm presentaron inconvenientes de fabricación provocando residuos de alimento
y probiótico BX-1 en forma de polvillo (Anexo 1) lo que se traduciría en una pérdida
importante de probiótico en las dietas que se vio reflejado en los resultados del ensayo.
Otro factor importante a considerar en el ensayo 1-B es la baja ración de alimento
utilizada, ya que en comparación al ensayo 2 este si mostro una tendencia al aumento del
crecimiento en peso, como indica Mansano et al., (2017) y Pepe-Victoriano et al., (2012)
el crecimiento puede ser influenciado por parámetros abióticos (temperatura, calidad del
agua y fotoperiodo, entre otros) y bióticos (especie, sexo, frecuencia y la ración de
alimentación, entre otros). Por último, el tiempo de experimentación pudo ser un factor
limitante para la obtención de diferencias en el uso del probiótico, ya que en este estudio
el tiempo de evaluación fue reducido en comparación a otros autores como Merrifield et
34
al., (2011) en 10 semanas y Lara-Flores et al., (2003) en 9 semanas que mostraron
diferencias al usar probiótico en la alimentación de peces.

La tasa de crecimiento específico (SGR) corresponde al crecimiento expresado

como el porcentaje de peso ganado por día. Mientras que el coeficiente térmico de
crecimiento (TGC3) es un índice de crecimiento que considera la temperatura y el peso de
los peces, cuya limitante permite trabajar solo entre 5 a 14°C. Para estos índices se
describen valores más altos en ejemplares pequeños, una disminución cuando crecen y
mientras más alto sea el valor más rápido será el crecimiento del pez (Crampton &
Sveidqvist, 2022).
En relación al SGR y TGC3 en los ensayos se observaron diferencias que no fueron
significativas en los grupos experimentales respecto al control. Los resultados en el ensayo
1-A mostraron una disminución en todos los grupos, para luego aumentar progresivamente
en el tiempo donde el grupo con menor crecimiento fue aquel con el porcentaje más bajo
de ración del alimento. Esta tendencia al aumento en la velocidad de crecimiento en los
grupos indico que los peces crecieron en el tiempo, sin embargo, estos resultados no
revelan un efecto del probiótico BX-1 en el crecimiento. En el ensayo 1-B se observó que
disminuyen en todos los grupos siendo menor el control, esta tendencia indica que la
velocidad de crecimiento en los grupos se reduce en el tiempo y que el probiótico no revela
un efecto en el crecimiento. Por otro lado, en el ensayo 2 aumentaron en el tiempo en los
grupos alimentados con el aditivo BX-1 a una dosis del 2% en comparación a la dosis del
1% y al control. Sin embargo, las velocidades de crecimiento en los grupos de peces
alimentados con el probiótico tendieron a ser mayores que el control, lo que indica que
podría mejorar el rendimiento del crecimiento en los peces. Similares resultados
obtuvieron Lashtoaghaei et al., (2020) y Hosseini et al., (2014) en la trucha común (S.
trutta caspius), Dawood et al., (2016) en el pargo japonés (Pagrus major) y Ahmadifar et
al., (2020) en la carpa común (Cyprinus carpio) mencionaron que el uso de bacterias como
Pediococcus mejora los parámetros de crecimiento en los peces. Respecto a estudios que
han utilizado bacterias y levaduras como probiótico Lara-Flores et al., (2003) menciono
que su uso exhibía mayor crecimiento en alevines de la tilapia del Nilo (Oreochromis
niloticus).
35
 El crecimiento en términos del SGR y TGC3 en los ensayos mediante el uso del
probiótico en los peces pudo ser afectado por los factores anteriores mencionados como
los problemas con el alimento en el ensayo 1-A, la baja ración de alimentación y el
reducido periodo de experimentación para los ensayos.

6.2 Eficiencia de alimentación

El factor de conversión de alimento (FCR) corresponde a los kilogramos de

alimento necesarios para producir un kilogramo de pescado. Existen dos formas de medir
el aumento de la biomasa a través del factor de conversión de alimento económico (FCRe)
mediante el aumento en el peso vivo de los peces y el factor de conversión de alimento
biológico (FCRb) mediante el aumento en el peso vivo de los peces más el peso de los
peces que murieron durante el periodo (Crampton & Sveidqvist, 2022).
En los FCR biológico y económico de los ensayos se observaron diferencias que
no fueron significativas en los grupos experimentales respecto al control. En general para
el ensayo 1-A y 1-B fueron menores a 1, lo que se interpretó que con menos de 1 kg de
alimento se obtuvo 1 kg de incremento en peso, resultados que son improbables en posible
consecuencia de que existió un problema con la toma de muestra en los ensayos. Además,
los valores del FCR biológico en el ensayo 1-A fueron menores al FCR económico debido
a la influencia de la mortalidad.
Según Torrissen et al., (2011) informan que los FCR promedio de S. salar tienen
los siguientes valores: 1,103 en Noruega, 1,331 en el Reino Unido, 1,313 en Canadá y
1,493 en Chile. Lo cual señala que los valores para el ensayo 2 se encontraban entre los
rangos obtenidos en el cultivo de salmones con FCR mayores a 1 en todos los grupos
siendo menores para los grupos con probiótico. Los valores registrados en el ensayo 2
para los grupos con probiótico indican que con alrededor de 1,3 kg de alimento se obtuvo
1 kg de incremento en peso, siendo más eficientes en la conversión del alimento los
tratamientos con el aditivo BX-1 respecto al control. Similares resultados obtuvieron
Hosseini et al., (2014) en la trucha común (S. trutta caspius) y Dawood et al., (2016) en
el pargo japonés (P. major), mencionaron que el uso de bacterias como Pediococcus
exhibió menores valores en conversión alimenticia y una estimulación de la ingesta de
36
alimento. Respecto a estudios que han utilizado bacterias y levaduras como probiótico
Lara-Flores et al., (2003) menciono que su uso mejoro la eficiencia alimenticia de los
alevines de la tilapia del Nilo (O. niloticus).
En general estos resultados revelan que el uso del probiótico en la alimentación
tiende a mejorar el FCR de los peces como se observó en el ensayo 2. Además, que sus
valores se relacionan con los cambios en el crecimiento en los ensayos debido a que con
un menor FCR la velocidad de crecimiento es mayor o viceversa.

6.3 Bienestar animal de los peces

El factor de condición (FC) es usado para relacionar el peso con longitud.

Constituye una herramienta para corregir los protocolos de alimentación, utilizado como
un indicador complementario del bienestar animal y para comparar cambios estacionales
del estado nutricional, pero requiere ser complementado con otras herramientas de
observación directa (Cifuentes et al., 2012). Puede indicar el estado nutritivo de los peces
siendo útil en el cultivo para comparar y cuantificar la condición del pez asociando una
valoración de la contextura de los ejemplares (Laibe, 2010). Donde un valor cercano a 1
indicaría peces óptimos, menor a 1 peces más delgados y mayor a 1 más robustos.
En los tres ensayos se obtuvieron resultados con diferencias que no fueron
significativas y que perduraron sin mayores variaciones en el tiempo con un promedio
entre un mínimo de 1,05 y un máximo de 1,29. Este rango de valores se considera como
una buena condición y aquellos grupos con el factor más alto indicarían unos peces más
robustos. Los ensayos 1-A y 1-B no mostraron diferencias entre grupos en comparación
al ensayo 2, aquellos alimentados con el aditivo del probiótico BX-1 a dosis del 2%
indicaron el mayor FC en comparación al control. En contraste a los estudios de
Merrifield, et al., (2011) este se redujo significativamente en los grupos de peces
alimentados con probióticos de P. acidilactici en la trucha arco iris (O. mykiss). Sin
embargo, el FC no es un buen indicador de salud ya que solo considera la contextura del
ejemplar y no los factores que pueden influir en la especie como la temperatura, cantidad
y calidad de alimento y el estado reproductivo (Laibe, 2010).

37
 La mortalidad de los ejemplares en el ensayo 1-A podría estar asociada al
probiótico BX-1, sin embargo esta fue clasificada como consecuencia de una muerte sin
causa aparente. Situación distinta se obtuvo para los ensayos 1-B y 2 los que indicaron
una mínima mortalidad, lo que podría significar que el uso de BX-1 no produjo efectos
negativos en la salud de los peces. Se observó en mayor número solo en el ensayo 1-A en
todos los grupos y en el ensayo 1-B solo un ejemplar la que influyo en los valores bajos
del FCRb, mientras que en el ensayo 2 no presentó mortalidad. Similares resultados
obtuvieron Abid, et al., 2013, en S. salar mediante el uso de bacterias como Pediococcus
el que revelo una alta tasa de supervivencia en los tratamientos. Respecto a estudios que
han usado levaduras como probiótico Tovar-Ramírez et al., (2004) señalo una mejora en
la supervivencia de un 10% en larvas de lubina (D. labrax).

En los parámetros sanguíneos de los tres ensayos en general se observaron que los
peces se encontraban en un buen estado de salud. La glucosa permaneció sin variaciones
importantes en los ensayos en los grupos experimentales y controles, siendo similares en
promedio a las concentraciones normales en la sangre de los peces descritos por Malini et
al., (2018) con valores entre 40 a 90 mg/dl y por Cáceres (2018) para S. salar en un
intervalo entre 17,7 - 125,3 mg/dl en promedio para ejemplares sanos.

Las proteínas totales no mostraron importantes variaciones en los ensayos. Aun

así, se observaron diferencias en sus valores solo en el ensayo 1-B que exhibieron una
disminución respecto al control. Estos resultados podrían ser en consecuencia a la
condición de ayuno necesaria para realizar el muestreo en los ejemplares. La disminución
de las proteínas totales en los peces se asocia a desnutrición, ayuno, disfunción hepática,
infecciones producidas por patógenos, entre otras y sus niveles en promedio de proteínas
totales descritos para la S. salar son entre 2,2-7,9 g/dl (Cáceres, 2018). Según Buenaño
(2019) los intervalos normales de este parámetro en peces son entre 2,8 a 5,8 g/dl,
similares concentraciones en promedio se obtuvieron en los resultados de todos los
grupos.

38
 En el colesterol se observaron diferencias en los ensayos 1-B y 2 que exhibieron
un aumento en los grupos alimentados con probiótico BX-1 y una disminución en el grupo
D-2 alimentado a la menor ración (0.9%) respecto al control. Se menciona que en agua
salada para este ejemplar se obtienen valores medios en peces sanos entre 141,4-386,7
mg/dl (Cáceres, 2018). Similares concentraciones en promedio se obtuvieron en los
resultados de todos los grupos, tendiendo a ser mayores en los grupos alimentados con el
aditivo BX-1.

En los triglicéridos se observaron diferencias en los ensayos 1-A, 1-B y 2,

exhibiendo un aumento durante el ensayo 1-B y una disminución en el ensayo 2 respecto
al control. Estos resultados podrían ser en consecuencia a la condición de ayuno necesaria
para realizar el muestreo en los ejemplares. Según Müller y Bittencourt (2021), en los
peces se puede observar una disminución de los triglicéridos debido a ayuno prolongado,
carencia nutricional e insuficiencia hepática. Los valores normales de triglicéridos según
Cáceres (2018) para ejemplares sanos de S. salar rondan en un intervalo entre 71,9 - 503,3
mg/dl en promedio, similares resultados se obtuvieron en los ensayos en los grupos
experimentales y controles.

En la fosfatasa alcalina se observaron diferencias solo en el ensayo 1-B que

exhibió una disminución en los grupos alimentados con probiótico BX-1 y un aumento en
el grupo D-2 alimentado a la menor ración (0.9%) respecto al control. Sin embargo, los
resultados se encuentran dentro de los intervalos normales para ejemplares pre-smolt y
smolt con valores menores a 264 U/L (Cáceres, 2018; Müller & Bittencourt, 2021).

El cortisol no mostro importantes variaciones en el promedio de los ensayos entre

grupos. Sin embargo, en los ensayos 1-A y 1-B se observó que había ejemplares con
valores muy altos que se encontraban fuera del rango normal para salmónidos descritos
por otros autores, como en la trucha arco iris que se han reportado valores para peces sanos
entre (10,12 a 15,56 ng/ml) y (22,66 y 33,26ng/ml) (Huanca & Carpio, 2017). Este
aumento en el cortisol podría ser en consecuencia al manejo de los peces durante la toma
de muestras o por factores como el ayuno. Según Fast et al., (2008) el estrés a corto plazo
39
da como resultado una elevación de los niveles de cortisol plasmático total por manejo
agudo y repetido. También se ha informado que el cortisol varía con el tiempo y se ve
influenciado por diversos factores como ayuno, ingesta de alimento, composición de la
dieta, entre otros (Sadoul & Geffroy, 2019). En el ensayo 2 se observaron rangos similares
a los mencionados por otros autores para peces sanos con una tendencia a la disminución
en los grupos alimentados con el aditivo BX-1 respecto al control.

En general los parámetros obtenidos al inicio mostraron que los peces llegaron en
buenas condiciones a pesar de las diferencias, se mantuvieron entre los rangos
mencionados para peces sanos y revelaron que el aditivo de probiótico BX-1 al alimento
no afecto el estado de salud. Resultados similares obtuvo Dawood et al., (2016) en el
pargo japonés (P. major) mediante el uso de bacterias como Pediococcus que mejoraron
las condiciones de salud en la especie.

Se recomienda mejorar este estudio realizado bajo condiciones similares con una
mayor duración del ensayo y evitar la influencia de los factores mencionados para evaluar
el efecto del probiótico BX-1 en los peces. Además de implementar nuevos estudios
enfocados en las cepas probióticas para evaluar su efectividad en el crecimiento de
salmónidos, profundizar en estudios sobre como impacta a la microbiota intestinal y el
tiempo de residencia en los peces tanto en ambientes de agua dulces como salada. Por
ultimo seria interesante conocer como reacciona frente a patogenos que afectan en el
cultivo de salmones.

40
 7 CONCLUSIONES

El uso del probiótico BX-1 como aditivo en el alimento suministrado en los

ensayos influyo de manera positiva para el crecimiento de los peces en este estudio, donde
los tratamientos exhibieron una tendencia al aumento en peso y en velocidad de
crecimiento, mostrando ser mayores en los grupos que contenían un porcentaje más alto
en la ración de alimento y del porcentaje de probiótico.

Además, en la eficiencia de alimentación el uso del probiótico en los peces exhibió

una tendencia a mejorar los factores de conversión del alimento mostrando ser menores
en los grupos que contenían el aditivo del probiótico.

En relación al bienestar animal el uso del probiótico mostro una tendencia al

aumento de los factores de condición con peces en buenas condiciones y más robustos,
una disminución en la mortalidad y parámetros sanguíneos en el rango de peces sanos.

Por último, se rechaza la hipótesis planteada en relación al efecto del probiótico

BX-1 sobre un mayor rendimiento del crecimiento debido a que no se obtuvieron
diferencias significativas en los ensayos. Por otro lado, no se rechaza la sección en relación
a los efectos negativos en la salud de los peces ya que como se observó permanecieron
dentro del rango descrito para ejemplares sanos y disminuyo considerablemente la
mortalidad durante los ensayos.

En resumen, el uso del probiótico BX-1 como aditivo en la dieta de S. salar podría
mejorar el crecimiento, la eficiencia de alimentación y el estado de salud.

41
 8 BIBLIOGRAFÍA

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48
 9 ANEXOS

a) b) c)

Anexo 1. Fotografias de los residuos desprendidos del pellet de calibre 2 mm. Residuos
de las dieta (a) D-0, (b) D-1 y (c) D-2.

49