Laboratorio 6 recuento de microorganismos aerobios en productos farmaceuticos
- 1. SENA. C.A.B. BUGA TECNOLOGIA EN REGENCIA DE FARMACIA RECUENTO DE MICROORGANISMOS AEROBIOS EN PRODUCTOS FARMACEUTICOS INSTRUCTORA: GLORIA LILIANA LOZANO APRENDIZ: MARCOS MORENO SAENZ MARZO 16 2011 11
- 2. RESUMEN Durante el proceso de fabricación, almacenamiento y uso, los medicamentos son susceptibles de contaminarse con microorganismos como bacterias, mohos y levaduras y por consiguiente se pueden deteriorar, esto conlleva a cambios físicos y químicos del medicamento, por lo tanto representan riesgo para la salud. Con el presente laboratorio vamos a analizar los medicamentos y determinar la forma adecuada de almacenamiento y minimizar los riesgos. INTRODUCCION El procedimiento de recuento de microorganismos mesofilos o recuento de mohos y levaduras es una práctica que busca la evaluación microbiológica de productos farmacéuticos mediante la adecuada dilución de la muestra y la realización de análisis de rutina. Este proceso lo realizamos con el objetivo de determinar presencia de microorganismos en los productos farmacéuticos.
- 3. METODOLOGIA EQUIPOS Incubadora regulada 35 °C ±1°C Pesa analítica Autoclave Mezclador vortex MATERIALES Tubos de ensayo Pipetas de 1 ml Cajas de petri estériles Reactivos y Medios de cultivo Agar de recuento en placa para mesofilos Líquido de dilución (agua peptonada 0.1% PROCEDIMIENTO • Preparamos el agar Para 70 ml de agua destilada agregamos 1.2 gr de agar lo llevamos al mezclador vortex luego lo dejamos listo para esterilizarlo. • Preparamos el agua peptonada 30 ml agregamos 0.03 gr de peptona mezclamos y la agregamos a los tubos de ensayo 1
- 4. con 10ml muestra, el segundo tubo con 9 ml para el isopo y el tercero con 9 ml para el control. • Llevamos todo al autoclave para la esterilización. • Después de esterilizado todo vamos a la cabina de flujo laminar y allí tomamos la muestra del pastillero. • Abrimos el tubo con el diluyente en forma aséptica y Escurrimos el exceso de líquido de la torula apretándola contra la pared del tubo y manteniendo firmemente la plantilla estéril sobre la superficie a muestrear. • Frotamos con la cabeza de la tórula en un ángulo de 30° , toda la zona de muestreo en zigzag de arriba hacia abajo sin devolverse. Introducimos la torula en el tubo que contiene los 10 ml de agua peptonada rompiendo el extremo de donde los sostenemos y dejando caer el lado algodonoso a la solución. • Siembra. • Agitamos enérgicamente el tubo con la muestra en el mezclador vortex para lograr una buena homogenización. • Utilizamos el método de recuento en placa Sembramos 1 ml del tubo con la muestra en cada caja de petri y agregamos agar de recuento en placa en dos cajas aproximadamente 14 ml.. • Homogenizamos la muestra con el agar, agitamos 5 veces en sentido a las manecillas del reloj y 5 5 veces en sentido contrario, dejamos solidificar y por ultimo llevamos las cajas en posición invertida a la incubadora emb y mesofilos a 35 ºC. se dejan 7 días NOTA: DEJAMOS LAS CAJAS PARA ANALIZAR EN LA PROXIMA CLASE.
- 5. RESULTADOS MARZO 28 / 2011 Para productos farmacéuticos se espera encontrar un recuento muy bajo de aerobios mesofilos y ausencia total de otros indicadores de contaminación como coliformes ya que estos productos podrían ser administrados a personas inmunosuprimidas, que no deben entrar en contacto con ningún tipo de microorganismos. Contamos las colonias en cada una de las cajas, las que tengan mas de 30 colonias. Analizamos la caja petri con la muestra de control y observamos que está bien. La superficie revisada en el pastillero se encontró – 10 ufc. El ambiente en el que se maneja el pastillero analizado no tiene contaminación microbiológica, no tiene presencia de mohos ni otros microorganismos. Observando otros grupos vemos que la mayoría de las muestras tienen presencia de mohos por consiguiente se están manejando ambientes muy húmedos y esto hace que los medicamentos pierdan efectividad. PREGUNTA 1. Escriba el nombre de algunos microorganismos que podrían ser patógenos y encontrarse en los fármacos. La presencia de microorganismos en los preparados farmacéuticos puede tener consecuencias variadas, por ejemplo las esporas del hongo Mucor pueden encontrarse en forma quiescente y no producir nunca degradación del medicamento ni peligro para el paciente que lo toma. En el otro extremo estaría la presencia de salmonella en un medicamento, pues si bien la degradación
- 6. visible seria escasa o nula, de hecho constituye un grave peligro sanitario.