UNIVERSITE NAZI BONI CENTRE HOSPITALIER

**************** UNIVERSITAIRE SOURO

UNITE DE FORMATION ET DE SANOU
RECHERCHE EN ****************
SCIENCES ET TECHNIQUES 01 BP: 676 BOBO-
**************** DIOULASSO
GENIE BIOLOGIQUE ****************
****************

RAPPORT DE FIN DE CYCLE

Pour obtenir la

LICENCE PROFESSIONNELLE EN GENIE BIOLOGIQUE

Option: Analyses Biologiques

Sur le thème :

Efficacité de l’auramine dans le diagnostic microscopique

de la tuberculose au Centre Hospitalier Universitaire Souro
Sanou de Bobo-Dioulasso

Présenté par

TUINA Alassane T. Claude

Sous la direction de :

Directeur de rapport : Dr NAMOUNTOUGOU Moussa

Maître de stage : Dr MILLOGO Anselme

i
Année académique 2015-2016
Dédicace

Je dédie ce travail à :

Mon père et ma mère qui ont tant investis dans mon éducation. Permettez-moi de dire que ce

travail est le fruit de vos conseils et de votre patience ;

Mes frères et sœurs, merci pour tout votre soutien dans la réussite de ce travail.

Mes amies, pour leur soutien indescriptible dans la rédaction de ce document

i
Année académique 2015-2016
Remerciements
Ce travail a été réalisé au Centre Hospitalier Universitaire Souro Sanou sous la direction de
l’Université Polytechnique de Bobo-Dioulasso.
Nous exprimons nos profondes gratitudes :
Au Professeur Macaire S. OUEDRAOGO, Président de l’Université Nazi-BONI (UNB)
Au Professeur Georges Anicet OUEDRAOGO, ancien président de l’Université Nazi
BONI de Bobo-Dioulasso (UNB) d’avoir accepté ma demande d’admission au sein de votre
institution.
Au Docteur Moussa NAMOUNTOUGOU, Directeur de l’UFR/SVT malgré ses multiples
occupations m’a toujours guidé avec rigueur, confiance. Vos précieux conseils ont
énormément contribué à améliorer ce document.
Au Professeur Sado TRAORE, ancien directeur de l’Unité de Formation et de Recherche en
sciences et Techniques (UFR/ST) pour avoir autorisé ce stage.
A toute l’équipe pédagogique de l’UFR/ST, pour avoir assuré la partie théorique la
formation en génie biologique.
Au Professeur Sanata BAMBA, chef de département des laboratoires, pour m’avoir accepté
dans le département des laboratoires.
Au Professeur Abdoul Salam OUEDRAOGO, chef de service bactériologie, pour m’avoir
accepté dans son service.
A Monsieur Anselme MILLOGO et au Docteur Abdoul Karim KONATE, pour avoir été
mes maîtres de stage et pour m’avoir fait partager leurs temps, leurs expériences et leurs
compétences.
A Monsieur George BIEBOURE, pour avoir participé à ma formation et son soutien dans ce
travail.
À toute l’équipe du département des Laboratoires pour leurs conseils, encouragements et
assistance technique.
À nos oncles et tantes, cousins et cousines, pour leurs encouragements.
À tous ceux qui m’ont soutenu dans mes études scolaires et/ou universitaires.

ii
Année académique 2015-2016
À tous nos promotionnaires et amis, ce fut un plaisir pour moi de partager ce trajet avec
vous.

Table des matières

Dédicace......................................................................................................................................i
Remerciements..........................................................................................................................ii
Table des matières...................................................................................................................iii
Liste des tableaux.....................................................................................................................vi
Liste des figures........................................................................................................................vi
Sigles et abréviations..............................................................................................................vii
Préambule.................................................................................................................................ix
Résumé......................................................................................................................................xi
Abstract...................................................................................................................................xii
Introduction...........................................................................................................................xiii
Première partie : Revue de la littérature.............................................................................1
Revue de la littérature.................................................................................................................1
Chapitre I : Généralité sur la tuberculose..............................................................................1
...............................................................................................................................................................................1
I. Définition de la tuberculose.........................................................................................................................3
II. Caractères bactériologiques des mycobactéries...........................................................................................3
1. Caractères morphologiques.....................................................................................................................3
2. Caractères culturaux................................................................................................................................4
3. Caractères biochimiques..........................................................................................................................4
4. Caractères antigéniques...........................................................................................................................4
III. Physiopathologie et signes cliniques.......................................................................................................5
1. Physiopathologie.....................................................................................................................................5
2. Signes cliniques.......................................................................................................................................6
IV. EPIDEMIOLOGIE..................................................................................................................................6
1. Ampleur de la tuberculose.......................................................................................................................6
2. Situation de la co-infection TB/VIH.......................................................................................................7
V. Mode de transmission..................................................................................................................................7
VI. Les moyens de prévention.......................................................................................................................8
1. La chimioprophilaxie à l’isoniazide........................................................................................................8
2. La vaccination par le BCG......................................................................................................................8

iii
Année académique 2015-2016
 VII. Traitements de la tuberculose..................................................................................................................8
1. Les objectifs du traitement......................................................................................................................8
2. Les médicaments antituberculeux...........................................................................................................9
Chapitre II : Diagnostic bactériologique de la tuberculose..................................................3
I. Définition...................................................................................................................................................10
II. Prélèvements..............................................................................................................................................10
III. La Microscopie......................................................................................................................................10
IV. La Culture bactérienne..........................................................................................................................12
V. Diagnostic moléculaire par la Polymerase Chain Reaction (PCR)............................................................13
Deuxième partie : Notre étude...............................................................................................10
Chapitre I : Matériels et méthode.........................................................................................10
I. Matériels....................................................................................................................................................14
1. Cadre de l’étude.....................................................................................................................................14
3. Echantillonnage.....................................................................................................................................14
4. Population d’étude.................................................................................................................................14
5. Critères d’inclusions..............................................................................................................................15
6. Critères de non inclusions.....................................................................................................................15
7. Aspects éthiques....................................................................................................................................15
8. Variable de l’étude................................................................................................................................15
II. Méthodes....................................................................................................................................................15
1. Prélèvements..........................................................................................................................................15
2. Analyses au laboratoire.........................................................................................................................15
3. Contrôles de qualité internes.................................................................................................................16
4. Analyses statistique des données...........................................................................................................17
Chapitre II : Résultats............................................................................................................14
I. Les caractéristiques sociodémographiques des patients de l’étude...........................................................19
1. L’âge......................................................................................................................................................19
2. Le sexe...................................................................................................................................................19
II. Les données biologiques............................................................................................................................19
1. Le statut sérologique VIH des patients..................................................................................................19
2. Les résultats bactériologiques................................................................................................................19
Discussion.................................................................................................................................25
I. Les résultats de notre étude........................................................................................................................25
II. Limite de l’étude........................................................................................................................................27
Conclusion...............................................................................................................................25
Perspectives.............................................................................................................................28
Recommandations...................................................................................................................29
Bibliographie...........................................................................................................................31

iv
Année académique 2015-2016
 v
Année académique 2015-2016
Liste des tableaux
Tableau I: Détermination des valeurs intrinsèques dans un dépistage/diagnostic....................18
Tableau 2 : La population d’étude repartis selon le sexe.........................................................19
Tableau 3 : Résultats de l’observation microscopique du Ziehl Neelsen................................20
Tableau 4 : Résultats du Ziehl Neelsen repartis selon l’âge et le sexe.....................................21
Tableau 5 : Résultats de l’observation microscopique de l'Auramine.....................................22
Tableau 6 : Répartition des cas positifs à l'Auramine selon l’âge et le sexe............................23
Tableau 7 : Détermination des valeurs intrinsèques de l'Auramine.........................................24

Liste des figures

Figure 1 : La structure de la paroi des mycobactéries................................................................3
Figure 2 : Colonie de Mycobacterium tuberculosis sur L-J........................................................4
Figure 3 : Physiopathologie de la tuberculose............................................................................6
Figure 4 : BAAR observés au microscope à fluorescence après coloration à l’Auramine......11
Figure 5 : BAAR colorés au Ziehl Neelsen..............................................................................12
Figure 6 : Confection des frottis, coloration au Ziehl et image des BAAR au X100...............16

vi
Année académique 2015-2016
Sigles et abréviations
BAAR : Bacille Acido-Alcoolo-Résistant
BCG : Bacille de Calmette et Guérin
BK : Bacille de Koch
CHUSS : Centre Hospitalier Universitaire Souro Sanou
IDR : Institut du Développement Rural
INSSA : Institut Des Sciences de la Santé
ISEA : Institut des Sciences Exactes et Appliquées
ISNV : Institut des Sciences Naturelles et de Vie
LJ : Lowenstein Jensen
LMD : Licence Master Doctorat
MCT : Mycobactéries du complexe tuberculosis
MGIT: Mycobacteria Growth Indicator Tube
MNT: Mycobacterium Non Tuberculosis
MTB : Mycobactérium tuberculosis
OMS : Organisation Mondiale de la Santé
PCR : Polymérase Chain Réaction
PIT : Primo Infection Tuberculeuse
SD Bioline : Standard Diagnostic Bioline
SEG : Sciences Economiques et de Gestion.
SIDA : Syndrome d’immunodéficience Acquise
TB: Tuberculose
TB-MR: Tuberculose Multirésistante
VIH : Virus de l’Immunodéficience Humaine
TB/VIH : Tuberculose associée au VIH
PV/VIH : Personne vivant avec le VIH
TEP : Tuberculose Extra-Pulmonaire
TPM+ : Tuberculose Pulmonaire à Microscopie Positive
TPM- : Tuberculose Pulmonaire à Microscopie Negative
UFR/ST : Unité de Formation et de Recherche en Sciences et Techniques
vii
Année académique 2015-2016
UFR /SVT : Unité de Formation et de Recherche en Sciences de la vie et de la terre
UNB : Université Nazi BONI.

viii
Année académique 2015-2016
Préambule
Présentation de L’Université Nazie Boni (UNB)
L’Université Nazi Boni (UNB), est un établissement public d’enseignement supérieur et de
recherche scientifique au Burkina Faso. Elle a été créée le 19 septembre 1995 sous le nom de
Centre Universitaire Polytechnique de Bobo-Dioulasso (CUPB). En mai 1997 elle changea de
nom et devint Université Polytechnique de Bobo-Dioulasso (UPB) et le 8 mai 2017, l’UPB est
baptisée l’Université Nazi Boni. Elle comprend actuellement huit (8) établissements qui sont :
 L’école Supérieure d’Informatique (ESI) ;

 L’Institut du Développement Rural (IDR) ;

 L’Institut Supérieur des Sciences de la Santé (INSSA) ;

 L’Institut Universitaire de Technologie (IUT) ;

 L’Institut des Médias (IM) ;

 L’Unité de Formation et de Recherche en Sciences Juridiques, Politiques,

Économique et de Gestion (UFR/SJPEG) ;
 L’Unité de Formation et de Recherche en Lettres et Sciences Humaines (UFR/LSH)

 L’Unité de Formation et de Recherche en Sciences de la Vie et de la Terre

(UFR/SVT).
En plus de ces établissements, l’UNB compte un centre universitaire, le Centre Universitaire
Polytechnique de Gaoua (CUPG).
Toutes ces structures œuvrent sans relâche à doter aux étudiants une formation de qualité dans
plusieurs domaines.
La filière Génie-Biologique de l’UFR/SVT nous propose trois options :
 Analyse biologique ;
 Nutrition et Diététique ;
 Industrie Agro-alimentaire.

Contexte du stage
ix
Année académique 2015-2016
 La filière Génie-Biologique forme des diplômés de niveau licence dans les trois options
qu’elle comprend et qui répondent aux besoins du milieu professionnel.
Dans l’optique d’obtenir le diplôme de licence en Analyse biologique, l’étudiant doit valider
d’abord ses cinq premiers semestres, puis effectuer dans le cadre du sixième semestre un stage
d’au moins trois mois. Au cours de ce stage en entreprise, l’occasion est donnée à l’étudiant
d’appréhender le monde professionnel et de confronter ses connaissances théoriques à la
pratique. Suite à son séjour dans un laboratoire d’analyse biologique, il produit un document
scientifique qui doit faire l’objet d’une soutenance et dans lequel doit figurer ses différentes
réalisations.
C’est dans ce contexte que nous avons été reçus au laboratoire d’analyse biologique du
CHUSS pour notre stage de fin cycle.

x
Année académique 2015-2016
Résumé
Les travaux ont été menés au laboratoire de mycobactériologie du CHU/SS de Mars 2016 à
Août 2016 au Burkina Faso, pays subsaharien.
L’objectif de ces travaux a été d’évaluer l’efficacité de la coloration à l’Auramine dans le
diagnostic de la tuberculose. L’efficacité diagnostique de la coloration à l’Auramine a été
évaluée en utilisant la coloration de Ziehl-Neelsen comme technique de référence. Au total,
498 frottis de crachats de 300 patients ont été lus au microscope classique puis au microscope
à fluorescence pour la recherche de bacilles acido-alcoolorésistants (BAAR) par coloration.
Les données ont été analysées par le logiciel Epi Infos.
Tous les échantillons positifs au Ziehl-Neelsen l’ont été aussi à l’Auramine. Par contre, des
échantillons négatifs au Ziehl-Neelsen ont été diagnostiqués positifs à l’Auramine. La
coloration au Ziehl-Neelsen a montré une efficacité diagnostique de 8% et celle à l’Auramine
a montré une efficacité diagnostique de 10,66%. Les valeurs intrinsèques de l’Auramine ont
été calculées et ont montré une sensibilité de 100 %, une spécificité de 97 %, des valeurs
prédictives positive et négative respectivement de 75 et 100 %.
La coloration à l’Auramine a une meilleure sensibilité pour la détection des BAAR. Son
utilisation pourra augmenter le taux de détection des cas de tuberculose au Burkina Faso.

Mots clés : Tuberculose, Ziehl-Neelsen, Auramine, Burkina Faso

xi
Année académique 2015-2016
Abstract
The work was carried out in the mycobacteriology laboratory of CHUSS of March to
September 2016 in Burkina Faso, à sub-Saharan country.
The objective of this work was to evaluate the effectiveness of Auramine staining in the
diagnosis of tuberculosis.
The diagnostic efficacy of Auramine staining has been assessed using Ziehl Neelsen
staining as a reference technique.
In total 498 sputum smears from 300 patients were read under a conventional microscope
and then under a microscope fluorescence for search for Acid-Fast-Bacilli (AFB) by
staining.
The data was analyzed by the Epi infos software.
All sample positive for Ziehl Neelsen were also positive for Auramine.
On the other hand, samples négatives for Ziehl Neelsen were diagnosed positive for
Auramine.
The Ziehl Neelsen staining showed a diagnostic efficiency 08% and that with Auramine
shows a diagnostic efficiency of 10,66%.
Intrinsic Auramine values were calculated and showed a sensitivity of 100%, specificity of
97%, positive and négative prédictive values of 75% and 100% respectively.
Auramine staining has better sensitivity for AFB détection. His use maye increase the
détection rate of tuberculosis cases in Burkina Faso.

xii
Année académique 2015-2016
Introduction
La tuberculose est une maladie contagieuse causée par les mycobactéries du complexe
tuberculosis. Elle demeure l’une des principales causes de morbidité et de mortalité en Afrique
(WHO, Global tuberculosis control 2010, 2010). En 2009, dans le monde, le nombre de nouveaux
cas de tuberculose était estimé à 9,4 millions, dont 30 % en Afrique, et 2,6 millions de nouveaux
cas de tuberculose à frottis positifs, dont 23 % des cas relevés en Afrique (WHO, Global
tuberculosis control 2010, 2010).
Burkina Faso est un pays subsaharien de 16 millions d’habitants où la tuberculose demeure un
important problème de santé publique. En 2009, le nombre de cas de tuberculose attendu au
Burkina Faso était de 34 000 et le nombre de cas réellement détectés était de 4 716 (WHO,
Global tuberculosis control 2010, 2010). Sur la base des statistiques du programme national de
tuberculose (PNT), le nombre de cas détectés reste chaque année en dessous du nombre attendu.
En effet, le diagnostic et le suivi des patients tuberculeux reposent essentiellement sur la
détection microscopique après coloration au Ziehl-Neelsen de frottis d’expectorations à la
recherche de bacilles acido-alcoolo-résistant (BAAR). Il s’agit d’une technique simple, peu
coûteuse mais moins sensible. La faible sensibilité de cette technique entraine un diagnostic peu
pertinent de la maladie (Panchal S, 2011). La coloration au Ziehl-Neelsen reste particulièrement
peu sensible chez les patients pauci bacillaires parmi lesquels les patients co-infectés par le VIH
et les enfants ; chez qui l’obtention d’une expectoration spontanée est difficile (Nicol M, 2011).
Cette sous-détection des cas implique la nécessité d’améliorer le diagnostic de la tuberculose au
Burkina Faso.
Pour remédier à cette sous détection, le PNT préconise la détection microscopique après
coloration à l’Auramine afin d’améliorer le diagnostic de la tuberculose, en particulier chez les
enfants et les patients co-infectés par le VIH.
L’intérêt de notre étude a été donc de montrer l’apport de cette technique dans le diagnostic de la
tuberculose.
Nous avons mené cette étude à l’hôpital sourô-sanou qui possède au sein de son laboratoire de
mycobactériologie des outils nécessaires pour réussir notre travail.

En s’appuyant sur la disponibilité de ces outils dans ce laboratoire, nous avons construit notre
travail sur les objectifs suivants :

1
  Objectif général
Etudier l’option de l’Auramine dans le diagnostic microscopique de la tuberculose à l’hôpital
sourô-sanou de Bobo-Dioulasso
Objectifs spécifiques
 Déterminer le profil sociodémographique des patients atteint de tuberculose.
 Evaluer l’efficacité du diagnostic microscopique à l’Auramine en comparaison au Ziehl
Neelsen.

2
Première partie : Revue de la
littérature
Chapitre I : Généralité sur la
tuberculose
 I. Définition de la tuberculose

La tuberculose est une maladie infectieuse, contagieuse endémo-épidémique, à transmission

essentiellement interhumaine (PNT., 2011). Elle est causée par les mycobactéries du complexe
tuberculosis : Mycobacterium tuberculosis, Mycobacterium africanum, Mycobacterium bovis.

II. Caractères bactériologiques des mycobactéries

1. Caractères morphologiques
Au microscope optique, les mycobactéries apparaissent comme de fins bacilles légèrement
incurvés de 2 à 5 µm de long sur 0,2 à 0,3 µm de large. Elles sont immobiles, non sporulées et
non capsulées. L’ultrastructure de la paroi montre que celle-ci est plus riche en acide mycolique
par rapport aux autres bactéries. Cette propriété leur confère l’aptitude à résister à la décoloration
par des substances fortes (mélange d’acide et d’alcool) après une coloration par un colorant
phéniqué (Fuchsine et Auramine). Le qualificatif de Bacilles Alcoolo-Acido-résistants (BAAR)
est une conséquence de cette propriété (Rastogi N., 2001) (Figure 1).

Figure 1 : La structure de la paroi des mycobactéries

[Http://www.arnobio2.com, Arnaud Delahaye]

3
 2. Caractères culturaux

Les mycobactéries ne poussent pas sur les milieux usuels. Elles nécessitent des milieux très
enrichis. Le milieu fréquemment utilisé est le milieu de LOEWENSTEIN-JENSEN. La
croissance des mycobactéries est lente ; elles prennent 20 heures pour se diviser. Les colonies
n’apparaissent généralement qu’après 3 semaines d’incubation à 37 ° C. Au départ on obtient des
colonies fines, après des colonies de teinte crème-beige, sèches, à la surface rugueuse, en chou-
fleur (Figure 2).

Colonies en choux fleur sur LJ

Colonies fines sur LJ au départ
[Http://www.arnobio2.com, Arnaud Delahaye]

Figure 2 : Colonie de Mycobacterium tuberculosis sur L-J

3. Caractères biochimiques
Mycobacterium tuberculosis est aérobie strict. Il synthétise la catalase et réduit le nitrate en
nitrite. Au cours de sa croissance il synthétise une quantité importante d’acide nicotinique ou
niacine. Ces différents caractères sont les plus recherchés dans les tests biochimiques.

4. Caractères antigéniques
Les mycobactéries possèdent des antigènes (Ag) dont deux ont un intérêt diagnostique : La
tuberculine utilisée dans le diagnostic clinique grâce l’intradermo-réaction(IDR) et la protéine
MPT 64 dans le diagnostic biologique après croissance en milieu de culture pour faire la
différence entre les mycobactéries du complexe tuberculosis et les atypiques.

4
 III. Physiopathologie et signes cliniques

1. Physiopathologie
La transmission de la tuberculose est interhumaine. Un sujet saint s’infecte après avoir inhalé des
bacilles tuberculeux se trouvant dans les fines gouttelettes (gouttelettes de Pflüge) émises par un
malade de la tuberculose. Les bacilles inhalés infectent les poumons et provoquent une réponse
immunitaire. Dans 90% des cas cela se passe sans manifestations cliniques. Les bacilles restent à
l’état quiescent, le sujet présente une infection tuberculeuse latente(ITL) et peut développer à
plus ou moins long terme une tuberculose maladie :
C’est la Primo-Infection Tuberculeuse (PIT). Dans 10 % des cas, les bacilles sont soit neutralisés
par le système immunitaire et le sujet ne présente pas la maladie, soit après une réinfection
massive ou une immunodépression du sujet, ils se réactivent et se disséminent dans l’organisme
du sujet provoquant ainsi la tuberculose maladie.
Lorsque l’organe infecté est le poumon il s’agit d’une tuberculose pulmonaire (TP) ; c’est la
forme la plus fréquente. En dehors des poumons si un autre organe est touché il s’agit d’une
tuberculose extra-pulmonaire(TEP) (Figure 3).

M.tuberculosis 3

1
Guérison spontanée
2 Tuberculose latente >90%
Tuberculose maladie
5

Réactivation
Réinfection
4

Figure 3 : Physiopathologie de la tuberculose

5
 2. Signes cliniques
Les symptômes respiratoires majeurs sont la toux persistante de plus de deux (2) semaines, avec
une expectoration mucopurulente, parfois striée de sang. D’autres signes tels qu’une hémoptysie,
un amaigrissement, une asthénie, une aménorrhée non gravidique chez la femme en âge de
procréer, une fièvre surtout vespérale, des sueurs nocturnes et des douleurs thoraciques peuvent
être associés.

IV. EPIDEMIOLOGIE

1. Ampleur de la tuberculose
Dans le monde
Selon l’OMS, 33% de la population mondiale est infectée par le BK soit environ 2 milliards de
personnes (WHO, 2010). Les populations les plus exposées sont les personnes immunodéprimées
et celles vivant dans la précarité. Selon les rapports récents de l’OMS, l’incidence mondiale de la
tuberculose était à 9 ,6 millions de cas en 2014, avec 1,2 million de personnes vivant avec le
VIH. Sur 1,5 million de personnes décédées de la tuberculose, 0,4 million de personnes étaient
séropositives au VIH (WHO, 2015).
En Afrique
En Afrique, les incidences étaient estimées à 345 cas pour 100.000 habitants soit environ 2 800
688 cas en 2009 et 276 cas pour 100. 000 habitants soit 2 300 000 cas en 2010 (18-20). Quant à la
prévalence, elle était de 475 cas pour 100 000 soit environ 3 900 000 cas (PNT, 2011).
Au Burkina Faso
Au Burkina Faso, la tuberculose reste un problème majeur de santé publique. Les incidences de
108 cas de TB pulmonaire à microscopie positive (TPM+) pour 100 000 habitants et de 248 cas
de TB toutes formes confondues pour 100 000 habitants ont été relevées en 2008. En prenant en
compte les statistiques de 2007 (13. 730 258 habitants), les valeurs de l’incidence rapportées à la
population générale seraient respectivement de 14 829 cas de TPM+ et 34 051 cas de TB toutes
formes confondues (PNT, 2011).
En 2014, 3722 nouveaux cas de tuberculose pulmonaire et 683 nouveaux cas extra pulmonaire
ont été diagnostiques bactériologiquement. La mortalité était estimée à 1600 décès (WHO, 2014).

6
 2. Situation de la co-infection TB/VIH
Dans les populations où la prévalence du VIH est élevée, la tuberculose est la première cause de
morbidité et de mortalité. En 2009 ,11 à 13 % des nouveaux cas de tuberculose étaient infectés
par le VIH. Le nombre de décès chez les Personnes vivant avec le VIH du fait de la tuberculose
est important : environ 1/2 million de PV VIH en 2009. La région Africaine de l’OMS compte
près de 80% de ces cas (OMS, 2008). Au Burkina Faso, le taux de prévalence du VIH chez les
nouveaux cas de tuberculose toutes formes était estimé à 20% en 2009. Chez les patients qui
manifestent une tuberculose pulmonaire à microscopie positive le taux de prévalence du VIH
était à 15%. Cette prévalence est plus élevée chez les patients qui souffrent d’une tuberculose
pulmonaire à microscopie négative et ceux atteints des formes extra - pulmonaires. Dans ce
groupe, la prévalence de l’infection à VIH est de 32%. Ce problème posé par la co-infection
TB/VIH a prévalu à l’élaboration de trois plans concertés contre la co-infection TB/VIH par le
PNT et le Comité Ministériel de Lutte contre le SIDA/section Santé (CMLS/Santé) (OMS, 2008).

V. Mode de transmission
La transmission est essentiellement interhumaine. Elle se fait par voie aérienne. Le patient TPM+
représente la source de contamination des sujets sains. Ses secrétions bronchiques contiennent au
moins 104 bacilles/ml. La toux produit dans l’atmosphère de fines gouttelettes infectantes
appelées gouttelettes de Pflüge (Rastogi N., 2001). Un sujet sain s’infecte en inhalant des
particules qui atteignent les alvéoles pulmonaires.
Mycobacterium tuberculosis étant une bactérie aérobie va se multiplier préférentiellement dans
les tissus pulmonaires. Il existe d’autres voies de transmission mais sans grande importance
épidémiologique. Il y a la voie digestive par ingestion d’aliments d’origine animale (lait), la voie
génitale (TB urogénitales) (Rastogi N., 2001). Les principales voies d’élimination des MCT hors
de l’organisme sont :
 Les expectorations (crachats)
 Les selles : elles peuvent contenir des MCT qui ont été dégluties avec les sécrétions
bronchiques. Des études ont montré que les MCT résistaient à l’acidité gastrique et
peuvent donc être recherchées dans les selles
 Les urines (TB uro-génitale)
 Les pus après fistulisation des ganglions

7
VI. Les moyens de prévention

1. La chimioprophilaxie à l’isoniazide
Les sujets ayant été en contact avec un sujet à TPM+ et à risque de développer la tuberculose
reçoivent une chimio prophylaxie à l’isoniazide. L’Isoniazide leur est donné tous les jours
pendant six mois afin de leur éviter de développer la tuberculose maladie. Les cibles pour la
chimio prophylaxie par l’Isoniazide sont les enfants âgés de moins de 5 ans et les PV VIH. Ce
traitement prophylactique ne doit pas être mis en œuvre si l’enfant est symptomatique ou suspect
d’avoir une tuberculose maladie. Pour ce faire, il est important de rechercher d’abord la
tuberculose chez les enfants en contact étroit avec des adultes ayant une TPM+ (Rastogi N.,
2001).

2. La vaccination par le BCG

Le Bacille de Calmette et Guérin (BCG) est un vaccin fait de bacilles vivants atténués. Ce sont
des souches bovines repiquées 230 fois (en 13 ans) sur pomme de terre cuite en bile glycérinée
(Connollly M., 1956). Cette souche a perdu sa virulence pour l’homme et les animaux mais elle
permet une protection incomplète (80%) contre les formes graves de tuberculose. Elle ne protège
pas contre les formes courantes. Le vaccin a été pratiqué pour la première fois en 1921.

VII. Traitements de la tuberculose

1. Les objectifs du traitement

Le traitement antituberculeux vise six points :
 Guérir le patient ;
 Rompre la chaîne de transmission des BK ;
 Éviter les complications ;
 Éviter les rechutes ;
 Améliorer la qualité de vie du patient ;

8
  Éviter le développement et la transmission de la résistance des BK aux
antituberculeux

2. Les médicaments antituberculeux

Plusieurs médicaments sont utilisés pour le traitement de la tuberculose, on peut citer :
L’isoniazide, la rifampicine, la streptomycine, l’ethambutol et la pyrazinamide.
Ces médicaments existent soit sous forme simple soit sous forme combinée. L’avantage de ces
combinaisons est d’améliorer la compliance et l’observance du traitement.

9
 Chapitre II : Diagnostic
bactériologique de la tuberculose
I. Définition
Le diagnostic bactériologique est le maillon fort pour la prise en charge des cas positifs de
tuberculose. Elle est basée sur les caractères morphologiques, culturaux, biochimiques et
génétiques des mycobactéries.

II. Prélèvements
Les principaux prélèvements recueillis pour la recherche des mycobactéries dans le cadre du
diagnostic de la tuberculose pulmonaire sont : les crachats, les liquides de tubages gastriques, les
prélèvements nasopharyngés, les produits de lavage broncho-alvéolaire, les selles (recherche des
BAAR dégluties ou en cas de tuberculose digestive). En ce qui concerne les crachats, il est
recommandé de recueillir au moins 2 crachats pour le diagnostic. Pour le diagnostic des TEP, la
nature des prélèvements est fonction de l’organe affecté.

III. La Microscopie
 Principe de la microscopie
La microscopie sert d’instrument de diagnostic pour la prise en charge des TPM+. Après la
confection, le séchage et la fixation des frottis, deux techniques sont utilisées pour la coloration
des lames.
Il s’agit de la coloration à l’Auramine et la coloration de Ziehl Neelsen utilisant la Fuchsine.
Après coloration, les lames sont soumises à la lecture au microscope.
Le microscope à fluorescence est utilisé pour la lecture des lames colorées à Auramine, et le
microscope ordinaire est utilisé pour la lecture des lames colorées au Ziehl Neelsen. Les
laboratoires pratiquant l’Auramine la font en première intention et confirment les cas positifs
bacillaires par la coloration de Ziehl Neelsen.

 Objectifs de la microscopie
Les objectifs de la microscopie sont :
- Mettre en évidence les bacilles acido-alcoolo résistants (BAAR) dans les produits
pathologiques (crachats en général) de malades suspectés de tuberculose ;
- Affirmer le diagnostic de la tuberculose pulmonaire ;

10
 - Permettre la classification des malades tuberculeux pulmonaires en deux groupes : les
tuberculeux pulmonaires à microscopie positive (TPM+), source de contamination dans la
communauté et les tuberculeux pulmonaires à microscopie négative (TPM-) ;
- Surveiller l’efficacité du traitement antituberculeux ;
- Confirmer la guérison des malades TPM+ à la fin du traitement.
Deux techniques de coloration sont utilisées dans la microscopie

 Coloration à l’Auramine
L'Auramine est un colorant qui se fixe sur le bacille et le rend fluorescent. Après décoloration par
l'acide-alcool et contre-coloration de la préparation par le KMnO4, le bacille sur fond noir
apparait jaune-vert au microscope à fluorescence (voir figure 4). La lecture se fait au
grossissement X25 ou X40.

Figure 4 : BAAR observés au microscope à fluorescence après coloration à l’Auramine

 Coloration de Ziehl-Neelsen utilisant la fuchsine

Dans la technique de Ziehl-Neelsen, la fuchsine colore en rouge les bacilles. Ceux-ci résistent à la
décoloration par le mélange alcool-acide. Le bleu de méthylène utilisé comme contre colorant
colore le fonds du frottis en bleu. Les BAAR apparaissent rouges sur fond bleu (figure 5). La
lecture se fait au microscope optique sous huile à immersion (X100). C’est la technique utilisée
dans tous les laboratoires du réseau du PNT au BF (Figure 5).

11
Figure 5 : BAAR colorés au Ziehl Neelsen

IV. La Culture bactérienne

La culture se fait sur des milieux spécifiques. Il existe des milieux solides (LJ) et des milieux
liquides (MGIT, Le milieu de Middlebrook). Dans le milieu de Middlebrook la croissance des
mycobactéries provoque la dégradation de l’acide palmitique marqué, ce qui va libérer du
dioxyde de carbone radioactif. Ce dégagement est apprécié par un automate. Dans le milieu
MGIT la croissance est signalée par l’apparition d’une fluorescence sous l’effet de la réduction
du taux de dioxygène contenu dans le milieu. A partir des milieux liquides, il faut effectuer une
subculture pour obtenir des colonies. La culture sur milieu solide de LJ nécessite que les
prélèvements non stériles soient décontaminés pour en éliminer la flore commensale avant
l’ensemencement sur les milieux. Pour la décontamination, on utilise généralement le KOH pour
fluidifier l’échantillon et le NaOH pour éliminer la flore commensale et conserver un nombre
suffisant de BAAR viables. Les cultures sont incubées pendant plusieurs semaines. Les cultures
positives feront l’objet d’une identification.
Pour identifier les mycobactéries, les caractères biochimiques sont étudiés sur des cultures
positives. La démarche consiste à faire un frottis des produits de culture et à confirmer la
présence de BAAR après coloration de Ziehl Neelsen. Ensuite à rechercher la présence des
caractères comme la production de l’acide nicotinique, l’uréase, la catalase. Cette identification
tient compte des délais d’apparition, des morphologies des colonies et de la production des
pigments, ou pas. L’inconvénient de cette technique est son délai prolongé et son manque de
spécificité. A côté de l’identification biochimique, il y a les tests immunochromatographiques

12
basés sur les Antigènes spécifiques des espèces de mycobactéries. Parmi ces tests il y a le SD
Bioline TB Ag MPT 64 qui a été évalué et actuellement recommandé par l’OMS pour réduire le
délai d’identification après les cultures (Fabre M., 2010).

V. Diagnostic moléculaire par la Polymerase Chain Reaction (PCR)

Les techniques de diagnostic moléculaire des mycobactéries existent. Ces tests moléculaires
utilisent la détection d’un fragment d’ADN spécifique qui permet de différencier les espèces de
mycobactéries présentent dans un produit pathologique ou à partir d’une culture. Le test Xpert
MTB/RIF est recommandé par l’OMS pour l’identification des MTB et la détermination de la
résistance à la rifampicine.

13
Deuxième partie : Notre étude
Chapitre I : Matériels et méthode
I. Matériels

1. Cadre de l’étude
Notre étude a eu pour cadre le Centre Hospitalier Universitaire Souro Sanou (CHUSS) de Bobo-
Dioulasso. La situation géographique et les caractéristiques socio-économiques de la ville de
Bobo-Dioulasso lui confèrent une position de ville carrefour et cosmopolite, favorisant ainsi
l’expansion de nombreuses pathologies infectieuses.
Le CHUSS est un hôpital universitaire de niveau 1 dans la pyramide sanitaire à l’instar du Centre
Hospitalier Universitaire Yalgado Ouédraogo (CHU-YO) et du Centre Hospitalier Universitaire
Charles De Gaulle (CHU-CDG). Il constitue le dernier niveau de référence des régions sanitaires
des Hauts Bassins, des Cascades, de la boucle du Mouhoun et du Sud-ouest.
Sur le plan médical, la structure est organisée en départements (Pédiatrie, Médecine, Maternité,
Laboratoires, Pharmacie et chirurgie).
Le département des laboratoires est organisé en plusieurs services :
Accueil-prélèvement, Biochimie, Hématologie-Immunologie, Bactériologie-virologie, le service
d’anatomie et cytologie pathologique et la Parasitologie-Mycologie.
Nous avons effectué notre étude dans le service de bactériologie-virologie précisément dans
l’unité de mycobactériologie où sont réalisées toutes les étapes des analyses.
Il s’agit d’une étude prospective et descriptive qui s’est déroulée de Mars à Septembre 20016
correspondant à une durée de sept (07) mois.

2. Type d’étude et période d’étude

Il s’agissait d’une étude prospective transversale qui a duré 7 mois : Les échantillons des patients
inclus dans l’étude ont été collectés de mars à septembre 2016.

3. Echantillonnage
Nous avons effectué un échantillonnage non probabiliste. Il s’est fait par commodité

4. Population d’étude
Trois cents patients soumis au dépistage de la tuberculose ont participé à l’étude

14
 5. Critères d’inclusions
Nous avons inclus dans notre étude les personnes qui ont accepté participer à l’enquête.

6. Critères de non inclusions

Nous n’avons pas inclus les personnes qui n’ont pas accepté participer à l’étude et ceux qui
répondaient aux critères ci-dessous :
 les personnes qui n’ont pas pu apporter un volume suffisant de prélèvement,
 les patients suivis dans autres projets d’études.

7. Aspects éthiques
En collaboration avec les prescripteurs, nous avons expliqué aux patients notre étude. Ils étaient
libres d’y participer.

8. Variable de l’étude
Les variables de l’enquête étaient :
- Caractéristiques sociodémographiques : âge, sexe
- Statut sérologique VIH ;
- Résultats de la microscopie.

II. Méthodes

1. Prélèvements
Deux cents cinquante-cinq patients (255) ont fourni des prélèvements d’origine pulmonaires
(crachats, liquide de lavage Broncho-alvéolaire), des prélèvements nasopharyngés, et des liquides
de tubages gastriques. De plus, quarante-cinq (45) patients ont fourni des prélèvements extra-
pulmonaires (selles, urines, liquide d’ascite, liquide pleural, pus et LCR). Le recueil des
prélèvements a été fait selon les recommandations du PNT.

2. Analyses au laboratoire
Les frottis ont été réalisés directement à partir des échantillons biologiques.
Les échantillons de chaque patient ont fait l’objet d’un frottis qui a ensuite été coloré au Ziehl
Neelsen selon les recommandations du PNT. Après lecture au microscope à fluorescence au
grossissement X100 à immersion, les frottis ont été tous colorés de nouveau à l’Auramine. La

15
figure 6 ci-dessous montre les étapes de confection des frottis, la fixation des frottis, les frottis en
cours de coloration et les images microscopiques d’une lame positive au Ziehl Neelsen(X100).

2. Confection de frottis
1. stérilisation de l’anse par flambage

3. Fixation des frottis

4. Coloration de Ziehl en cours

5. Image des BAAR sur fonds bleu

Figure 6 : Confection des frottis, coloration au Ziehl et image des BAAR au X100

3. Contrôles de qualité internes

Le contrôle de qualité de la Microscopie a consisté à introduire dans chaque série de coloration
un témoin positif et un témoin négatif.

16
1. Analyses statistique des données
A partir des données enregistrées dans un registre élaboré à cet effet, une base de données a
ensuite été réalisée à l’aide du tableur Microsoft Excel version 2010. Ces données ont été
importées et analysées sur le logiciel Epi info7. Les valeurs intrinsèques de l’Auramine ont été
calculées : la sensibilité, la spécificité, la valeur prédictive positive (VPP) et la valeur prédictive
négative (VPN) ont été déterminées selon les méthodes citées par (référence de la littérature)

La sensibilité (Se) est l’aptitude d’un test à détecter tous ceux atteints de la maladie dans la
population dépistée. Elle s’exprime en proportion (ou en %) des malades chez lesquels le test a
donné un résultat positif.

La spécificité (Sp) est l’aptitude d’un test à identifier correctement ceux qui sont indemnes de la
maladie dans la population dépistée. Elle s’exprime en proportion (ou en %) des non malades
chez lesquels le test a donné un résultat négatif

La valeur prédictive positive (VPP) exprime la proportion (ou le %) des malades parmi les
individus dont le résultat du test diagnostique est positif. Elle mesure la probabilité d’avoir la
maladie parmi ceux dont le résultat du test est positif.

La valeur prédictive négative (VPN) exprime la proportion (ou le %) de non malades parmi les
individus dont le résultat du test diagnostique est négatif. Elle mesure la probabilité de ne pas
avoir la maladie parmi ceux dont le résultat du test est négatif. Le tableau I illustre le calcul de
ces deux mesures.

17
Tableau I: Détermination des valeurs intrinsèques dans un dépistage/diagnostic

Maladie Présence Absence

Test
Positif a b
Négatif c d

Sensibilité (Se) = a/ (a + c) ;
Spécificité (Sp) = d/ (d + b)
Valeur prédictive positive(VPP) = a/ (a + b) ;
Valeur prédictive négative(VPN) = d/ (d + c)

18
Chapitre II : Résultats
 I. Les caractéristiques sociodémographiques des patients de l’étude

1. L’âge
L’effectif de notre population d’étude était constitué de 300 patients. L’âge médian était de 35
ans avec des extrêmes de 2 mois et de 87 ans. La tranche d’âge la plus représentée était celle de
20 à 40 ans avec 109 représentations soit 36,33%.

2. Le sexe
Dans notre population d’étude, 172 individus étaient de sexe masculin soit 57,33% ;128
individus étaient de sexe féminin soit 42,67%. Le sexe- ratio était de 1,34 (Tableau 2).

Tableau 2 : La population d’étude repartis selon le sexe

Sexe Effectif Pourcentage

M 172 57.33
F 128 42.67

Total 300 100.00

II. Les données biologiques

1. Le statut sérologique VIH des patients

L’accès aux informations sur la sérologie VIH des patients était difficile. Nous avons décidé de
nous intéresser uniquement à la sérologie du patient qui sera potentiellement positifs à la TB.

2. Les résultats bactériologiques

 Microscopie au Ziehl Neelsen
La microscopie a été réalisée sur les échantillons fournis par les 300 patients.
498 lames ont été lues au microscope classique après leur coloration au Ziehl Neelsen. 40 lames
ont été lues positives et 458 lames lues négatives.
Le nombre des patients positifs était 24 soit un taux de 8% et celui des patients négatifs était 276
soit un taux de 92% (Tableau 3).

19
Tableau 3 : Résultats de l’observation microscopique du Ziehl Neelsen

Microscopie Effectifs Pourcentages

Positif 24 8%

Négatif 276 92%

300 100%
Total

 Répartition des résultats selon l’âge, le sexe, la sérologie VIH

- Parmi les 24 cas positifs au Ziehl Neelsen 15 étaient de sexe masculins soit 62,5% et 9 étaient
de sexe féminins soit 37,5%.
- La tranche d’Age la plus représentée est celle de la population active, l’Age médian est
estimé à 37 ans, 14 cas positif ont entre 20 et 40 ans. Pas d’enfants détectés ; les extrêmes
étaient de 18 à 56 ans (Tableau 4).
- 26 patients avaient leurs statut sérologique VIH connu et documenté, 4 étaient positifs au
VIH parmi eux 3 étaient positifs au Ziehl Neelsen.

20
Tableau 4 : Résultats du Ziehl Neelsen repartis selon l’âge et le sexe.

AGE SEXE TOTAL %

Masculin Féminin

< 1an 0 0 0 0
1-4 ans 0 0 0 0
5-9 ans 0 0 0 0
10-15 ans 0 0 0 0
16-20 2 1 3 12,5
21-25 0 1 1 04,16
26-30 2 3 5 20,8
31-35 2 1 3 12,5
36-40 2 0 2 08,3
41-45 1 1 2 08,3
46-50 1 2 3 12,5
>50 4 1 5 20,8
Total 15 9 24 100
% 62,5 37,5 100

 Microscopie à l’Auramine
Les 498 lames lues au microscope classique ont été toutes lues au microscope à fluorescence
après leur coloration à l’Auramine.
52 lames ont été lues positives, 382 lames ont été lues négatives.
32 patients étaient positifs et 215 patients négatifs soit un taux de diagnostic de 10,66% (Tableau
5).

21
Tableau 5 : Résultats de l’observation microscopique de l'Auramine

Microscopie Effectifs Pourcentages

Positif 32 10,66%

Négatif 215 71,67%

300 100%
Total

22
  Répartition des résultats selon l’âge, le sexe, la sérologie VIH
- Parmi les 32 cas positifs à l’Auramine 23 étaient de sexe masculins soit 71,9% et 9 étaient de
sexe féminins soit 28,1%.
- La tranche d’Age la plus représentée est celle de la population active, l’Age médian est
estimé à 35 ans, 14 cas positifs ont entre 20 et 40 ans. 2 patients positifs étaient des enfants
(Tableau 6).
- 26 avaient leurs sérologie VIH connue et documentée, 4 étaient positifs et au VIH et a
l’Auramine.
Tableau 6 : Répartition des cas positifs à l'Auramine selon l’âge et le sexe

AGE SEXE TOTAL %

Masculin Féminin

< 1an 0 0 0 0
1-4 ans 0 0 0 0
5-9 ans 0 0 0 0
10-15 ans 1 1 2 06,26
16-20 4 0 4 12,52
21-25 0 1 1 03,13
26-30 3 2 5 15,65
31-35 3 1 4 12,52
36-40 3 0 3 09,39
41-45 2 1 3 09,39
46-50 1 2 3 09,39
>50 6 1 7 21,91
Total 23 9 32 100
% 71,9 28,1 100

23
  Les valeurs intrinsèques de l’Auramine
En prenant le Ziehl Neelsen comme technique de base (gold standard), les valeurs intrinsèques de
l’Auramine ont été calculées en faisant le tableau 2X2(Tableau 7) :

Tableau 7 : Détermination des valeurs intrinsèques de l'Auramine

Ziehl Neelsen
Auramine N P

N 268 0
P 8 24

Soit a = 24 ; b =8 ; c =0 ; d =268

Sensibilité (Se) = a/ (a + c) ; Spécificité (Sp) = d/ (d + b) ; VPP = a/ (a + b) ; VPN= d/ (d + c)

Ainsi, à partir des résultats, les caractéristiques de la coloration à l’Auramine ont montré une
sensibilité Se de 100% et une spécificité Sp de 97%. Une valeurs prédictive positive VPP de 75%
et une valeur prédictive négative VPN de 100%.

24
Discussion

25
 I. Les résultats de notre étude

Notre population d’étude comprenait 300 patients dont 57,33% de sujets de sexe masculin soit un
sex-ratio de 1,34. Cette prédominance masculine semble être liée aux différences d’exposition
entre les sujets de sexe masculin et les sujets de sexe féminin dans leur rôle sociétal. Dans la
société Burkinabé, comme d’autres sociétés africaines, les individus de sexe masculin occupent
différents secteurs d’activité qui pourraient les exposer plus à la tuberculose. Le même constat a
été fait par différents auteurs au Burkina Faso : Sangaré et al avec un pourcentage de
68% (Sangare L., 2010), Zida et al avec une fréquence de 71,2% (Zida S., 2014). Des
observations similaires ont aussi été rapportés par : Dubiley en Russie avec une proportion de
85,1% (Dubiley S., 2010), Bonura en Italie avec un sexe-ratio de 2,06 (Bonura C., 2014).
L’âge médian des 300 patients de notre population était 35 ans, avec des extrêmes allant de 2
mois à 87 ans. La tranche d’âge de 20 à 40 ans était la plus représentée soit 36,33%. Zida et al
dans leur étude sur l’état des lieux des mycobactérioses au Burkina Faso en 2014 avaient aussi
retrouvé une fréquence plus élevée de cette tranche d’âge (Zida S., 2014).
Nos résultats pourraient s’expliquer par le fait que la population burkinabé est à majorité jeune.
Le taux de confirmation à l’examen microscopique des frottis colorés au Ziehl Neelsen était de
8% et celui de l’Auramine était de 10,66% soit une différence de 2,66%. L’Auramine a un taux
de détection plus élevés que le Ziehl Neelsen. Sawadogo et al ont aussi montré dans leur étude
que l’Auramine avait un taux de détection plus élevés que le Ziehl Neelsen. Ils ont trouvé une
différence de 3,9% (Sawadogo T. L., 2012).
Le sexe a été représentatif pour les deux examens. Le sexe le plus atteint par la tuberculose est le
sexe masculin 62,5% pour le Ziehl Neelsen et 71,9% pour l’Auramine. Deux fois plus de cas de
tuberculose sont notifiés chez les hommes que chez les femmes dans les pays en voie de
développement ; ceci étant dû en partie aux fait que les hommes sont plus mobil que les femmes.
La tranche d’âge la plus touchée dans les deux examens est celle de la population active. 14
patients positifs ont entre 20 et 40 ans. L’âge médian pour les deux tests était presque identique
37ans et 35 ans. L’exposition de la population active pourrait être due à son activité quotidienne
dans la vie.

25
Contrairement au Ziehl Neelsen, l’Auramine possède une sensibilité de détection plus élevée
chez les enfants et les PV-VIH ; deux échantillons provenant d’enfants patients ont été révélés
positifs à l’Auramine.
Aussi parmi les 4 patients positifs au VIH, 3 ont été révélés TB positif au Ziehl Neelsen tandis
que les 4 ont été révélés TB positif à l’Auramine.
Les patients positifs au VIH ont des difficultés à expectorer. Les échantillons qu’ils procurent
sont moins chargés en BAAR. Néanmoins l’Auramine par sa sensibilité élevée arrive à détecter le
peu de BAAR que contiennent ces échantillons.
Les performances de l’Auramine ont été évaluées en comparaison à celles du Ziehl Neelsen
utilisées comme référence. Les caractéristiques de la coloration à l’Auramine ont montré une
excellente sensibilité 100% (absence de faux négatifs), avec une proportion de 2,9% de faux
positifs. En effet, selon des travaux antérieurs menés au Pérou, et ayant utilisé la culture comme
technique de référence, la coloration à l’Auramine s’est révélée plus sensible que celle du Ziehl-
Neelsen (Van Deun A., 2008).
La charge bacillaire chez les 2,9% de faux positifs était de 20 BAAR au minimum pour 100
champs microscopiques lus ; donc ces faux positifs pourraient en réalité être de vrais positifs.
La valeur prédictive positive de la coloration à l’Auramine est faible (75%), lorsqu’on la compare
à la coloration au Ziehl-Neelsen. Dans une étude menée au Kenya, 92 % des cas à culture
positive ont été identifiés, aussi bien par la coloration au Ziehl-Neelsen que par celle à
l’Auramine, aux premiers, deuxièmes et troisièmes échantillons (Kivihya-Ndugga LE., 2003).
Des résultats similaires aux notre ont été aussi rapportés par Sawadogo et al ; la sensibilité de
l’Auramine était également de 100% et sa spécificité de 95,6%. Les valeurs prédictives positives
et négatives étaient respectivement de 75,7% et de 100% (Sawadogo T. L., 2012).
Selon nos résultats, la coloration à l’Auramine s’est révélée plus sensible que celle du Ziehl
Neelsen. Cela suggère de mettre à profit la sensibilité de cette coloration pour une meilleure
détection des cas de tuberculose au Burkina Faso.

26
 II. Limite de l’étude

Nous avons réalisé une enquête analytique descriptive. Les inclusions ont été faites dans le cadre
des activités de dépistage et de suivi de routine des patients suspects de tuberculose. Certains
patients ont bénéficié de prélèvements de crachats salivaires. Les prélèvements de volume
insuffisant pour la microscopie n’ont pu faire partie de l’étude, limitant ainsi les possibilités
d’inclusion. L’état de santé de certains patients ne leur permettait pas de collecter deux
échantillons de crachats ; l’échantillon fourni était donc inclus dans l’étude car chaque patient
était un cas suspect de tuberculose.
D’autre part nous avons rencontré des difficultés pour disposer des renseignements cliniques
(statut sérologique par rapport au VIH) qui auraient permis de mieux analyser les résultats.
Malgré ces limites, les résultats de notre étude gardent une valeur scientifique.

27
Conclusion
La Tuberculose reste un problème majeur de santé publique au Burkina Faso. Malheureusement
on assiste chaque année à une sous détection de cette maladie. La technique communément
utilisée pour le diagnostic de la TB est la microscopie au Ziehl Neelsen qui possède une
sensibilité réduite pour détecter les BAAR. L’Auramine est la technique alternative pour
l’augmentation de la sensibilité promue par l’OMS. Cette étude démontre l’efficacité de cette
technique dans le diagnostic de la TB. Sur un total de 300 patients, 32 cas de TB soit un taux de
10,66% contre 24 cas (soit 8% au Ziehl Neelsen) ont été diagnostiqués grâce à l’Auramine.
Les valeurs intrinsèques de l’Auramine ont été calculées et ont montré que l’Auramine est plus
sensible que le Ziehl Neelsen dans la détection des BAAR pour le diagnostic de la TB. Cette
étude a apporté à la suite d’études similaires précédentes menées par le PNT des preuves récentes
et objectives sur l’importance de l’Auramine dans le diagnostic microscopique de la tuberculose.
Mieux elle a démontré que cette technique doit être vulgarisée dans l’objectif d’améliorer le
diagnostic de la TB.
En somme, cette étude a montré que la tuberculose est une réalité au Burkina Faso et des mesures
urgentes s’imposent pour la diagnostiquer et freiner sa dissémination.

28
Perspectives
Le coût moyen d’un microscope à lumière blanche est d’environ 1 400 000 francs CFA, contre
environ 3 000 000 FCFA pour un microscope à fluorescence. Considérant l’efficacité de la
Coloration à l’Auramine, et l’appui que peuvent apporter différents partenaires, tels que le Fonds
mondial, ce coût relativement plus élevé ne doit pas limiter l’accès au microscope
à fluorescence des pays en voie de développement comme le Burkina Faso.
En outre, des travaux antérieurs ont montré que la transformation d’un microscope standard, par
modification de son éclairage, par exemple en l’équipant d’une « Royal Blue » LuxeonTM light
emetting diode (LED), peut minimiser le cout et la consommation électrique et permettre une
lecture en fluorescence des frottis d’expectoration [10, 11].

29
Recommandations
Au terme de notre enquête et des constats qui en ressortent nous formulons les recommandations
suivantes dans le souci d’améliorer la détection microscopique des cas positifs de tuberculose :
A l’endroit du ministère de la santé
Promouvoir une sensibilisation à l’échelle nationale pour mieux informer les populations afin
qu’elles puissent se rendre dans les centres de santé en cas de toux chroniques.
A l’endroit du Programme National Tuberculose
En tant que structure de coordination, le PNT devrait doter les laboratoires de plateaux techniques
à même de réaliser la microscopie à l’Auramine en première intention suivie de celle au Ziehl
Neelsen.
A l’endroit de la Direction régionale des Hauts Bassins
L’unité de mycobactériologie du CHUSS dispose d’un plateau qui pourrait répondre aux besoins
de surveillance bactériologique de la tuberculose de toute la région des Hauts-Bassins s’il est
renforcé. La mise en place une stratégie commune pourrait aider à cela.
A l’endroit des agents de santé
Veiller au renforcement des stratégies de diagnostic, de traitements et de suivis des patients.
Demander la culture devant une forte suspicion de tuberculose à Bacilloscopie négative
Devant un cas de tuberculose confirmé, déterminer systématique la sérologie VIH.

30
Bibliographie

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