Transferencia de embriones
Descargar como PPTX, PDF1 recomendación179 vistas
Este documento describe el proceso de transferencia de embriones, incluyendo su historia, los protocolos para donantes y receptoras, la recolección de embriones, y el procesamiento posterior en el laboratorio. La transferencia de embriones permite la evaluación de la fertilidad y la difusión del semen valioso, además de prolongar la vida reproductiva de animales genéticamente superiores.
Transferencia de embriones
- 1. TRANSFERENCIA DE EMBRIONES Luis Fernando Paucar
- 2. 1946 Primera transferencia de un embrión bovino Historia 1951 Primera cría de la transferencia de embriones
- 3. Recolección de embriones de forma quirúrgica • Requería anestesia general (barbitúricos, inhalación). • Incisión de 15 cm de longitud en la línea media, por delante de la glándula mamaria. • Se extraían los cuernos uterinos con los ovarios.
- 4. Primera transferencia no quirúrgica 1964 • Por medio de sonda a través del cérvix. • Se crearon diferentes modelos de catéteres: rígidos, semirígidos y flexibles, podían tener 2 vías, una para insuflar el balón de goma e inmovilizar el catéter y la segunda para inyectar y recolectar el medio.
- 5. Donante • Vacas de tercer parto, Novillas. • Superioridad genética. • Alta fertilidad, con actividad cíclica. • Probabilidad de producir grandes cantidades de embriones. • Condición corporal ideal de 3.5 en vacas lecheras y 7 en vacas de carne. • No presentar enfermedades hereditarias. • No presentar enfermedades reproductivas. • Tener el registro de vacunas obligatorias y necesarias según la incidencia de enfermedades en la zona
- 6. Receptoras • Ideal vacas jóvenes secas. • Buena condición corporal, novillas mayores de 24 meses, que hayan alcanzado el 75% del peso vivo adulto. • Libre de enfermedades y trastornos reproductivos. • Ciclo estral regular. • No tener dificultad de parto. • Probada fertilidad y buena habilidad materna.
- 7. Ventajas: • Evaluación eficiente de la capacidad fertilizante de espermatozoides y ovocitos. • Difusión del uso de semen valioso y escaso. • Prolongación de la vida reproductiva de animales genéticamente valiosos, inmaduros o muy viejos. • Control de enfermedades de la esfera reproductiva. • Obtener descendientes de hembras de elevada calidad genética
- 8. Desventajas: • Porcentaje embriones transferibles, 30 - 40%. • Reducción del potencial de desarrollo pre y post implantacional. • Bajos porcentajes de gestación (30 a 40%). • Baja resistencia a la Criopreservación,. • Incremento de la mortalidad embrionaria. • Incremento del porcentaje de distocias por exceso de volumen fetal
- 9. Superovulación • Estimulación hormonal de la donante para la formación y desarrollo de varios folículos y su ovulación en ambos ovarios en un momento previamente fijado. • En promedio una vaca donante superovulada puede tener 8 a 10 huevos colectados, de 6 a 7 embriones transferidos y 3 a 4 gestaciones
- 10. Protocolo de Superovulación •Día 0, colocamos implante CIDR (dispositivo a base de progesterona) intravaginal por nueve días. •Día 7, colocamos FSH (Folltropin) durante cuatro días, dos dosis por día una la mañana y una en la tarde. •Día 9, retiramos implante y colocamos una dosis de prostaglandina •Día 10, colocamos últimas dos dosis de FSH •Día 11, detectamos celo, si se detecta en la mañana se insemina en la tarde y el celo se detecta en la tarde se insemina al otro día. •Después de la inseminación se espera 7 días para hacer el lavado y colecta embriones
- 11. Protocolo hormonal para Receptoras BE (benzoato de estradiol), P4 (progesterona), PGF2α (prostaglandina F2α; cloprostenol sódico), eCG (gonadotropina coriónica equina), GnRH (hormona liberadora de gonadotropinas; acetato de buserelina) y TETF (transferencia de embriones a tiempo fijo).
- 12. Recolección o lavado de embriones: • Se realiza al día 7 después de la primera I.A. de la vaca donadora, mediante un lavado uterino transcervical. • Se puede encontrar embriones en estadios de mórula y blastocisto, estadios más estables, hace posible que sean transferidos directamente (transferencia en fresco) o que resistan a actividades como la congelación y micromanipulación.
- 13. Materiales: Circuito de lavado Sonda Foley (Con estilete o mandril) Medio de lavado (PBS)Dilatador de cérvix Guantes de palpación ginecológica Filtro de recolección Jeringas Lidocaína al 2%
- 14. Procedimiento: Palpación rectal o evaluación ecográfica anestesia epidural, 5ml a 7ml de lidocaína al 2%
- 15. Se limpia y desinfecta la región perineal y vulvar
- 16. dilatación del cérvix para facilitar el paso de la sonda, esto se realiza con el dilatador de cérvix. Se introduce un brazo por vía rectal y con el otro se introduce la sonda Foley (con el estilete o mandril) vía vaginal, se pasa el cérvix
- 17. Se infla el balón o globo con 10 -15 ml de aire o de solución salina o PBS Se procede a introducir el medio de lavado
- 18. El líquido debe ser colectado y pasa a través de un filtro en donde van a ser colectados los embriones. Finalizada la recolección de embriones, desinflar el globo y extraer la sonda.
- 19. Circuito abierto con flujo discontinuo Inyección y recolección con una jeringa Tipos de lavado uterino: El medio se inyecta y recolecta por la misma vía y con la misma jeringa, se utilizan 2 jeringas de 15ml, 2 jeringas de 20ml, 2 jeringas de 25ml y 2 jeringas de 30ml, estas jeringas son especiales para lavar embriones, en esta técnica se descarga un volumen de medio (PBS) fijado por el operador.
- 20. Circuito cerrado con flujo continuo Con este método se emplean catéteres de 3 vías, rígidos o flexibles. 1era vía, es destinada a la inyección del medio para el lavado. 2da vía, se inyecta aire o medio para llenar el balón. 3era vía, se recolecta la solución de lavado con los embriones
- 21. Laboratorio: Los filtros que fueron utilizados para el lavado son llevados al laboratorio para luego trasladar los embriones atrapados a las placas de petri La persona encargada de realizar la selección o búsqueda de los embriones utiliza un microscopio y una placa de petri grande cuadriculada
- 23. Llenado de pajillas: • Usar jeringas de 1 mL desechables para llenar pajillas. • Primero llenar la pajilla con etilenglicol, luego dejar un espacio de aire, seguido de etilenglicol o glicerol con el embrión (el embrión queda en la parte media de la pajilla), llenar de nuevo un espacio de aire y por último llenar con etilenglicol o glicerol. • El espacio de aire sirve de ayuda al momento cuando se transfiere el embrión a que no quede adherido en la pajilla o en la punta de la pajilla y salga todo el contenido