Acción de las bacterias sobre los carbohidratos lista para subir a la plataforma.ppt
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El documento describe varios medios de cultivo y pruebas utilizadas para identificar bacterias basadas en su metabolismo de azúcares y producción de enzimas. Explica que Mac conkey, CLBVB y EAM son medios selectivos y diferenciales para bacterias gramnegativas que contienen lactosa y otros azúcares. También describe las pruebas de coagulasa para distinguir S. aureus y la prueba de catalasa para diferenciar estafilococos de estreptococos usando peróxido de hidrógeno.
Acción de las bacterias sobre los carbohidratos lista para subir a la plataforma.ppt
- 1. UNIVERSIDAD AUTÓNOMA DE SANTO DOMINGO Primada de América FACULTAD DE CIENCIAS ESCUELA DE MICROBIOLOGÍA Y PARASITOLOGÍA Cátedra de Microbiología Laboratorio de microbiología MIP-133/111/114 Acción de las bacterias sobre los carbohidratos 1
- 2. 01/10/2023 2 Durante el proceso del metabolismo algunas bacterias son capaces de reducir a los carbohidratos a compuestos menos complejos que pueden penetrar en el interior de las células. Para que se den estas reacciones es preciso que los microorganismos sean capaces de elaborar enzimas.
- 3. La mayoría de las bacterias heterótrofas metabolizan la glucosa, pero la degradación sigue distintas direcciones, según la constitución enzimática de las diversas especies de bacterias. 01/10/2023 3 Acción de las bacterias sobre los hidratos de carbono
- 4. Para realizar esta práctica se requiere de medios de cultivo que contengan azucares Eam, Mac conkey, Caldo Lactosado Bilis Verde Brillante,TSI,Agar manitol salado. Asas y Agujas bacteriológicas Cepas de: E. coli, Staphylococcus aureus y epidermidis, Proteus mirabilis y vulgaris, Pseudomonas aeruginosa. PRCEDIMIENTO: 1- Rotular las placs y tubos Sembrar las cepas en los medios seleccionados, empleando el metodo de siembra recomendado para cada caso Incubar 37 grados durante 24 horas IMTERPRETAR LOS RESULTADOS. 01/10/2023 4
- 5. Contiene tres azúcares que son: 1. Glucosa 2. Lactosa 3. Sacarosa Contiene también sulfato amínico ferroso, que reacciona con el acido sulfhídrico, con el cual se determina la formación de H2S (sulfuro de hidrogeno)un precipitado de color negro. 01/10/2023 5
- 6. Amarillo (A): ácido (fermentó el azúcar) *Rojo (K): alcalino (no fermentó el azúcar) *Negro: presencia de H2S (H2S+) *Burbujas o vacíos, con levantamiento del medio: presencia de H2 + CO2 H2 + CO2+ Precipitado negro = H2S 01/10/2023 6
- 7. Se verifican varias reacciones: Ninguna reacción, alcalino superficie/alcalino fondo (K/K). El medio se queda inerte, no cambia de color por tanto es un “No Fermentador” y se descarta Enterobacteriaceae. Alcalino superficie/Acido fondo (K/A), significa solo fermentación de la glucosa, por tanto, es un “No fermentador de lactosa” (o sacarosa ). Acido superficie/Acido fondo (A/A), significa que se trata de un fermentador de lactosa (o sacarosa en TSI). Alcalino superficie/Acido fondo con precipitado negro, se reporta como H2S positivo. Además de las características anteriores se pueden observar burbujas o rompimiento del medio debido a la producción de gas en el medio. 7
- 8. 01/10/2023 8
- 9. Es un medio de cultivo selectivo y diferencial Es un medio de cultivo selectivo para bacterias Gram. negativas Este medio contiene el azúcar lactosa y un indicador de PH( rojo neutro), entre otros componentes. Si la bacteria utiliza el azúcar Las colonias se tornan rosadas. Si no la utiliza las colonias se observan transparentes. 01/10/2023 9
- 10. Se observan Colonias Rosadas. Resultado:la bacteria utilizo la Lactosa 01/10/2023 10
- 11. Colonias Claras o Transparentes Resultado:la bacteria no utilizo la Lactosa 01/10/2023 11
- 12. Se verifican dos reacciones 1. Colonias rosadas la bacteria utilizo la lactosa 2. Colonias transparentes la bacteria no utilizo la lactosa 01/10/2023 12
- 13. Es un medio de cultivo selectivo para Gram. negativos. Es diferencial contiene el azúcar lactosa En tubos de Durham cuando hay gas en el tubito invertido nos indica que hay presencia de gas por tanto ha ocurrido la utilización de la lactosa Esta reacción es producida por los coliformes . 01/10/2023 13
- 14. Interpretación: 1. Si se observa un desplazamiento en el tubito invertido se reporta: gas + 2. Si el tubito invertido permanece lleno del liquido se reporta: gas - 01/10/2023 14 Caldo Lactosado Bilis Verde Brillante (CLBVB)
- 15. . GAS NEGATIVO GAS POSITIVO Caldo Lactosado Bilis Verde Brillante (CLBVB) 15
- 16. Es un medio selectivo y diferencial Es selectivo para bacterias Gram negativas Contiene el azúcar lactosa y sacarosa se observan colonias con brillo verde metálico. Si hay mucha acidez La E. coli crece con brillo verde metálico 01/10/2023 16
- 17. Este medio se utiliza con los Staphylococcus Resultados si se observan cambio a colonias de color amarillo , la bacteria utilizo el manitol Si se observan cambios a color rosa cereza, la bacteria no utilizo el manitol
- 18. Cepa de Staphylococcus 1. La coagulasa actúa como una enzima termoestable que permite diferenciar el Staphylococcus aureus del resto de los Estafilococos coagulasa negativos. 2. Se producen dos tipos de coagulasa, la unida a la pared celular y la liberada por la célula como coagulasa libre y es la detectada por la técnica en tubo. 3. La coagulasa actúa sobre la protrombina para producir trombina que actúa sobre el fibrinógeno para formar el coagulo. 01/10/2023 18
- 19. 1. Si se forma un coagulo la prueba es: positiva 2. Si no se forma el coagulo la prueba es: negativa. 3. Staphylococcus aureus forma un coagulo, es coagulasa + 4. Staphylococcus que no forman coagulo son: coagulasa – 01/10/2023 19
- 20. Coagulasa + Coagulasa - 01/10/2023 20 Interpretación
- 21. Esta prueba permite diferenciar los microorganismos aerobias y facultativas Catalasa POSITIVA de las anaeróbicas y de las Microaerofilicas las cuales son Catalasa negativa. La catalasa es una enzima respiratoria, es una porfirina de hierro cuya funcion es desdoblar los peroxidos en H2O y O2. Se utiliza en el laboratorio para diferenciar el Estafilococos de Estreptococos. 01/10/2023 21
- 22. • Reactivo: peróxido de hidrogeno ( agua oxigenada – H2O2 ) • Cepas de Staphylococcus aureus • Lamina portaobjeto • O en el cultivo en placa de Petri o en tubo • Colocar una gota de H2O2 en el cultivo o en las colonias que se colocan en el porta objeto • Resultados • Prueba positiva ; Si aparecen burbujas, desprendimiento de O2 , presencia de la enzima catalasa • Prueba negativa: no se observan burbujas por la ausencia de la enzima catalasa
- 23. La catalasa es una enzima que desdobla en peróxido de hidrogeno en O2 Y H2O. Esa es la razón por lo que se observan las burbujas
- 25. Colocar unas gotas de H2O2 en el cultivo o en las colonias que se colocan en el porta objeto Resultados Prueba positiva ; Si aparecen burbujas, desprendimiento de O2 , presencia de la enzima catalasa Prueba negativa: no se observan burbujas por la ausencia de la enzima catalasa
- 26. 01/10/2023 26
- 27. Que tipo de medios de cultivos son Mac conkey, CLBVB, EAM? Selectivos y diferencial Son selectivos para bacterias Gram negativas Que azucares contienen los siguientes medios: Mac conkey CLBVB EAM TSI
- 28. Que tipo de medio es el TSI Que tipo de medio es el agar de manitol salado? Para que bacterias se utiliza el manitol salado y la prueba de cooagulasa? Para que se utiliza la prueba de coagulasa? Para que se utiliza la prueba de catalasa? Que reactivo se utiliza para realizar la prueba de catalasa?