1.4. Laminillas hematológicas
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El documento resume la importancia de realizar un extendido de sangre periférica como parte de una evaluación hematológica completa. El extendido permite observar la morfología de los glóbulos rojos y blancos, identificar posibles anomalías y comparar los resultados con el hemograma automatizado. Es una herramienta clave para el diagnóstico de enfermedades hematológicas a pesar de los avances tecnológicos.
1.4. Laminillas hematológicas
- 2. “Una valoración hematológica no esta completa sin una correcta valoración citomorfológica de el extendido de sangre periférica, que a pesar de los avances tecnológicos continúa siendo la “prueba reina” en el diagnóstico de las enfermedades hematológicas.” G.C. Hematólogo Colombiano
- 3. Valoración del estado hematológico del paciente. Nos permite valorar y comparar los resultados del hematoanalizador.
- 4. Nos permite encontrar hemoflagelados Determinar el curso de una anemia, de los efectos nocivos de la terapéutica oncohematologica.
- 5. Celularidad y morfología ▪ Tinción, tamaño, relación con otras células, cantidad, composición y signos de displasia ▪ Presencia de Blastos Células extrañas ▪ Metástasis ▪ Microorganismos ▪ Células óseas o tisulares Artefactos ▪ Restos celulares ▪ Artefactos del colorante
- 6. Tinciones Hematológicas T. May-Grunwald- Giemsa T H-E T. Romanowsky T.Wright Tinciones Inmunohistoquímicas Morfología Citoquímica Artefactos Celularidad
- 7. Con la automatización del laboratorio clínico el FSP, que a pasado a no hacerse en muchos laboratorios clínicos, sobre todo en aquellos con sobrecarga de trabajo o “fabricas de exámenes”.
- 8. Algunos laboratorios reportan tal y como sale de la maquina, en muchos casos en inglés y unidades que no se utilizan, sin la mas mínima revisión del análisis microscópico. Aunque el reporte te pida el análisis manual.
- 9. El ejemplo mas clásico es el conteo de Neutrófilos en Banda y Segmentados, la mayoría de los analizadores, no discriminan entre estas dos fases del neutrófilo, por lo que se requiere de una valoración en el FSP. Otro ejemplo es que algunos analizadores no nos determinan eosinófilos y que hablar de los basófilos. ¿Mas fácil que un EKG verdad?, lamentablemente son pocos los médicos ( e incluso químicos o técnicos) que interpretan los histogramas, por lo que dependen de un recuento manual, en caso de que el equipo no nos arroje, bandas, eosinófilos o basófilos.
- 10. La solución se deduce en informes del hemograma, de los cuales no es posible tener un buen estudio de sangre periférica, olvidando que “los contadores de células son excelentes pero no perfectos” y en ningún momento pueden reemplazar a un detenido y cuidadoso estudio de un extendido de sangre periférica.
- 11. “La calidad de un resultado de laboratorio depende de la calidad de la muestra” (premisa básica de las buenas prácticas de laboratorio) El método del portaobjeto, también conocido como método de doble portaobjeto es el más utilizado universalmente para hacer los extendidos de sangre periférica. Para lograr un extendido de sangre periférica por este método es importante tener en cuenta la muestra, el material utilizado y el procedimiento propiamente dicho.
- 12. 1. Tomar dos portaobjetos nuevos y limpios, no tomar con las manos directamente, siempre con guantes, de preferencia limpiarlos previamente con alcohol y secar. 2. Colocar el portaobjeto en donde se planea hacer el extendido sobre una superficie plana. 3. Mezclar la muestra de sangre unos 2 minutos en el homogeneizador o 10 inmersiones manuales. 4. Marcar el portaobjetos con un lápiz apropiado. La identificación debe ser en el extremo grueso (o el esmerilado) del portaobjetos. 5. Colocar una pequeña gota de aproximadamente 7µL, a 1 cm de un extremo del portaobjetos. Muestra es sangre venosa recién extraída o con menos de 2 horas de haber sido extraída.
- 13. 6. Con el pulgar y el índice de la mano derecha sujetar el segundo portaobjetos, también conocido como portaobjetos extensor, contra la superficie del primer portaobjeto con un ángulo de 30° a 45°. 7. Deslizar el portaobjetos de empuje hacia atrás, hacia la gota de sangre. Permitir que la gota se extienda hasta tres cuartas partes del bisel del portaobjetos de empuje y hasta los bordes del portaobjetos extensor. 8. Empujar rápidamente el portaobjetos extensor hacia delante (lejos de la gota), este movimiento debe ser suave y continuo hasta el extremo del portaobjetos. 9. Permitir que el extendido se seque al aire antes de colorearlo, de preferencia no abanicar.
- 14. Se fundamenta en el principio de interacción colorante – carga eléctrica – célula (núcleo, granulo o citoplasma). Se utiliza una solución de Wright y un Buffer. 1. Agregar colorante de Wright con un gotero, cubriendo todo el frotis por 1 - 3 minutos. 2. Se agrega el buffer por 1 a 2 minutos, se espera a que aparezca una “nata verde metálica” 3. Se leva con agua corriente. 4. Secar y Observar.
- 15. Se utilizan los colorantes por separado y es la mas utilizada. Se usa un fijador (Metanol), un colorante acido (Eosina) y un colorante Básico (Azul de Policromo) y entre colorantes se usa agua para limpiar excesos. 1. Fijar 30 s en Metanol 2. Secar 3. Teñir 30 s en Eosina 4. Lavar y Secar 5. Teñir 30 s en Policromo 6. Lavar y Secar 7. Observar
- 16. No debe parecerse a ninguno de estos ejemplos. Debe ser ¾ laminilla, clar o, no muy grueso ni muy fino y contener las tres partes del frotis.
- 17. El FSP contendrá Cabeza (Gruesa), Cuerpo, zona de observación y una cola o barbas. Siempre deberá ser de bajo (10x) a gran aumento (100x) y en la zona de observación, debido a que la distribución celular es mejor en dicha zona.
- 18. cuerpo Zona ideal Cola (barbas) Zona de neutrófilos y monocitos origen Zona de linfocitos 1 7 6 7 6
- 21. Línea Celular Evaluar Eritrocitos Color Tamaño Forma Leucocitos Tamaño Forma Granulaciones Lobulaciones Relación núcleo / citoplasma Plaquetas Tamaño Forma Agrupación
- 22. Se diferencian entre los leucocitos, contando 100 células, se realiza con ayuda de un piano o contador celular.
- 23. A la observación del FSP, se encontró: Serie roja sin alteraciones, eritrocitos normociticos, y normocrómicos. ▪ *Puede haber Anisocitosis moderada con predominio de microcitos Anisocitosis : microcitos +++ ▪ Poiquilocitoisis marcada con predominio de ovalocitos Poiquilocitosis: ovalocitos +++, estomatocitos ++ Serie blanca, sin alteraciones en cuanto a conteo diferencial, tamaño, forma, granulaciones, lobulacion es y relación núcelo / citoplasma Plaquetas, normales en forma, tamaño y agrupación. No se observan células extrañas o microorganismos.
- 26. Anisocitosis: Micro o macrocitosis (+/- VCM) Alteraciones del color Alterada la HCM Alteraciones de la forma Alterado el A.D.E.
- 27. MACROCITOS Anemia megaloblástica, anemia hemolítica, hepatopatías, hipotir oidismo MICROCITOS Deficiencia de hierro, anemia sideroblástica, talasemia, saturni smo. Variación anormal del tamaño de los eritrocitos (diámetro normal 6 a 8 μ).
- 28. HIPOCROMÍA POLICROMASIA Células pálidas, centro claro y mayor a 2/3 del diámetro celular (HCM < 28) Deficiencia de hierro, talasemia, anemia sideroblástica, saturnismo, padeci mientos crónicos Células con diferentes colores, debido a la presencia de algunos reticulocitos. Indica eritropoyesis acelerada, como en hemorragias y anemias hemolíticas.
- 29. NOMBRE FORMA DEFICIT O PRODUCCIÓN POR PATOLOGÍAS Dacriocito Drepanocito Drepanocito hoja de vicero Eliptocito Queratocito Nizocito Lagrima – Raqueta Hoz – Media Luna - Falciforme Ovalocitos Casco – Cuerno Con más de dos Concavidades Eritropoyesis Cambio a: a Cadena B. de la globina Espectrina Anormalidades en la Circulación Talasemias – A. Megaloblasticos Anemia – Células Falciformes S – C Anemia – Megaloblástica – Eliptocitosis hereditaria hereditaria – Anemia por déficit de hierro. Talasemia CID – AH – Glomerulonefritis Transtornos donde hay esferocitos POIQUILOCITOSIS
- 30. NOMBRE FORMA DEFICIT O PRODUCCIÓN POR PATOLOGÍAS Equinocito (erizo) Estomatocito (boca) Esferocito (redondo) Esquistocito Acantocito Codocito Célula Fresa Cremada Dentada Célula Boca Taza Casquete hongo Redonda Fragmentos o Cascos Espuelas – Espina Espolones Diana - Sombrero Mexicano - Campana ATP asa Bajo pH Fármacos Catiónicos Espectrina Anquirina Daño mecánico o Traumático Alteración lípidos Altos Lípidos Enfermedad de hígado – Uremia– Quemaduras – Cáncer estómago – Tto con Heparina – Traumatismos Estomatocitosis hereditaria – Cirrosis - Anemia Rh nulos – Intoxicación por Etanol o Plomo Esferocitosis hereditaria – AHA – Incomp. ABO – Septicemia – EHRN AH. Intravascular – Quemaduras externas – CID – Uremia – Hemoglobinuria de la marcha Cirrosis – Abetalipoproteinemia - Posesplenectomia – Mala absorción de grasa Hemoglobinapatias – Talasemias – Esplenectomia – Enf. Renal – Anemia por deficit de hierro y Vitamina B6 – Déficit LCAT.
- 32. Es un pequeño residuo nuclear. Consiste en un grumo visible en el interior de los hematíes y que se tiñe, de un color que oscila entre el rojo oscuro y el negro, con los colorantes habituales. Aparece en sujetos esplenectomizados y en algunas anemias.
- 33. Consiste en la existencia de unos hematíes planos y con una forma de sombrero mexicano. Esto hace que los hematíes, vistos frontalmente, tengan un reborde colorado, que delimita una zona anular pálida, cuyo centro también está coloreado. Ello les confiere una imagen en diana y por eso, reciben el nombre de dianocitos. Se produce en la talasemia y en las hepatopatías.
- 34. ANILLOS DE CABOT Están formados por restos de la membrana nuclear o de microtúbulos. Se produce en la anemia megaloblástica.Y se ha observado en anemias hemoliticas CUERPO DE PAPENHEIMER También se llaman gránulos sideróticos. Son acúmulos de hemosiderina unida a proteínas. Consisten en gránulos basófilos. Se producen en los enfermos esplenectomizados y en las anemias sideroacrésticas.
- 35. PILA DE MONEDAS Característico en fenómenos autoinmunes, anemia hemolítica autoinmune o aglutininas frías. Falsos Rouleux en muestras viejas.
- 36. CRIOAGLUTININAS Acúmulos o grumos de glóbulos rojos con el más grande en el centro de la figura. Este agregado es típico de un paciente con enfermedad por crioaglutininas (Aglutinan a <37°)
- 38. IZQUIERDA Procesos Leucemoides o Leucemias. Aumento en las células inmaduras circulantes. DERECHA Hipersegmentación Anemias megaloblasticas
- 39. CUERPOS DE DÖHLE Áreas teñidas de azul, Anomalía de May- Hegglin Curso de infecciones o tras el tratamiento con fármacos citostáticos. HIPOSEGMENTACIÓN O ANOMALÍA DE PELGER-HUET Uso de farmacos mielotoxicos, aparecen granulos toxicos.
- 40. NUCLEOS CEREBRIFORMES O EN SEZARY Fungicemias, LM4-5. BASTÓN DE AUER Agrupaciones de gránulos primarios anormales, que adoptan una forma de agujas. Se encuentran en el citoplasma de los blastos de la leucemia mieloide aguda.
- 41. CUERPOS DE RUSSEL Inclusiones redondeados producidas por la acumulación de inmunoglobulinas. Es un tipo celular encontrado en el mieloma múltiple. INCLUSIÓN DE IG Inmunoglobulinas cristalizadas en linfocitos, común en procesos autoinmunes.
- 42. SOMBRAS DE GUMPRECHTY TRICOCITOS Leucemia Linfoide. SG son restos nucleares Tricoleucocito o linfocito piloso LINFOCITO ATÍPICO O REACTIVO Linfocito activado por proceso viral.
- 43. FAGOCITOSIS (AUTOINMUNEY PATÓGENOS) CHIEDAK HIGASHI Fallo en la formación de los fagolisosomas en los neutrófilos, lo que impide la destrución de las bacterias fagocitadas
- 44. Plaqueta Gigante Agregación Plaquetaria Trombocitosis Debe de haber entre 2 a 4 plaquetas por campo.
- 45. Microorganismos… Babebiosis,Tripanosomiasis y Plasmodium Células extrañas, Cel. Ósea en sangre periférica.
- 46. Errores Si alguna vez se habían preguntado que pasaba si dejaban un tubo con EDTA sin procesar, y de repente le hacían un frotis, se darán cuenta que encontraran una gran cantidad de cosas extrañas, que ya no tienen significado clínico, aunque si un significado biológico: Ciclo Celular. Neutrófilo en Apoptosis en un Frotis de Sangre periférica de una muestra con mas de dos horas de toma. Tinción deWright, 100x.
- 47. ERRORES Mala calidad del colorante No se filtro bien El agua estaba ya muy sucia… Etc.
- 49. Precursor eritroide Ligeramente mas grande Presenta restos de RNA en su citoplasma. Se tiñen con azul brillante de cresilo. 2 – 7% del total de eritrocitos
- 50. Valoración de la función eritropoyetica de la medula ósea.
- 51. Varones: 0.5 – 2.5% Mujeres: 0.5 – 3.0% Niños: 5 – 4% R/N: 2 – 6 %
- 52. DISMINUYEN Daños a la médula ósea Aplasia congénita de la médula roja Toxicidad u otros daños al hueso Deficiencia de vitaminas y oligoelementos deficiencia Vitamina B11 / ácido fólico deficiencia de vitamina B12 ▪ Anemia perniciosa deficiencia de hierro Tratamiento con citostáticos tratamiento de cáncer tratamiento de ciertas patologías del colágeno Deficiencia de eritropoyetina insuficiencia renal caquexia infecciones devastadoras, incluyendo SIDA algunas enfermedades crónicas anemia aplásica e hipoplástica AUMENTAN hemólisis influencia de toxinas razones inmunológicas razones mecánicas - en su mayoría de las válvulas artificiales de corazón talasemia, esferocitosis congénita y otras anemia hemolítica congénita policitemia hemorragias ciertos tipos de cáncer en pacientes con tumores productores de eritropoyetina pacientes con metástasis óseas iatrogenia medicamentos hematopoyéticos esplenectomía tratamiento con hierro, ácido fólico, vitamina B12
- 53. 1. En un tubo agregar 2 gotas de sangre y 2 gotas de azul brillante de cresilo. 2. Incubar a 37°C por 15 minutos 3. Realizar un frotis sanguíneo 4. Observar al microscopio
- 54. 1. Contar 1000 celular y en ellas los reticulocitos 2. Resultado se calcula:
- 55. Jaime Pérez, JC. (2012). Hematología: La sangre y sus enfermedades. México: Editorial McGraw Hill Freund M. (2011) Hematología, Guía práctica para el diagnóstico microscópico. Barcelona: Editorial Medica Panamericana. Almaguer C. Interpretación clínica de la biometría hemática. Medicina Universitaria 2003; 5(18): 35-40. Hurtado R, MelladoY, Flores G,Vargas, P. Semiología de la biometría hemática. Revista de la facultad de Medicina de la UNAM 2010; 53(4): 36-43. Campuzano G. ¿Cómo obtener un extendido de sangre periférica de óptima calidad?. Medicina & Laboratorio 2007; 13(11-12): 2008, 14: 125-152. Campuzano G. Del laboratorio clínico a la “fábrica de exámenes” y sus consecuencias. Medicina & Laboratorio 2008; 14(3-4): 109-110.