REPUBLIQUE ALGERIENNE DEMOCRATIQUE ET POPULAIRE

MINISTERE DE L’ENSEIGNEMENT SUPERIEUR ET DE LA RECHERCHE

SCIENTIFIQUE
UNIVERSITE SAAD DAHLAB –BLIDA 1

FACULTE DE TECHNOLOGIE
DEPARTEMENT DE GENIE DES PROCEDE

Spécialité: Pharmacie Industrielle

Mémoire de fin d’études

En vue de l’obtention du diplôme de :

Master Professionnel

Intitulée

Formulation de microparticules et d’un

émulgel à base d’huile essentielle d’intérêt
thérapeutique.

Session juillet 2023

Présenté par :

Melle SELMOUNE Saida Encadré par : Mme AYACHI Nabila

Melle ZANE Chaima

Membres de Jury:

Président : M Boutoumi

Examinatrice : Mme Brahim

Année universitaire : 2022-2023

 Remerciements

Nous remercions tout d’abord ‘‘Allah’’ le tout puissant de nous avoir donné la force et la
patience, la santé et la volonté pour réaliser ce modeste travail.

On tient à remercier très sincèrement notre promoteur Mm AYACHI Nabila, Professeur à

l’université de Blida 1, faculté de médecine, pour l’honneur qu’elle nous a fait en dirigeant
cette recherche, et pour son infinie gentillesse et encouragement, sa grande disponibilité
constante. Permettez-nous d’exprimer nos profondes gratitudes et notre estime pour nous
avoir fait bénéficier de son expérience, sa rigueur scientifique, et surtout ses orientations,
aussi bien pour l’ambiance sympathique qu’elle a créé et sa précieuse aide tout au long la
période et de mettre à notre disposition tous les moyens nécessaires et de nous guider pour la
réussite de cet humble travail. On a la chance d’être l’un de ses étudiants auprès d’un
professeur de talent et d’une grande compétence et professionnalisme, elle nous a permis de
profiter de l’étendue de sa connaissances.

De même, on remercie également l'ensemble de l'équipe du Laboratoire de recherche de

l'Université de Saad Dahleb Blida 1 qui nous a bien accueilli, ça a été un vrai honneur de
travailler au sein de cette équipe dans un environnement dynamique et sérieux et le CRD
SAIDAL qui nous a prêté main forte pour l’accomplissement de ce thème.

Enfin, nous aimerons remercier l’ensemble des enseignants de Département de Génie des

Procédés, surtout qui ont contribué à ce travail.

À tous ceux et celles qui nous ont aidés de près ou de loin, par un geste, une parole, ou un
conseil, on leur dit merci infiniment.
 Tout d’abord, je tiens à remercier mon dieu ALLAH , le tout puissant, miséricordieux,

que je dois la réalisation et la réussite de cet humble travail qui vient décorer cinq ans de

volonté,de passion, et d’effort incontestable

Je dédie ce Mémoire

A ceux qui donnent un sens à mon existence, à la lumière de mes yeux en témoignage de
votreaffection et de votre amour, pour votre patience et votre soutien pendant tous les
moments que j’ai traversé.

A ma très chère mère et A mon très cher père

à la sens de l’amour GHAOUI EMEL et celui dont je porte le nom avec fierté BADER EDDINE

Ce travail est le résultat des efforts et des sacrifices que vous avez fournis pour mon
éducation et durant toute une formation. Aucune dédicace ne saurait exprimer l’estime,
le dévouement, le respect et l’amour que je porte pour vous. Je vous dédie ce travail en
priant ALLAH le tout puissant de vous procurer santé, bonheur et longue vie.

A mes chers sœurs, Tamani , Fatma , Wahida et Zina ma belle chouchou - qui m'ont

toujours soutenu.

A mes amis Asma , Samah et Amel

A mon cher binôme chaima et à toute sa famille

A tous ceux qui ont pris place dans mon cœur et à tous ceux qui m’ont aidé de près ou de loin.

Imene
Le voyage est terminé, ce n’était pas facile et ce n’est pas censé l’être, et peu importe combien
de temps il dure, il ira avec son doux et amer, et me voici maintenant, avec l’aide de Dieu
Tout-Puissant, en train d’achever ce travail.

Je dédie ce travail aux deux morceaux de mon âme

Papa et maman

À mon héros celui qui m’a élevé et qui était toujours là quand j'avais besoin de lui, à la lampe
qui a illuminé mon chemin, et à celui dont je porte le nom avec fierté, je demande à Dieu de
prolonger ta vie pour que tu puisses me voir une femme réussie comme tu en rêvais

Tes paroles resteront des étoiles pour me guider aujourd’hui, demain et pour toujours. Mon
cher papa AZEDINNE.

À ma première idole et au sens de l’amour, au sourire de la vie et au secret de l’existence, à

celle dont ses prières ont été le secret de mon succès, à celle qui m’a guidé et accompagné
dans tous les domaines de ma vie, et le fait encore jusqu’à présent, que Dieu te protège et te
bénisse avec le pardon et le bien-être. Ma chère maman HAMOUDI FATIMA ZOHRA

À mes chères sœurs, le sens du soutien, de l’amour et la gentillesse Imene, Khadîdja, Fethia,
Yasmine et Zineb, à ceux qui ont donné le gout de la douceur à ma vie mes neveux Azzou et
Yacine

A mon cher binôme saida et à toute sa famille

A tous ceux qui ont pris place dans mon cœur et à tous ceux qui m’ont aidé de près ou de loin.

Chaima
 Résumé :

Le présent travail concerne la formulation de deux formes galéniques : un émulgel et des

microcapsules à libération prolongée en vue d’encapsuler une huile essentielle de thym Thymus
vulgaris appartenant à la famille des lamiacées. La technique de microencapsulation a été
réalisée selon la méthode d’émulsification et réticulation par les ions calcium moyennant le
polymère alginate de sodium.. Les microcapsules obtenue étaient de forme sphérique et une la
libération du principe actif (HE de Thymus vulgaris) de type prolongé s’étalant sur six heures.
En ce qui concerne l’émulgel, il a été préparé en deux étapes, la première consiste de préparer
une émulsion de l’HE de type hydrophile /lipophile (H/L) ensuite la dispersion de cette émulsion
dans un gel de Carbopol à différentes concentrations . Les formulations d’émulgel obtenues ont
été par la suite caractérisées sur le plan physico-chimique, rhéologique et microbiologique.

Abstract :

The present work concerns the formulation of two dosage forms: an emulgel and extended-
release microcapsules to encapsulate an essential oil of thyme (Thymus vulgaris belonging to the
Lamiaceae family. The microencapsulation technique was carried out according to the method of
emulsification and crosslinking by calcium ions using the sodium alginate polymer. The
microcapsules obtained were spherical in shape and a release of the active ingredient (EO of
Thymus vulgaris ) of prolonged type spread over six hours. Regarding the emulgel, it was
prepared in two steps, the first consists in preparing an emulsion of the EO of hydrophilic /
lipophilic type (H / L) then the dispersion of this emulsion in a Carbopol gel at different
concentrations. The emulgel formulations obtained were subsequently characterized physico-
chemically, rheological and microbiologically .

: ‫ملخص‬

‫ مستحلب وكبسوالت دقيقة ممتدة اإلطالق لتغليف زيت أساسي لنبتة الزعيترة‬:‫يتعلق العمل الحالي بصياغة شكلين من الجرعات‬
‫ تم تنفيذ تقنية الكبسلة الدقيقة وفقا لطريقة االستحالب والتشابك بواسطة أيونات‬. ‫(تيموس فيلغاريس) ينتمي إلى عائلة المياس‬
‫ كانت الكبسوالت الدقيقة التي تم الحصول عليها كروية الشكل وإطالق العنصر‬.‫الكالسيوم و باستخدام بوليمر ألجينات الصوديوم‬
، ‫ فيما يتعلق بالمستحلب‬.‫النشط ( لزيت الزعيترة االساسي تيموس فيلغاريس) من النوع المطول المنتشر على مدى ست ساعات‬
‫ المحبة للدهون من‬/ ‫ األولى تتمثل في تحضير مستحلب من الزيت االساسي من النوع المحب للماء‬، ‫تم تحضيره على خطوتين‬
‫ تم تمييز تركيبات جال المستحلب التي تم الحصول عليها في وقت‬.‫ثم تشتيت هذا المستحلب في هالم كاربوبول بتركيزات مختلفة‬
. ‫الحق فيزيائيا وكيميائيا وريولوجيا وميكروبيول‬
 Sommaire
Listes des figures
Liste des tableaux
Liste des abréviations
Introduction Générale..................................................................................................................................1
Synthèse bibliographique
Chapitre I : les formulations galéniques
I. Microencapsulation et microparticules .................................................................................... 3
I 1. Définition de la microencapsulation ................................................................................. 3
I 2. Intérêt de la microencapsulation ....................................................................................... 3
I 3. Caractérisations des microcapsules ................................................................................... 4
A- Taille .................................................................................................................................... 5
B- Structure interne .................................................................................................................. 5
I .4. Techniques de la microencapsulation ............................................................................... 6
A- En fonction de la nature du support de dispersion… ........................................................ 6
B- En fonction de la nature du processus ............................................................................... 6
I .5. Matière première principale utilisée dans la microencapsulation ..................................... 8
I 5.1 Alginate de sodium ................................................................................................... 8
5.1.1 Les propriétés des gels d’alginates .......................................................................... 9
5.1.2 Structure générale d’alginate ................................................................................... 9
5.1.3 Mécanisme de gélification ..................................................................................... 10
5.1.4 Sources de l’alginate de sodium ............................................................................ 11
5.1.5 .Domaines d’applications ..................................................................................... 11
II. Emulgel ........................................................................................................................... 12
. II.1 .Définition ................................................................................................................ 12
II.2 .Intérêt de l’émulgel ................................................................................................. 12
II.3 .Formulation ............................................................................................................. 13
II.4 .Caractérisation des émulgels ................................................................................... 14
Chapitre II : plantes médicinales et huiles essentielles
II .1. Généralité sur les plantes médicinales ..................................................................................... 16
II .2 Définition des huiles essentielles............................................................................................... 16
II .3 utilisations des huiles essentielles.............................................................................................. 16
II .4. Constituants chimiques des huiles essentielles......................................................................... 17
II .5. Méthodes d’extraction des huiles essentielles .......................................................................... 18
II .6. Thymus vulgaris ...................................................................................................................... 19
6.1 Description du Thymus vulgaris ........................................................................................ 19
6.2 Nom commun .................................................................................................................... 19
6.3 Classification de Thymus vulgaris...................................................................................... 20
6.4 Utilisations de thymus vulgaris .......................................................................................... 20
6.5 Propriétés de l’huile essentielle de Thymus vulgaris.......................................................... 21
6.6 Composition chimique de Thymus vulgaris ....................................................................... 22
Etude expérimentale ........................................................................................................................ 23
Chapitre III : Matériels et méthodes
1. Matériels ........................................................................................................................................ 23
1.1 Matières premières ..................................................................................................................... 23
A. présentation des matières premières utilisées........................................................................... 23
B. Propriétés physicochimiques des matières premières ............................................................... 25
C. Les équipements ....................................................................................................................... 26
D. Matériels biologiques ............................................................................................................... 26
2. Méthodes ...................................................................................................................................... 27
2.1 Caractérisation de l’huile essentielle....................................................................................... 27
2.1.1 Identification par spectroscopie infrarouge ......................................................................... 27
2.1.2 Caractérisation de l’huile essentielle de Thymus vulgaris par spectroscopie UV-
Visible ........................................................................................................................................... 27

2.1.3 Etude de l’activité antioxydante par le radical DPPH ......................................................... 29

2.1.4 Etude de l’ativité antimicrobienne et antifongique de l’huile essentielle............................ 31

2.2. Méthodes de formulation.......................................................................................................... 32

2 .2.1 Formulation des microparticules ....................................................................................... 32
 2.2.1.1 Les essais de pré-formulation .................................................................................. 32
2.2.1.2 Les essais de formulation ........................................................................................ 34
2.2.2 Procède de préparation de l’émulgel 0,5% et 1%............................................................. 36

2.3 Méthodes de caractérisation ..................................................................................................... 37

2.3.1 Caractéristiques de l’huile essentielle de Thymus vulgaris................................................ 37

2.3.1.1 Identification par spectroscopie infrarouge .................................................................... 37

2.3.1.2 Caractérisation de l’HE du Thymus vulgaris par spectroscopie UV-Visible.................. 37
2.3.2 Caractérisations des microparticules ................................................................................... 38

2.3.2.1. Le rendement ............................................................................................................ 38

2.3.2.2 Caractérisation par microscopie................................................................................. 38
2.3.2.3 Caractérisation rhéologique........................................................................................ 38
2.3.2.4. Identification par spectroscopie infrarouge ............................................................... 40
2.3.2.5 Étude de libération in vitro ........................................................................................ 40
2.3.3 Caractérisations de l’émulgel .............................................................................................. 41

2.3.3.1 Caractérisation macroscopique .................................................................................... 41

2 .3.3.2 Caractérisation par microscopie .................................................................................. 41

2.3.3.3 Caractérisation physico-chimiques de l’émulgel ......................................................... 42

2.3.3.4 Caractérisation rhéologique ......................................................................................... 42
2.3.3.5 Evaluation anti macrobienne et anti- fongique d’émulgel……………………………43

CHAPITRE IV : Résultats et discussions :

1.1 Résultats de la Caractérisations de l’huile essentielle ................................................................. 44

1.1. 1 Identification par spectroscopie infrarouge ........................................................................ 44

1.2. 1 Résultats de la Caractérisations de l’huile essentielle ......................................................... 46

1.1.2 Résultats de la Caractérisation de l’huile essentielle de Thymus vulgaris par spectroscopie

UV-Visible ...................................................................................................................................... 46
1.1.3 Résultats de l’évaluation de l’activité antioxydante de l’HE par le radical
DPPH… ............................................................................................................................................. 48

1.1.4 Résultats de l’activité antimicrobienne et antifongique .......................................................... 50

1.2. Résultats de Caractérisation des formulations ............................................................... ……50

1.2.3. Résultats de la caractérisation des microparticules ..............................................................50

Détermination du rendement d’encapsulation ..................................................................... 50
1.2.1.2 Résultats de la caractérisation par microscopie optique .................................................... 51
1.2.1.3 Résultats de la caractérisation rhéologique des microparticules........................................54
1.2.1.4 Résultats de la caractérisation par spectroscopie infrarouge ............................................. 56
1.2.1.5 Résultats de l’étude de libération in vitro ......................................................................... 60
1.3 Résultats des caractérisations de l’émulgel ............................................................................61
1.2.5 Résultats de la caractérisation macroscopique .....................................................................62
1.2.3 Résultats de la caractérisation physico-chimiques ............................................................... 63
1.3.3 Résultats de la caractérisation rhéologique ........................................................................... 64

1.3.4 Résultats de l’évaluation des activités anti microbienne et antifongique ............................ 64

Conclusion Générale…. ........................................................................................................... 67

 Liste des figures

Figure 1. Intérêts de la microencapsulation………………………………………………………...4

Figure 2. Morphologie des microparticules et section longitudinale, sous le microscope

électronique à balayage .................................................................................................................... 5

Figure 3. Macrocystis pyrifera (a) ; Laminaria hyperborea (b) et Laminaria digitata (c) .............. 8

Figure 4. Caractéristiques structurelles des alginates : (A) monomères d'alginate, (B) structure
chimique desmonomères ,(C)chaîne conformation et(D) distributiondeblocs .................................10

Figure 5. Représentation de la structure en « egg box » et de la dimérisation entre Ca2+(cercles

vides) et les atomes d'oxygène (cercles pleins) dans les blocs G
…………………………………………….......……………………………………………….........11
Figure 6. Schéma des domaines d’application de la microencapsulation ....................................... 12

Figure 7. Schéma général de formulation des émulgels ................................................................... 14

Figure 8 . Déférentes parties du Thymus vulgaris (branches en fleurs ;fleur feuilles,) .................... 19

Figure 9.Les solutions de Thymus vulgaris préparées à déférant concentration (identifier) ............ 29

Figure 10. Solution de DPPH ........................................................................................................... 30

Figure 11. Schéma représente le procédé de formulation des microcapsules .................................. 35

Figure12 : Schéma représente le procède de préparation de l'émulgel ............................................ 36

Figure 13. Les microcapsules en dissolutest pendant 30min jusqu'à 6h ...................................... 40

Figure 14. L’emulgel (1% - 2 %) centrifugé ................................................................................... 42

Figure 15. Spectre d’absorption de l’HE de Thymus vulgaris dans l’UV-Vis....................................45

Figure16.. Courbe détalonnage de Thymus vulgaris en fonction de la concentration........................46
Figure 17 . Variation de la couleur de DPPH à différentes concentrations de Thymus
vulgaris.........................................................................................................................................................47
Figure18. Pourcentage d’inhibition de DPPH de Thymus vulgaris en fonction de la
concentratio .................................................................................................................................... 48
Figure 19. Détermination d’IC50 de Thymus vulgaris .................................................................. 49
Figure 20 .Courbe de viscoélasticité d’un essai type 3% ............................................................. 49

Figure 21. La solution polymérique 3% dans l’eau ce microscope G*10 ................................ 51

Figure 22. la dispersion de HET dans L’émulsion (essai préliminaire 3% ) ce microscope
G*40 ............................................................................................................................................... 51
Figure 23. Courbe d’écoulement D’un assai type ( 2%) .............................................................. 54
Figure 24 . Courbe de viscoélasticité des microparticules d’un essai type (2%).......................... 55

Figure 25. Le spectre infrarouge de l’alginate de sodium ............................................................ 56

Figure 26.. Spectre IR des Microparticules de la formule 4 entre 450 et 4000 ............................ 58
Figure27 . Le pourcentage de dissolution des formulations à ph 1.2… ....................................... 59
Fégure24. Le pourcentage de dissolution 6.8… ............................................................................ 60
Figure28 . Emulgel à base de l’HE de Thymus vulgaris 0.5% ................................................... 61
Figure 29 . Grossissement ×4. ...................................................................................................... 61

Figure 30 . Grossissement ×10… .................................................................................................. 61

Figure 31 . Résultat de test de centrifugation des deux formules de l’émulgel ..............................62

Figure 32 . courbe de la viscoélasticité des emlgels ......................................................................62
Figure 33. Mesurer le PH pour les deux formules de l’émulgel préparés à base de Thymus
vulgaris .......................................................................................................................................... 63
Figure 34. Résultat de test de centrifugation des deux formules de l’émulgel 1%-2%
respectivement ................................................................................................................................ 63
Figure 35 . Les résultats de l’activité antimicrobienne et antifongique des émulgels obtenues .... 64
 Liste des tableaux

Tableau 1. Les propriétés des gels d’alginate........ ........................................................................9

Tableau 2. Les constituants chimiques des huiles essentielles ................................................... 17

Tableau 3. Les méthodes d’extraction des huiles essentielles ..................................................... 18

Tableau 4. La calcification de la plante Thymus vulgaris ............................................................ 20

Tableau 5. Les propriétés de Thymus vulgaris ............................................................................. 21

Tableau 6. La composition chimique des majeurs composants de Thymus vulgaris .................. 22

Tableau 7. Les matières premières utilisées et leurs rôles ........................................................... 24

Tableau 8. Les propriétés physico-chimiques des matières premières ........................................ 25

Tableau 9. Liste des équipements de préparation et de contrôle ................................................. 26

Tableau 10. Les souches microbiennes utilisées ......................................................................... 27

Tableau 11. Les Matières Premières utilisées dans la formulation des microparticules .............. 32

Tableau 12. Les procédés de la microencapsulation .................................................................... 33

Tableau 13. Matrice des essais de formulation des microparticules ............................................ 34

Tableau 14. Matrice des essais de formulation des émulgels ...................................................... 36

Tableau 15. Conditions du test de dissolution ............................................................................. 40

Tableau 16. Courbe détalonnage de huile essentiel Thymus vulgaris ......................................... 47

Tableau 17 : la valeur d’IC50 de Thymus vulgaris .................................................................... 49

Tableau 19 : Le pourcentage du rendement pour chaque formulation ........................................ 50

Tableau 20 : Les microparticules formés par la méthode directe et indirect ce microscop........52

Tableau 21 : Les microparticules formés par la méthode direct ce microscope ......................... 53

Tableau 22. Valeur de G’ et G’’ des essais .................................................................................. 53

Tableau 23. Diamètres d’inhibition en mm provoqués par le Thymus vulgaris .......................... 57

 Liste des abréviations

HE : Huile essentielle

G’ : caractérise le comportement élastique

G’’ : la partie imaginaire de G’

Uv-vis : ultraviolet-visible

ATTC : American Type Culture Collection

HET: Huile .Essentielle de Thyumus vulgaris

HL : Hydrophilic Lipophilic .

IC50 : Concentration Inhibitrice

50.PA : Principe Actif.

pH : potentiel Hydrogéne.

EP: efficacité de piégeage

SEM: Scanning Electron Microscope

TEM: Transmission Electron Microscope

 Introduction Générale

L’extrait des plantes aromatiques et médicinales ne cesse de croître en raison de la

demande croissante ainsi que de l'intérêt des consommateurs pour ces plantes à des fins
médicinales, culinaire et autres applications anthropiques. Alors que les consommateurs sont
de plus en plus informés sur les questions de santé, d'alimentation et de nutrition. Ils sont
également sensibilisés au potentiel et aux avantages des plantes aromatiques et médicinales et
de leurs métabolites. De nombreux métabolites secondaires sont produits par ces plantes (les
huiles essentielles (HE), les composés phénoliques…..) [1]

Les huiles essentielles (HE) sont des liquides volatils naturels, extraits de diverses parties
de plantes aromatiques, y compris les fleurs, les feuilles, les fruits, les graines, les bourgeons
ou les racines, les écorces et les rhizomes, Elles sont utilisées dans les domaines de la
médecine, de la conservation des aliments et arôme alimentaire depuis l'Antiquité. [2]

Ces composés volatiles sont chimiquement instables et sensibles à la détérioration

oxydative et la perte de composés volatils, en particulier lorsqu'ils sont exposés à l'oxygène, la
lumière, l’humidité et la chaleur. La qualité d'un produit enrichi avec ce type de métabolites
peut se détériorer en raison de la dégradation oxydative, la formation des goûts et des saveurs
désagréables, et la génération de radicaux libres. Ces changements ont un effet négatif sur la
stabilité au stockage, les propriétés sensorielles, et l'acceptabilité globale des produits
développé.[3]

Afin de limiter la perte de la bioactivité pendant le traitement et l’entreposage des huiles

essentielles, et pour contrôler la libération du composé au site souhaité, l'encapsulation de ces
dernières est bénéfique avant leur incorporation dans les médicaments, les aliments ou autres
produits. [4]

La microencapsulation, est une approche récente , qui consiste à emballer des

substances sous forme de micro et nanoparticules et se définit comme un procédé permettant
de piéger des agents actifs avec des matériaux enrobant. Elle consiste en l'encapsulation
d'ingrédients, de polyphénols, d'additifs volatils, de colorants, d'enzymes et bactéries pour
offrir aux produits une meilleure stabilité et éviter les pertes nutritionnelles et sanitaires.
Parallèlement, la microencapsulation facilite la transformation de liquides en poudres solides
pour la fabrication d'aliments et diminue les coûts de production. [5]

1
 L’objectif de notre travail s’articule autour de la mise en forme galénique de l’huile
essentielle de thym en deux présentations : des microparticules et un émulgel.

Les microparticules ont été formulées moyennant le polymère alginate de sodium selon
le procédé d’émulsification et réticulation par les ions calcium, cinq formulations ont été
réalisées en faisant varier les concentrations de polymère. Les microparticules ont été par la
suite caractérisées sur différents plan physico-chimique et microbiologique.

Notre manuscrit est structuré en deux parties :

-Une partie bibliographique qui comporte deux chapitres qui porteront respectivement
sur l’étude des formulations galéniques à savoir la microencapsulation et l’émulgel et un
chapitre sur les huiles essentielles et la plante médicinale à l’étude.

Et une partie expérimentale comportant deux parties, la première présente le matériel

expérimentale utilisé et les méthodes adoptées dans les différentes études, Et la deuxième
partie expose les différents résultats obtenus et leur discussion par rapport aux références issues
d’une recherche bibliographique.

Nous terminons par une conclusion et des perspectives.

2
 Chapitre I
Les formulations galéniques
 Les formulations galéniques
CHAPITRE I

I. La microencapsulation et les microparticules :

I.1 Définition de la microencapsulation :

La microencapsulation rassemble toutes les techniques qui permettent de piéger les

matériaux actifs de diverses origines (liquide, solide, gazeux ou même une cellule vivante)

dans un matériau. Ceci est l'exemple des ingrédients pharmaceutiques actifs ou des

cosmétiques, des additifs alimentaires, des produits phytosanitaires ou des essences

parfumées, en vue de leur immobilisation, leur protection, leur structuration, leur

fonctionnalisation ou contrôle, leur transport et enfin leur libération dans un environnement

prédéfini. [6].

I.2 Intérêt de la microencapsulation :

Les principaux objectifs de la microencapsulation peuvent être résumés comme suit:

 Garantir une bonne protection de la substance encapsulée: la microencapsulation est

une méthode de fabrication de particules fermées dans lesquelles le contenu est enveloppé à

l'intérieur d'un film. Elle empêche non seulement la pollution secondaire du contenu

encapsulé [7] mais aussi pour assurer la protection des ingrédients sensibles contre l'oxydation

et les effets de l'environnement externe tels que la chaleur, l'humidité ou le pH pour maintenir

le contenu stable pour une durée de vie plus longue.

 Contrôle de la libération du contenu encapsulé : La microencapsulation permet le

transfert de masse entre l'intérieur et l'extérieur d'une microcapsule via le contrôle des

propriétés physiques et chimiques de la membrane/ [7]. Elle peut être soit prolongée par

diffusion à travers la membrane, soit déclenchée par éclatement de la membrane. En cas de

diffusion, le contrôle de l'épaisseur de la membrane, de la porosité et du gradient de

concentration spécifique des molécules, permet de moduler la délivrance en continu des

3
 Les formulations galéniques
CHAPITRE I

principes encapsulés. Par contre, s'il y a éclatement, tout le contenu se déverse au même

moment [7]. C'est le phénomène de « dose dumping ».

 Facilite l'utilisation des produits liquides : La microencapsulation permet de

conditionner les produits liquides sous forme solide. Cela facilite le transport des produits

d'origine liquide [7] et réduit la perte de principes actifs volatils.

 Assurer la protection, la stabilisation d'un principe actif dans une formulation [8] et

éviter l'incompatibilité entre médicaments [9], exemple de l'astaxanthine, un céto-caroténoïde

principal encapsulé par de l'alginate pour améliorer sa stabilité [10].

 Réduire la toxicité comme ainsi que la sensibilité des personnes vis-à-vis des

matériaux et produits toxiques. [9].

Figure 1. Intérêts de la microencapsulation.[10]

4
 Les formulations galéniques
CHAPITRE I

I.3 Caractéristiques des Microparticules :

Les produits obtenus par les procédés de microencapsulation sont appelés microparticules

; aussi appelés boules ou perles. Ils diffèrent par leur taille, leur morphologie et leur structure

interne.

A. Taille :

L'encapsulation permet de produire des microparticules dont la taille est comprise entre 1μm

et 1000μm, en dessous on parlera de nanoparticules et au-delà on parlera de minigranules

[11]. Cette large gamme de tailles ainsi que la diversité des matériaux pouvant être utilisés

pour former la matrice d'encapsulation (protéines, polysaccharides lipidiques, matériaux

organiques/inorganiques et hybrides), offrent un large éventail d'applications et une évolution

constante dans plusieurs domaines [11].

B. Structure interne :

Selon leur microstructure, les particules ainsi obtenues présentent deux types de

morphologies des lignes distinctes qui définissent les microsphères et les microcapsules. [12]

Ces deux types de particules obtenues dépendent des propriétés physico-chimiques du

principe actif, du matériau d'enrobage, et de leur composition ainsi que de la technique

d'encapsulation utilisée [13].

 Les Microsphères (structures matricielles) : constituées d'un réseau macromoléculaire

ou lipidique continu formant une matrice, dans lequel est finement dispersé le principe

actif [12].

 Microcapsules (particules réservoirs) : constituées d'une cavité centrale contenant le

principe actif entourée d'une coque en polymère [14].

5
 Les formulations galéniques
CHAPITRE I

Figure 2. Morphologie des microparticules et section longitudinale, sous le microscope

électronique à balayage. [9].

I.4 Techniques de la microencapsulation :

Selon l'application prévue de la microencapsulation, la nature du polymère utilisé, les

propriétés de la molécule encapsulée et la structure des particules souhaitée, un processus

d'encapsulation est choisi [12].

Il existe plusieurs méthodes pour classer les techniques de la microencapsulation. En effet, les

techniques peuvent être classées en fonction du support de dispersion utilisé ou de la nature

du processus [12].

a. En fonction de la nature du support de dispersion utilisé pendant les plafonds de

préparation :

• Dans un milieu liquide: coacervation, émulsification-évaporation, gélification des gouttes,

polycondensation interfaciale et polymérisation dans le milieu dispersé.

• Dans un milieu gazeux: enrobage dans un lit d'air fluidisé «coulant par pulvérisation» et

séchage de nébulisation / «séchage par pulvérisation».

• Dans un environnement supercritique: utiliser le liquide supercritique comme non-solvant:

« Antisolvant de liquide supercritique» (SFA) procédés ou en utilisant un solvant de

«l'expansion rapide du fluide supercritique», expansion rapide des solutions supercritiques

»(RESS).

6
 Les formulations galéniques
CHAPITRE I

• En l'absence de solvant: sphéronisation et congélation de gouttes «congélation par

pulvérisation» [6].

b. En fonction de la nature du processus :

 Processus physico-chimiques :

 Technique de coacervation: [6]

Les techniques de coacervation s'appliquent à des solutions colloïdales de substances

macromoléculaires; le terme coacervation décrivant un changement de solubilité des solutions

de colloïdes.

 Technique par fusion à chaud du matériau support :

La substance à encapsuler est dissoute ou dispersée dans le matériau support fondu.

L'ensemble est émulsifié dans une phase dispersante pour laquelle le principe actif n'a pas

d'affinité: eau distillée lorsque la substance à encapsuler est lipophile, huile de silicone par

exemple lorsqu'elle est hydrophile. La solidification des globules dispersés est obtenue par

refroidissement brutal du milieu réactionnel.

 Technique par évaporation de solvant :

Cette technique permet d'encapsuler une grande variété de principes actifs solides ou

liquides, hydrophiles ou lipophiles. Suivant la nature du principe actif, on obtient des

systèmes réservoirs ou matriciels. [6].

 Processus chimiques :

 Encapsulation par polymérisation interfaciale:

Cette technique, qui est la plus récente, combine une émulsion eau dans huile (E/H) ou

huile dans l'eau (H/E) et une réaction chimique entre deux réactifs à l'interface de la phase

continue et de la phase dispersée.

 Microencapsulation par polymérisation :

7
 Les formulations galéniques
CHAPITRE I

Un monomère, le plus souvent vinylique ou acrylique tel le styrène ou le méthacrylate de

méthyle, est solubilisé dans la substance à encapsuler en présence d'un amorceur

organosoluble.

 Processus mécaniques :

Plutôt répandu dans l'industrie agro-alimentaire, s'apparentent souvent aux techniques

d'enrobage. Les deux principales techniques sont celle par lit d'air fluidisé et celle par

nébulisation ("spray-drying").

I.5 Matière première principale utilisé dans la microencapsulation :

I.5.1 Alginate de sodium :

Les premières expériences sur l’extraction des alginates à partir d’algues brunes ont été

réalisées par le chimiste anglais E. C. Stanford à la fin du XIXième siècle. En 1883, il découvrit

une substance aux nombreuses et intéressantes propriétés, qu’il appela «algine». Leur

production industrielle s’est développée ensuite aux USA dans les années 1930. L’alginate est

un des biopolymères les plus polyvalents. Il est utilisé dans le secteur agro- alimentaire et

l’industrie pharmaceutique [15]

8
 Les formulations galéniques
CHAPITRE I

Figure 3. Macrocystis pyrifera (a) ; Laminaria hyperborea (b) et Laminaria digitata (c) [15]

5.1.1 Propriétés des gels d’alginate:

Tableau 1. Les propriétés des gels d’alginate. [16-17].

Solubilité Les alginates sont solubles à froid et permettent ainsi d'obtenir facilement
des solutions visqueuses. Grâce à sa solubilité dans l'eau, c'est l'alginate de
sodium qui est le plus utilisé bien qu'insoluble dans l'éthanol et les solvants
organiques

la viscosité des alginates en solution. Les alginates commercialisés peuvent

Viscosité être dissous dans de l'eau chaude ou froide pour obtenir des solutions dont la

viscosité s'étend de quelques centpoises à plusieurs centaines de centpoises .

5.1.2 .Structure générale :

L’acide alginique est un polymère naturel,linéaire, de structure hétérogène, constitué de

deux unités monosaccharidiques : l’acide ß-D-mannuronique et l’acide α-L-guluronique. [18].

9
 Les formulations galéniques
CHAPITRE I

Figure 4. Caractéristiques structurelles des alginates : (A) monomères d'alginate, (B) structure

chimique des monomères, (C) chaîne conformation et (D) distribution de blocs. [19]

5.1.3 Mécanisme de gélification :

Les propriétés de gélification des alginates sont basées sur leur affinité pour certains ions et

leur capacité à se lier à ces ions de façon sélective et coopérative.

La gélification des alginates, induite par des ions divalents, résulte de la capacité de ces

composés à former des liaisons ioniques accompagnées de changements conformationnels.

[20].

10
 Les formulations galéniques
CHAPITRE I

Figure 5. Représentation de la structure en « egg box » et de la dimérisation entre Ca2+

(cercles vides) et les atomes d'oxygène (cercles pleins) dans les blocs G (zigzags) (adapté de

Fu et al.5). [19]

5.1.4 Les sources de l’alginate :

L’alginate se trouve principalement dans le mucilage intercellulaire et les cellules des

algues brunes sous forme de sels de calcium, de sodium et de magnésium d'acide alginique,

offrant flexibilité et résistance mécanique à la plante [21, 22].

Les espèces d’algues brunes, les plus exploitées à des fins industrielles appartiennent à l’ordre

des Laminariales, avec Laminaria hyperborea, Laminaria digitata, Laminaria japonica,

Ascophyllum nodosum et Macrocystis pyrifera [23]. Celles-ci sont récoltées sur les côtes

rocheuses des États-Unis, en Grande Bretagne, en France (Bretagne), au Japon, en Chine ou

encore en Norvège [24]

5.1.5 Domaines d'application :

La microencapsulation étant une méthode de protection de divers principes actifs vis-à-vis

des facteurs extérieurs, ce concept a été largement utilisé dans divers domaines d'application

et reste en constante évolution, nous citons :

11
 Les formulations galéniques
CHAPITRE I

Figure 6. Schéma des domaines d’application de la microencapsulation. [24]

II. Les Emulgels :

II.1 Définition :

C’est est une combinaison entre un gel et une émulsion où la présence d’un agent

gélifiant dans la phase aqueuse permet la conversion d’une émulsion classique en émulgel. La

capacité gélifiante de ces composés diminue la tension superficielle et interfaciale tout en

augmentant la viscosité de la phase aqueuse ce qui leur confère une stabilité meilleure par

rapport aux autres formes dermiques et en particulier les émulsions [28,29].

II.2 Intérêts des émulgels [30, 31] :

 médicament hydrophobe peut être facilement incorporé en utilisant une émulsion H/E.

 Meilleure stabilité.

 Meilleure capacité de chargement.

 Faible coût de préparation.

 Effet prolongé du médicament (libération contrôlée).

12
 Les formulations galéniques
CHAPITRE I

 Améliorer la conformité des patients.

 Éviter le métabolisme de premier passage.

 Médicaments auto-administrés.

 Arrêt du traitement si nécessaire.

 Convient aux médicaments à demi-vie courte et aux médicaments puissants.

 Système d'administration de médicaments spécifique au site.

 Éviter les incompatibilités gastro-intestinales.

II.3 Formulation des émulgels :

Les systèmes émulgels intéressent actuellement les scientifiques pharmaceutiques en

raison de leur potentiel substantiel à agir comme véhicule d'administration de médicaments en

incorporant une large gamme de molécules médicamenteuses. Il s'agit soit d'une émulsion de

type eau dans l'huile, soit d'une huile dans l'eau, qui se gélifie en la mélangeant avec un

gélifiant.

L'incorporation de l'émulsion dans le gel en fait un système de libération à double contrôle et

augmente également sa stabilité.

En raison du manque d'excipients insolubles et de l'excès de bases huileuses, il démontre une

meilleure libération de médicament par rapport à un autre système d'administration de

médicament topique. En raison du non-gras en raison de la présence de phase gel qui favorise

une bonne observance du patient. [32].

13
 Les formulations galéniques
CHAPITRE I

Figure 7. Schéma général de formulation des émulgels. [33].

II.4 Caractérisations des émulgels :

Les méthodes de caractérisation des émulgels se rapprochent de celles des émulsions on peut

citer :

4.1 .Caractérisation Rhéologique :

Les propriétés rhéologiques d’un gel telles que la viscosité et l’étalement sont cruciales

pour déterminer ses performances et ses utilisations potentielles .Le comportement

rhéologique joue un rôle important dans l’évaluation de la stabilité physique des préparations

topiques pendant le stockage et les applications.

4.2 Mesure de la taille des particules, l’indice de polydispersité et le potentiel Zéta

Il est important de contrôler la taille des émulgels car elle affecte la perméabilité,
l’absorption, la demi –vie biologique du PA mais aussi la stabilité physique de l’émulsion.

14
 Les formulations galéniques
CHAPITRE I

4.3 Morphologie :

La caractérisation de la composition, de la déformation et de la structure interfaciale, de la

morphologie, de la quantification des phases et de la distribution granulométrique des
nanomatériaux est une étape critique du processus de conception. La microscopie électronique
à balayage et à transmission (SEM/TEM) est largement utilisée à cette fin [34]. Le SEM est
l'une des techniques expérimentales les plus connues pour étudier et évaluer l'imagerie et la
caractérisation des microparticules et nanoparticules.

4.4 d'efficacité de piégeage :

L'efficacité d'encapsulation des huiles essentielles dans l'émulgel a été étudiée en fonction de
la quantité initiale d'huile essentielle. afin d’évaluer la quantité relativement d’HE piégée dans
l'émulgel.

4.5 Études in vitro sur la libération de médicaments :

Des études de libération de médicament à partir des émulgels, in vitro ont été réalisées à
l'aide d'un tube de dialyse. La quantité de médicament libérée est tracée en fonction du temps
L’évaluation de cette libération permet d’apprécier la cinétique de libération des PA
encapsulé dans les émulgels où le gel Carbopol agit comme un réservoir dans lequel le
médicament pénètre et traite la zone d'infection ciblée. [35].

15
 Chapitre II
Plantes médicinales et huiles essentielles
 Plante médicinales et huiles essentielles
CHAPITRE II

1. Généralité sur les plantes médicinales :

Une partie de la population mondiale utilise la médecine traditionnelle pour guérir. Cette
utilisation généralisée s'explique par son accessibilité et sa disponibilité de cette médecine
dans les pays en développement d'un côté, et les effets nocifs des médicaments synthétiques
de l'autre côté. Les plantes médicinales constituent une piste de recherche de nouveaux
produits antibactériens plus efficaces en vue de l'émergence des souches très résistantes aux
antibiotiques. Les plantes médicinales deviennent importantes pour la recherche
pharmacologique et le développement ou la production de médicaments, non seulement
lorsque les composants des plantes sont directement utilisés comme agent de thérapie, mais
aussi comme matériaux de synthèse de médicament ou comme modèles de composés
pharmacologique. [35]

2. Définition des huiles essentielles :

Les huiles essentielles sont des substances aromatiques présentes dans les cellules ou les
glandes spécialisées de certaines plantes, utilisées pour se protéger des prédateurs et des
ravageurs, mais aussi pour attirer des polinators. En d'autres termes, les huiles essentielles
font partie du système immunitaire de la plante. Le célèbre alchimiste, médecin, physicien,
astrologue, théologien et philosophe de Suisse, Paracelsus, l’a appelé huiles distillées des
herbes -quinta Essentia- la quintessence de la plante, et donc le nom des huiles essentielles

Les huiles essentielles sont des substances volatiles hautement concentrées extraites de
diverses parties de certaines espèces végétales, chacune avec des effets thérapeutiques et
énergétiques spécifiques. Ces liquides volatils sont des substances moléculaires très
complexes, extrêmement puissantes et précises comme action. L’extraction des huiles
essentielles est coûteuse en raison de la grande quantité de matières premières nécessaires
pour produire quelques millilitres d'huile. Cela explique les prix élevés requis pour une
véritable huile essentielle. Par exemple, pour obtenir une seule goutte d'huile essentielle de
rose, environ 60 roses [36-37].

3. Utilisations des huiles essentielles :

Elles sont utilisées dans certains médicaments, en parfumerie, en phytothérapie ou comme

aromatisant dans les aliments. Il faut distinguer l'activité de l'huile essentielle de celle de la
plante infusée. Il y a souvent un seuil au-delà duquel ils peuvent devenir toxiques.

14
16
 Plante médicinales et huiles essentielles
CHAPITRE II

L'utilisation des plantes et des huiles est régie par le code de la santé publique. Depuis
plusieurs années, les huiles essentielles ont envahi de nombreux produits de la vie
quotidienne. On les trouve de plus en plus comme arômes alimentaires comme exhausteurs de
goût (café, thé, tabac, vins, yaourts, plats cuisinés...). La cosmétique et principalement, la
cosmétique biologique est également un secteur qui utilise de plus en plus d'huiles
essentielles.

4. Constituants chimiques des huiles essentielles :

Les huiles essentielles pures sont des mélanges de plus de 200 composants, des mélanges de
terpènes ou de dérivés phénylpropaniques, dans lesquels les différences chimiques et
structurelles entre les composés sont minimes. Ils peuvent être classés en deux groupes :

a. Fraction volatile: Huile essentielle constituent 90-95% de l'huile en poids, contenant

Les hydrocarbures monoterpéniques et sesquiterpéniques, ainsi que leurs dérivés oxygénés
ainsi que les aldéhydes, alcools et esters aliphatiques.

b. Résidu non volatil : qui comprend 1 à 10 % de l’huile, contenant des hydrocarbures,

des acides gras, des stérols, des caroténoïdes, des cires et des flavonoïdes [38].

Tableau 2. Les constituants chimiques des huiles essentielles. [39-40].

Les groupes Propriétés

Terpènes Antiseptique, calment et des sédatifs.

Alcools antiseptique, antiviral, bactéricide et germicide.

Aldéhydes antifongique, anti-inflammatoire, antiseptique, antiviral, bactéricide,

désinfectant, sédatif.

Acides anti-inflammatoire.

Esters Les huiles essentielles contenant des esters sont utilisées pour
leurs effets apaisants et équilibrants.

Cétones anti-catarrhal, proliférant cellulaire, expectorant, vulnérabilité.

Lactones anti-inflammatoire, antiphlogistique, expectorant, fébrifuge.

17
15
 Plante médicinales et huiles essentielles
CHAPITRE II

5. Méthodes d’extraction des huiles essentielles :

Les huiles essentielles sont extraites principalement par des méthodes parmi lesquelles :

Tableau 3. Les méthodes d’extraction des huiles essentielles. [41-42-43]

Méthode Procédé
d’extraction

Le procédé consiste à immerger la matière première végétale dans

un bain d'eau. L'ensemble est ensuite porté à ébullition
L’hydrodistillation
généralement à pression atmosphérique.

La vapeur d’eau fournie par une chaudière traverse la matière

végétale située au-dessus d’une grille. Durant le passage de la
L’entrainement à la
vapeur à travers le matériel, les cellules éclatent et libèrent l’huile
vapeur d’eau
essentielle qui est vaporisée sous l’action de la chaleur pour former
un mélange « eau + huile essentielle ».

L’effet des microondes provoque une libération plus rapide de

l’huile essentielle contenue dans la plante grâce à l’ouverture quasi
Micro-onde
instantanée des glandes et poils sécréteurs .Les microondes agissent
de manière sélective sur les cellules végétale, vaporisant la matrice
d »eau, provoquant la rupture des cellules et libérant directement
l’arôme dans la cavité micro-ondes.

L'originalité de cette technique d'extraction réside dans le type de

solvant employé : Le CO2 supercritique. Au-delà du point critique
Au gaz (CO2)
(P = 73,8 bars et T = 31,1 °C), possède des propriétés
supercritique
intermédiaires entre celles des liquides et celles des gaz ce qui lui
confère un bon pouvoir d'extraction, et facilement modulable en
jouant sur les conditions de température et de pression.

16
 Plante médicinales et huiles essentielles
CHAPITRE II

6. Thymus vulgaris :

a. Description de thymus vulgaris :

Thymus vulgaris est l'un des plus grands genres de la famille des Lamiacées, avec plus
de 350 espèces trouvées en Europe, en Asie et en Afrique du Nord [44] il s'agit d'une plante
aromatique à fleurs qui pousse généralement comme un sous-arbuste de 5 à 30 cm de hauteur
avec une racine ligneuse fibreuse et de petites feuilles gris verdâtre à bords étroits. Il a de
nombreuses tiges dures et ramifiées (10-20cm de haut) et des fleurs qui fleurissent de mai à
septembre avec un parfum distinctif peuvent de couleur blanche ou violette. En raison de son
arôme fort dû au thymol, il est cultivé largement en tant qu'herbe culinaire [45], par le
processus de distillation à la vapeur. Habituellement, les huiles essentielles présentent des
monoterpènes et des sesquiterpènes et dans certains cas des phénylpropanoïdes dans leur
composition. L'huile de thym est l'une des huiles commerciales les plus utilisées dans le
monde et connue pour ses diverses propriétés comme conservateur alimentaire, antioxydant,
antibactérien et antifongique. L'huile de thym est très efficace pour l'activité larvicide, de
fortes propriétés antimicrobiennes, anti-inflammatoires et acaricide. [46].

b. Nom commun :

Le nom scientifique du thym est Thymus vulgaris, Le terme grec pour le thym est dérivé du
mot « fumiger », qui pourrait désigner le parfum produit par la combustion du thym comme
de l'encens dans les anciens temples grecs. L'huile de thym est constituée de fortes
concentrations de composés phénoliques [47]

Figure 8. Différentes parties du thym vulgaris (branches ; feuilles, et fleurs) [48]

17
19
 Plante médicinales et huiles essentielles
CHAPITRE II

c. Classification de Thymus vulgaris:

Tableaux 4. Clacification de la plante thymus vulgaris [49].

Règne Plante

Sous règne Tracheobionta

Division Magnoliophyta

Classe Magnoliopsida

Ordre Astéridae

Famille Lamiales

Genre Lamiaceae

Espèce Thymus

6.4 Utilisations de Thymus vulgaris :

 utilisé en médecine populaire roumaine pour ses propriétés expectorantes, antitussives,

antispasmodiques, antispasmodiques, anthelminthiques, carminatives et diurétiques.[50]
 Les utilisations culinaires, cosmétiques et médicinales des plantes de la famille des
Lamiaceae les ont fait ressortir parmi les herbes aromatiques au fil des ans. [51]
 La plante a été utilisée pendant des milliers d'années pour traiter l'alopécie, la plaque
dentaire, les infections à dermatophytes, la bronchite, la toux, les troubles inflammatoires
de la peau et la détresse gastro-intestinale [52].

18
20
 Plante médicinales et huiles essentielles
CHAPITRE II

6.5 Propriétés de Thymus vulgaris :

Tableau 5. Les propriétés de Thymus vulgaris. [53-54-55] .

Les propriétés Définition

L'application potentielle de carvacrol à partir de divers cultivars de

thymus comme agents antifongiques a été signalée récemment (2020).
Anti-
l'activité antifongique de l'huile essentielle extraite de T. vulgaris
fongique contre huit espèces de levures et huit champignons filamenteux isolés
de pathogènes d'infection fongique cutané-muqueuse.

Le T-vulgaris et surtout le carvacrol ont également supprimé de

multiples marqueurs de l'inflammation dans divers tissus chez les
Anti-
animaux de laboratoire. Toutefois, les études ont utilisé différents
inflammatoire
modèles animaux, différents schémas posologiques et des doses
beaucoup plus élevées que dans les régimes alimentaires humains, de
sorte que leur pertinence pour la santé humaine est incertaine.

Le T-vulgaris avait le potentiel de protéger contre les dommages

oxydatifs qui peuvent contribuer aux maladies chroniques du
Anti-
vieillissement. Cependant, ils sont difficiles à interpréter en raison des
Oxydant différents échantillons, modèles animaux et conceptions
expérimentales évalués, bien qu'ils indiquent néanmoins que le thym
a des actions générales de suppression de l'oxydation.

l'efficacité de l'HET-vulgaris contre les bactéries et champignons

alimentaires testés. La synergie, l'antagonisme et les effets additifs,
respectivement, des composants de l'HE nécessitent des recherches
Anti- supplémentaires pour élucider les mécanismes sous-jacents à leur
Microbien activité biologique, dans le but d'accéder à de nouveaux antiseptiques
naturels applicables dans l'industrie pharmaceutique et alimentaire.

19
 Plante médicinales et huiles essentielles
CHAPITRE II

6.6 Composition chimique de Thymus vulgaris :

Des études similaires en Pologne, en Iran, en Espagne et en Italie, respectivement, ont été
signalées comme des composés majeurs dans le T. vulgaris eo p-cymène, γ-terpinene et
thymol; ces différences peuvent être attribuées dans une large mesure aux différents chimio
types mentionnés ci-dessus. [52].

Tableau 6. La composition chimique des majeurs composants de Thymus vulgaris

Thymus Structure
vulgaris Les pourcentages chimique

Limonene
(%)

0,18 39,39 0,015 0,3 24,11 _ _

(T.Thymol
(%)

75.46 44,33 21,07 42,6 1,5 3,55 2,3-2,9

Γ-
Terpinene
(%) 0,33 4,4 27,09 3 1,07 11,17 1,46-2,1

Carvacrol
(%
2,8 _ 0,005 32,3 2,74 58 0,82-1,4

P-Cymene
(%)
12,89-
4,17 1,68 41,04 4,1 0,55 12,8 20,6

Références [56] [57] [58] [59] [58] [59] [59]

20

22
Chapitre III
Matériels et méthodes
 Matériel et méthode
CHAPITRE III

Introduction :

Dans Notre travail nous nous sommes ‘intéressées à la formulation galénique d’une huile
essentielle de Thymus vulgaris connue pour ses propriétés antimicrobiennes et antifongiques.

Nous avons réalisé deux types de formulation : des microparticules et un émulgel :

 Pour la formulation de microparticules nous avons utilisé le procédé de gélification

ionotropique avec l’alginate de sodium à différentes concentrations, les microparticules
obtenues ont été caractérisées par spectroscopie UV-Vis, spectroscopie à infrarouge, la
microscopie optique, la caractérisation rhéologique et le test de dissolution.
 La deuxième formulation consiste en un émulgel constitué d’une émulsion à base d’huile
essentielle de thym, dispersée dans un gel .cette formulation a été caractérisée par
microscopie optique et quelques paramètres physico-chimiques comme le pH et la
conductivité et la caractérisation rhéologique.

Notre partie expérimentale a été réalisée en partie au laboratoire de recherche d’analyse

fonctionnelle du département de génie des procédés et au laboratoire de contrôle qualité au
site de production de Pharmal Dar El Beida Saidal.

1. Matériels :
1.1 Matière premières :

A. présentation des matières premières utilisées :

Nous énumérons les matières premières utilisées et leurs rôles dans la formulation, dans le
tableau ci-dessous

23
 Matériel et méthode
CHAPITRE III

Tableau 7. Les matières premières utilisées et leurs rôles [60, 61]

Matières Rôle La formule Fournisseur

Formulation de microparticule

premières
Huile essentielle
de Thymus Principe actif / Vie Bio
vulgaris

Alginate de Agent enrobant (NaC6H7O6) BIOCHEM Chemophara

sodium

Polysorbate 80 Emulsifiant C64H126O26 CRD Saidal

Chlorure de agent de
calcium gélification CaCl2 SIGMA-ALDRICH

Huile essentielle Principe actif C10H14O Vie Bio

de Thymus
vulgaris

Span 20 Emulsifiant C₁₈H₃₄O₆ CRD Saidal

Polysorbate 80 Emulsifiant C64H124O26 CRD Saidal

Contrôle

Propylène glycol Solubilisant C3H8O2 Pharmal Saidal

Agent Pharmal
Triethanolamine neutralisant C6H15NO3 Saidal

Agent gélifiant Pharmal

Carbopol 940 (C3H4O2)n Saidal
Pharmal Saidal
Méthanol 99,8% Diluant CH3OH
permet de
DPPH mesurer le C18H12N5O6 Donné par le
pouvoir département de biologie
antiradicalaire

24
 Matériel et méthode
CHAPITRE III

B. Propriétés physiques et chimiques des matières premières :

Le tableau suivant donne les propriétés physicochimiques des matières premières utilisées.

Tableau 8 : Les propriétés physico-chimique des matières premières [61] :

Masse Densité
Matières Solubilité molaire Ph HLB g /cm3
premières
198,105
Alginate de sodium Soluble dans l'eau g/mol / / 1,1 g/cm3
Chlorure de 110,98
calcium Soluble dans l'eau g/mol 8,5 / 2,15 g/cm³

Solubilité dans l’eau, 1 310 5–7 15.0 1,07

Polysorbate 80 éthanol, g/mol g/cm3
acétone.
Formulation

Monolaurate de Soluble dans l’huile 346,46 / 8.6 1,032

sorbitane minérale, l’huile de g/mol g/cm3
(Span 20) coton, le méthanol,
et l’éthylène glycol.

149,188
Triethanolamine Soluble dans l’eau g/mol / 34 /

Soluble dans l'éther. 76,09 1.036

Propylène glycol Insoluble dans les g/mol g/cm3
huiles / /

Carbopol Soluble dans l’eau 72.06 2.5- > 29 Faible

g/mol 3.0 densité

25
 Matériel et méthode
CHAPITRE III

C. Équipements : les équipements utilisés sont représentés dans le tableau 9 :

Equipements Marque
Balance électronique OHAUS
Préparation
Homogénéisateur IKA 25

Plaque chauffante VELP scientifica

Agitateur magnétique IKA 25

Agitateur à hélice Wisestir

Dissolutest ERWEKA

Contrôle Centrifugeuse Eppendrof

Spectromètre infrarouge FTIR-8900

Spectromètre UV-visible SHIMADZU UV 1700

Rhéomètre Anton Paar MCR 102

Etuve U.More

- Tubes à essai, Spatule, Capsules

Petits
- Pipettes 1 ml, 2 ml.
matériels
- Micropipette de 100µl, 1000µl
- Entonnoir, Bécher, éprouvette graduée, fiole jaugée.
- verre de montre
- Bec bunsen

Tableau 9. Liste des équipements de préparation et de contrôle

D. Matériels biologiques :

Les souches microbiennes utilisées dans le contrôle microbiologique sont

mentionnées dans le tableau

26
 Matériel et méthode
CHAPITRE III

Tableau 10. Les souches microbiennes utilisées. [66].

Souche microbienne Nature Gram ATCC

Aspergillus Champignon gram positif 9642

Escherichia coli Bactérie gram négatif 25922

Bacillus subtilis Bactérie Gram positif 1776

Pseudomonas aeruginosa Bactérie Gram négatif 2315

2. Méthodes :

2.1 Caractérisation de l’huile essentielle de thym

2.1.1. Caractérisation de l’huile essentielle de Thymus vulgaris par Spectroscopie à Infra-

rouge :

Principe :

La spectrophotométrie infrarouge est un moyen de caractérisation qui nous permet de

détermine et d'identifier la nature des liaisons chimiques et des groupes fonctionnels présents
dans nos extraits.

Une pastille de KBR et des échantillons ont été préparés, qui sont ensuite placés dans le
support et analysent dans le dispositif IR .

2.1.2. Caractérisation de l’huile essentielle de Thymus vulgaris par spectroscopie UV-

Visible :

Afin d’évaluer la teneur en principe actif dans les formulations étudiées, une mise au
point de la méthode de dosage du Thymus vulgaris par spectroscopie UV-Visible a été
réalisée. Pour cela, il est nécessaire de déterminer la longueur d’onde optimale et la
détermination des courbes d’étalonnage dans différents milieux, à savoir dans les solutions
tampon à pH 1.2 et à pH 6.8

 Préparation des solutions tampons :

La préparation des solutions tampon à ph 1.2 et 6.8 a été réalisé selon la méthode décrite
par la pharmacopée Européenne 2017

27
 Matériel et méthode
CHAPITRE III

 Préparation de la solution tampon pH=1.2 :

8.38ml de la solution d’acide chlorhydrique à 0.2M, puis on complète à l’eau distillée

jusqu’à 1l. pH 1.2

 Préparation de solution tampon pH 6.8 :

Mélanger 250ml d’une solution de phosphate monopotassique 0.2M avec 112ml
d’une solution hydroxyde de sodium 0.2M puis compléter à 1000ml avec l’eau purifié

- La préparation préalable de solution intermédiaire entrant dans la composition du

tampon phosphate monopotassique 1.2M
Dissoudre 27.22g de phosphate monopotassique dans 1000ml d’eau purifié

- Hydroxyde de sodium 0.2M

Dissoudre 8g d’hydroxyde de sodium dans 1000ml d’eau purifié

 Détermination de la longueur d’onde optimale :

Un balayage dans le domaine UV-Vis a été effectué afin de déterminer la longueur d’onde
optimale λmax, correspondant à l’absorption de la molécule Thymus vulgaris dans différents
milieu de dissolution. Pour la détermination de λmax, les solutions de Thymus vulgaris sont
préparées à une concentration de 0,1 mg.ml-1. Les résultats montrent des pic d’absorptions
maximums définis à une longueur d’onde λmax= 275 nm

28
 Matériel et méthode
CHAPITRE III

HET

Figure 9. Les solutions de Thymus vulgaris préparées à déférant concentration (identifier)

2.1.3 Etude de l’activité anti-oxydante de l’HE par le radical DPPH :

Le modèle de piégeage du radical DPPH stable est une méthode largement utilisée pour
évaluer l'activité antioxydante dans un temps relativement court par rapport à d'autres
méthodes [63]

 Principe de test au DPPH :

Le 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH) est un radical libre instable, en acceptant un
électron ou un radical hydrogène, il devient une molécule stable. L'effet des antioxydants sur
ce radical se traduit par leur capacité à lui donner un radical hydrogène. Cette capacité de
réduction (sur le radical DPPH) est déterminée par la diminution des absorbances à 515 nm,
qui est induite par l'antioxydant. Cela est visualisé par le changement de couleur du violet au
jaune.

 Préparation de solution de DPPH (0,04g/l) :

4 mg de DPPH est mélangé avec 100ml de méthanol 99,8%.

29
 Matériel et méthode
CHAPITRE III

Figure 10: Solution de DPPH.

 Mode opératoire :

Pour réaliser l’analyse, 4 ml de la solution méthanolique de DP-PH (0,04 g/l) est ajouté à
100 μl de la solution de l’huile essentielle concentrations (1.6, 0.8, 0.4, 0,2, 0,1mg/ml). Le
mélange est vigoureusement agité, puis les tubes sont incubés à température ambiante et à
l’obscurité pendant 25 minutes. La longueur d'onde d'absorption maximale a été
préalablement déterminée. Toutes les lectures sont effectuées à 515 nm.

 Calcule du Pourcentage d’inhibition IC :

Le pourcentage de réduction du radical libre DPPH est exprimé par la formule suivante :

% d’inhibition = (Abs c-Abs e /Abs c) x 100……..(1)

Abs c : Absorbance du control négatif après 25 min d’incubation.

Abs e : Absorbance de l’échantillon après 25 min d’incubation.

 Détermination de la concentration inhibitrice médiane (IC50) :

L’IC50 est définie comme étant la quantité ou la concentration d’antioxydants nécessaire

pour inhiber ou faire disparaitre 50% des radicaux. Les IC50 sont calculées graphiquement

30
 Matériel et méthode
CHAPITRE III

par des pourcentages d’inhibition en fonction des différentes concentrations des extraits
testés. Pour chaque extrait une courbe de régression linéaire (Y = a X + b) est établie afin de
calculer l’IC50 qui permettra la caractérisation du pouvoir antioxydant des extraits. Une faible
valeur de l’IC50 indique une forte activité antioxydante.

2.1.4 Etude de l’activité antimicrobienne et antifongique sur l’HE :

Principe :

L’étude a été réalisée par méthode de diffusion sur gélose, conçue initialement pour les
antibiotiques, mais en substituant les disques d’antibiotiques par d’autres imprégnés
d’huile essentielles Cette méthode est reconnue comme fiable et reproductible, en plus de
ça, elle constitue surtout aussi une étape préliminaire à des études plus approfondies, car
elle permet d’accéder à des résultats essentiellement qualitatifs (Dima, 2016). Elle permet
également de mettre en évidence l’effet antimicrobien de l’HE et de déduire la résistance
et la sensibilité des souches microbiennes (Amara et al., 2017).
 Mode opératoire :
Le protocole suivi est celui décrit par Haddouchi et al., (2016), qui est réalisé comme
suit:
Des géloses de Mueller Hinton (MH) coulées dans des boites de Pétri sont ensemencées
uniformément à l’aide d’une micropipette de 100 µl de chaque suspension bactérienne
standardisée, celles-ci ont été étalée à l’aide d’un râteau de pipette Pasteur. Des disques
de papier Whatman stériles de 6 mm de diamètre, imprégnés avec 10 µl d’une d’HE
additionnée de DMSO à raison de 5% (v/v) ont été laissées sécher pendant quelques
instant (pas trop longtemps pour éviter l’évaporation de l’HE). Pour chaque souche
bactérienne testée, ces disques ont été déposés au milieu des boites de Pétri contenant les
géloses ensemencées Les boites ensemencées contenant les disques d’huile essentielle
ont été mises à 4°C pendant 2 heures pour faciliter la diffusion d’HE. Le test a été répété
deux fois. − L’incubation des boites se fait dans l’étuve à 37°C pendant 24h. La lecture
des résultats s’est faite 24 heures après l’incubation par la mesure des diamètres des
zones d’inhibition, ceci en mesurant la moyenne des deux diamètres perpendiculaires
passant par le milieu du disque, qui sont ainsi déterminés comme un halo translucide
autour du disque à l’aide d’une règle en (mm). Suivant le diamètre de la zone d’inhibition
exprimé en (mm) autour de chaque disque, la lecture des résultats est faite comme suit
(Djabou et al., 2013):

31
 Matériel et méthode
CHAPITRE III

− Résistante (-): diamètre ≤ 8 mm.

− Modérément sensible (+): diamètre compris entre 8 et 14mm.
− Sensible (++): diamètre compris entre 14 et 20mm.
− Extrêmement sensible (+++): diamètre ˃ 20mm.

2.2 Méthodes de Formulation :

2.2.1 Formulation des microparticules :

 Choix des matières premières:

Pour la formulation galénique, Nous avons effectué des recherches bibliographiques, qui nous
ont conduits à un panel de matières premières. Selon la disponibilité, nous avons arrêté notre
choix comme suit:

Tableau 11. Les Matières Premières utilisées.

Les matières premières Quantités utilisées

Thymus vulgaris 8ml
Alginate de sodium 7g
Polysorbate 60 2g
Chlorure de calcium 36 g
Huile végétale 400ml
Talc 0.2g
L’eau distillée 750ml

 Choix du procède de préparation des microparticules :

2.2.1.1 Les essais de pré-formulation :

Pour orienter notre formulation nous avons mené des essais de préformulation dans
lesquels nous avons réalisé deux procédés, un procédé direct et un procédé indirect dit par
émulsification (tableau 12) .

Tableau 12. Les procédés de la microencapsulation.

32
 Matériel et méthode
CHAPITRE III

Procèdes de la microencapsulation
Procédé direct Procédé indirect
Préparation de la solution d’alginate : Préparation de l’émulsion d’HE
dans d’alginate :
- Mettre la MP alginate de
- Mettre la MP alginate de sodium dans
sodium dans un bécher contenant l’eau
un bécher contenant l’eau distillée, sous
distillée, sous une agitation magnétique
une agitation magnétique jusqu’à ce que
jusqu’à ce que le polymère se dissout
Étape 1

le polymère se dissout complètement.

complètement
- Prendre 20ml de la solution d’alginate
de sodium puis ajouter le talc, l’huile
essentielle de thym et le polysorbate 80
- Mélangez avec une spatule puis mettez
le mélange sous agitation pendant
10min.

Préparation de la solution de chlorure Préparation de la solution de

de calcium à 10% / Chlorure de calcium 10% :
Étape 2

:
Mettre la MP chlorure de calcium dans une - Dissoudre la MP chlorure de calcium
fiole et faire dissoudre dans l’eau distillée. dans une fiole de 100ml contenant de
l’eau distillée
Préparation des microparticules : Préparation des microparticules :

- Prendre 20ml de la solution d’alginate de - Dans un bécher émulsifier 40ml de

sodium puis l’huile végétale avec 20ml de l’émulsion
ajoutez le talc, l’huile essentielle de Thym préparée sous une forte agitation, puis
et le polydorbate 80 rajouter 50ml de la solution de chlorure
et Mélanger avec une spatule, de calcium et laisser sous agitation
Puis mettre le mélange sous modérée pendant 1h.30, récupérer les
Étape 3

une forte agitation en utilisant un agitateur microparticules par centrifugeuse et les

à hélice. rincer avec l’eau.
-Ajoutez goute à goute cette préparation à
l’aide d’une seringue dans la solution de
chlorure de calcium et laissez sous
agitation pendant 1h.
- A l’aide d’un filtre récupérez
les microparticules obtenues
et les rincer.

33
 Matériel et méthode
CHAPITRE III

2.2.1.2 Les essais de formulation :

Après les essais de préformulation nous avons réalisé autres formules de différentes
concentrations (tableau 13) qui ont été préparées en suivant le procédé indirect par
émulsification, les étrapes sont illustrées dans le schéma ci-dessous :

Tableau 13. Matrice des essais de formulation des microparticules

Quantité en Alginate Huile Polysorbate Chlorure de Eau

% essentielle 60 calcium distillée

Essai 1 2% 1% 0,25% 9% 70%

Essai 2 3% 1% 0,25% 9% 70%

Essai 3 4% 1% 0,25% 9% 70%

Essai 4 5% 1% 0,25% 9% 70%

34
 Matériel et méthode
CHAPITRE III

Figure 11: Schéma représentant le procédé de formulation des microcapsules.

35
 Matériel et méthode
CHAPITRE III

2.2.2Procède de préparation de l’émulgel 0,5% et 1% :

La formulation des émulgels 0.5% et 1% est composée de deux préparations, préparation

d’une émulsion (H /E ou E/H) et un gel. Dans nos formulations, on a préparé deux émulgel.

Tableau 14. Matrice des essais de formulation d’émulgel.

Quantité Huile Carbopol Polysorbate Huile de Span Eau Propylène

en % essentielle 940 80 paraffine 20 distillé glycol

Essai 1 0,50% 0,50% 2,50% 4,25% 0,75% 41,50% 2,50%

Essai 2 0,50% 1% 2,50% 4,25% 0 .75% 41,50% 2,50%

Figure12 : Schéma représentant le procède de préparation de l’émulgel.

36
 Matériel et méthode
CHAPITRE III

2. 3 Méthodes de caractérisation :

2.3.1Caractéristiques de l’huile essentielle de Thymus vulgaris :

Les caractéristiques physico-chimiques de l’HE utilisé sont données dans le tableau 8.

2.3.1.1 Identification par spectroscopie infrarouge :

 Le principe
La spectrophotométrie infrarouge est un moyen de caractérisation qui nous permet de
détermine et d'identifier la nature des liaisons chimiques et des groupes fonctionnels présents
dans nos extraits.

Une pastille de KBR et des échantillons ont été préparés, qui sont ensuite placés dans le
support et analysent dans le dispositif IR

2.3.1.2 Caractérisation de l’HE du Thymus vulgaris par spectroscopie UV-Visible :

Les échantillons ont été analysés par spectroscopie dans le visible UV.

 Détermination de la longueur d’onde optimale : Un balayage dans le domaine UV-

Vis a été effectué afin de déterminer la longueur d’onde optimale λmax, correspondant à
l’absorption de la molécule DS dans différents milieux de dissolution. Pour la détermination
de λmax, Les solution de DS sont préparées dans les solutions tampon à pH 1,2 et à pH 6.8 à
une concentration de 0,1 mg.mL-1
 Détermination de la courbe d’étalonnage : Les courbes d’étalonnage sont réalisées
dans deux solutions tampons différentes qui sont le tampon gastrique pH 1,2 et le tampon
intestinal pH 6.8. Les deux courbes d’étalonnage sont réalisées comme suivant :

 Mesurer la densité optique (DO) pour chaque concentration à λ =275 nm.

 Tracer la courbe d’étalonnage représentant DO = f(c).

37
 Matériel et méthode
CHAPITRE III

2.3.2 Caractérisations des microparticules

2.3.2.1. Le rendement :
Le rendement représente la quantité de microcapsules récupérées à la fin de procédé de
fabrication après séchage des microcapsules, il est calculé par rapport la matière sèche totale
initiale PA et biopolymères selon la formule suivante :

R (%) = Ps/Pt×100………….(2)

R: Le rendement en %.

Ps : Le poids des microparticules séchées.

Pt : Le poids total des matières premières.

2.3.2.2 Caractérisation par microscopie :

 Le microscope optique :

La microscopie optique est une technique très utile pour l'étude des émulsions. Elle est un
excellent moyen de surveiller la stabilité de ces systèmes pendant le vieillissement. La
microscopie optique est une méthode d'analyse courante pour la multiplicité des systèmes,
cette méthode donne une idée de la taille des gouttelettes internes, souvent de l'ordre du
micromètre.

L'analyse microscopique des microparticules formulées a été réalisée à l'aide d'un

microscope optique, l’échantillon est mis entre lame et lamelle et observé au grossissement
G : X10 et G : X4.

2.3.2.3 Caractérisation rhéologique :

La rhéologie a été définie comme l'étude de l'écoulement et de la déformation des

matériaux. Les objectifs généraux des mesures rhéologiques sont:

- Obtenir une description quantitative des propriétés mécaniques.

- Obtenir des informations liées à la structure moléculaire et à la composition du

matériau.

- Caractériser et simuler l'exécution du matériau pendant le traitement

38
 Matériel et méthode
CHAPITRE III

Deux tests ont été effectués sur les émulsions d’HE , sur les microparticules obtenues
après gélification et aussi sur les formulations d’émulgel

 Le test d’écoulement :

Des courbes d’écoulement ont été déterminées en régime continu sous cisaillement
variable, traduisant la viscosité apparente ηapp (Pas) en fonction de la vitesse de cisaillement

γ̇(s-1).

Pour l’obtention de ces courbes, on fait varier la vitesse de cisaillement par pas
logarithmique de 0,001 à 1000 s-1, avec un nombre de point de mesure de 5 par décade, et un
temps de mesure entre deux points successifs variant de 30 à 2s à 20°c.

Ce test rhéologique nous permet de déterminer la viscosité de nos essais et pour cela nous
avons utilisé un rhéomètre de marque Anton Paar Compact Rhéomètre MCR 302, relié à un
bain thermostat et commandé à l’aide d’un logiciel qui permet de traiter les données.

 Le test de viscoélasticité :

Les propriétés viscoélastiques des microparticules et des émulgels ont été mesurées en
mode dynamique par un test non destructif d’oscillations de faible amplitude. Un balayage
croissant en déformation, de 0,0001 à 1000 a été effectué à la fréquence de 1 Hz (mode
logarithmique, 4 points/décade).

Cette mesure a permet d’obtenir les valeurs des modules G’, G’’ dans le domaine linéaire

viscoélastique.

o G’ : le module de conservation, il représente le caractère élastique de la crème,

l'énergie emmagasinée dans le matériau.
o G’’ : le module de perte, qui représente le caractère visqueux de la crème et
correspond à l'énergie dissipée.

39
 Matériel et méthode
CHAPITRE III

2.3.2.4. Identification par spectroscopie infrarouge :

2.3.2.5 Étude de libération in vitro :

L’étude de la libération est destinée à déterminer la vitesse de dissolution des principes

actifs à partir des formes pharmaceutiques répondant aux normes de la pharmacopée (67).

Les informations suivantes sont données pour chaque préparation qui est soumise à l’essai de
dissolution in vitro :

Figure 13 . les microcapsules en disoluteste pendant 30min jusqu'à 6h

Tableau 15 : Les conditions du test de dissolution.

L’appareil utilisé Dissolutest ERWEKA

Le volume 500ml
La température du milieu 37±0.5°C
La vitesse de rotation 50 tr.min-1
L’intervalle de temps 30min-1h
Le volume d’échantillonnage 5ml
 Mode opératoire:

1. Introduire dans le récipient du test de dissolution le volume de 500ml du milieu de

dissolution étudié (Solution tampon pH=1.2 ou Solution phosphorique Ph=6.8) Préparation
des solutions tampon en annexe

40
 Matériel et méthode
CHAPITRE III

2. Équilibrez l’appareil Dissolutest à la température 37±0.5°C

3. Introduire 0.3g des microparticules dans le dispositif.
4. Mettre l’appareil en marche à 50 tr.min-1 pendant 6heures.
5. Procédez à des prélèvements de 5mL d’échantillons à des intervalles de temps régulier.
6. Effectuer le dosage sur chacun des échantillons prélevés, par spectroscopie UV-VIS à
275nm.
7. La dissolution des microparticules est réalisée pendant 6h dans le milieu de dissolution pH
1.2 (milieu gastrique), et dans le milieu de pH 6.8 (milieu intestinale).

2.3.3 Caractérisations de l’émulgel :

2.3.3.1Caractérisation macroscopique :

Nous avons contrôlé les paramètres suivants : la couleur, la consistance, l’homogénéité et la

texture

2 .3.3.2 Caractérisation par microscopie

2.3.3.3 Caractérisation physico-chimiques de l’émulgel :
 Mesure de pH :

La mesure de pH est nécessaire, elle a été réalisée avec un pH-mètre menu d’une électrode
pour produits visqueux. Le pH de l’émulgel en contact de la peau doit se située à une
fourchette allant de 5,5 à 6 car la peau est normalement légèrement acide, ce qui lui permet de
développer une protection plus efficace contre les attaques naturelles et permanentes des
micro-organismes.

 Test de stabilité (centrifugation) :

L’émulgel est centrifugé à 4000 rpm pendant 8-10 minutes pour vérifier la crémation ou la
séparation des phases. Ce test est utilisé pour évaluer la stabilité physique.

41
 Matériel et méthode
CHAPITRE III

Figure 14 . L’emulgel ( 1% - 2 % ) centrifuger

2.3.3.4 Caractérisation rhéologique :

 Étude du comportement rhéologique:

La rhéologie a été définie comme l'étude de l'écoulement et de la déformation des matériaux.

Les objectifs généraux des mesures rhéologiques sont:

- Obtenir une description quantitative des propriétés mécaniques.

- Obtenir des informations liées à la structure moléculaire et à la composition du matériau.

- Caractériser et simuler l'exécution du matériau pendant le traitement

2.3.3.5 Evaluation anti macrobienne et anti- fongique d’ émulgel :

Nous avons réalisé l’activité antimicrobienne et antifongique sur l’émulgel à base d’HE de
Thymus vulgaris, selon la méthode de contact direct ou aromatogramme. Le principe de la
méthode repose sur la diffusion du composé antibactérienne en milieu solide dans un boite de
pétri, avec création d’un gradient de concentration après un certain temps de contact entre le
produit et le microorganisme cible. L’effet du produit antibactérien sur la cible est apprécié
par la mesure d’une zone d’inhibition, et en fonction du diamètre d’inhibition. (HELLAL,
2011).

 Protocole :

42
 Matériel et méthode
CHAPITRE III

15 ml du milieu MH a été coulé dans des boites de Pétri, Après le refroidissement et la

solidification sur la paillasse nous avons réalisé des puits de 5mm de diamètre avec la pipette
pasteur. Nous avons par la suite introduit 50ul de l’émulgel dans le puit avec deux
répétitions pour chaque essai. Les boites ont été incubées à 37°C pour les bactéries et à25 °C
pour les champignons et les résultats sont évalués après 24H à72H.

Les souches microbiennes testées sont trois bactéries et un champignon présentées dans le
tableau 10 .

Le résultat peut être symbolisé par des signes d’après la sensibilité des souches vis-à-vis
d’émulgel (PONCE et al. 2003).

o Non sensible (-) ou résistante : diamètre < 8mm.

o Sensible (+): diamètre entre 9 à 14mm.
o Très sensible (++): diamètre compris entre 15 à 19 mm.
o Extrêmement sensible (+++): diamètre >20mm.
La zone d’inhibition a été évaluée après 24 heures en mesurant la moyenne de deux
diamètres perpendiculaires passant par le milieu du disque.

43
 Chapitre IV
Résultats et discussions
 Résultats et discutions
CHAPITRE IV

 Dans ce chapitre, nous donnerons les résultats obtenus lors des différentes
caractérisations (le rendement, la morphologie, la caractérisation par spectrométrie UV-
visible et par infra-rouge) et de l’huile essentielle et nos formules.

1.1. Résultats de la Caractérisations de l’huile essentielle :

1.1.1 Identification par spectroscopie infrarouge :

Conformément aux données de la littérature relatives aux modes de vibration des

groupements fonctionnels dans l’infrarouge, nous avons attribué les bandes d’adsorption
enregistrées aux différentes fonctions existantes .

44
Résultats et discutions
CHAPITRE IV

45
Figure 15 . Le spectre infrarouge de l’HE de Thymus vulgaris
 Résultats et discutions
CHAPITRE IV

Le spectre de thymus vulgaris est présenté sur la figure 15 les bandes caractéristiques sont :
 3385 cm-1 : une large bande caractéristique du groupement OH
 2959 cm-1 : bandes caractéristiques des groupements carboxylates COO- symétrique
 1420cm- 1 : bande caractéristique des groupements C=C
 811 cm-1 : bande caractéristique d’un composé cyclique

1.2.1 Résultats de la Caractérisation de l’huile essentielle de Thymus vulgaris par

spectroscopie UV-Visible :

Un balayage dans le domaine UV-Vis effectué nous a permis de déterminer la longueur

d’onde spécifique d’absorption de l’HE dans l’UV-Vis,correspondant au maximum
d’absorption enregistré après balyage . Le λmax, correspondant à l’absorption de l’HE de
Thymus vulgaris dans différents milieu de dissolution.. Les résultats montrent des pics
d’absorptions maximums définissant une longueur d’onde λmax= 275 nm (Figur13)

275nm

Figure 16. Spectre d’absorption de l’HE de Thymus vulgaris dans l’UV-Vis

46
 Résultats et discutions
CHAPITRE IV

Tableau 16. Le dosage de huile essentiel Thymus vulgaris

Dilution D1 D2 D3 D4 D5 D6 D7 D8

Absorbance 3.311 3.135 1.727 1.209 0.430 0.269 0.134 0.099

 Détermination de la courbe d’étalonnage :

-Les résultats sont représentés dans la :

Figure 17 . Courbe détalonnage de Thymus vulgaris en fonction de la concentration.

47
 Résultats et discutions
CHAPITRE IV

1.1.3 Résultats de l’évaluation de l’activité anti-oxydante de l’HE par le radical

DPPH :

L’activité anti oxydante de Thymus vulgaris vis-à-vis du radical DPPH a été évaluée par
spectrophotométrie UV-Visible, en suivant la réduction de ce radical par différente
concentration de l’huile essentielle par son passage de la couleur violette à la couleur jaune
(figure 18) mesurable à 515 nm.

Figure 18 . Variation de la couleur de DPPH à différentes concentrations de Thymus

vulgaris.

 Calcul du Pourcentage d’inhibition du radical libre de DPPH

Le pourcentage d’inhibition du radical libre DPPH est calculé à l’aide de cette formule :

% d’inhibition = (Abs c -Abs e /Abs c) x 100……..(1)

Abs c : Absorbance du control négatif après 25 min d’incubation.

Abs e : Absorbance de l’échantillon après 25 min d’incubation.
Le tableau ci-dessous représente Le pourcentage de réduction du DPPH en fonction des
concentrations

48
 Résultats et discutions
CHAPITRE IV

Figure19. Pourcentage d’inhibition de DPPH de Thymus vulgaris en fonction de la

concentration.
 Détermination d’IC50 :
La concentration nécessaire pour réduire 50 % du radical libre DPPH ou IC50 a été
déterminée à partir des équations des régressions linéaires de graphe
La valeur d’IC50 est représentée dans le tableau suivant :
Tableau 17 : la valeur d’IC50 de Thymus vulgaris
Echantillon Thymus vulgaris
IC50 2.25mg/ml

Figure 20. Détermination d’IC50 de Thymus vulgaris

49
 Résultats et discutions
CHAPITRE IV

 L’évaluation de l’activité anti-oxydante de Thymus vulgaris par la méthode du

piégeage du radical libre DPPH a montré que cette huile essentielle présente une activité
anti-oxydante remarquable vis à vis du radical DPPH avec une IC50 de 0,24 µg/ml. Cette
activité augmente avec l’élévation des concentrations de l’huile essentielle (dose
dépendante).

1.1.4 Résultats de l’activité anti-microbienne :

Commentaire :
● Il s’est avéré qu’aucune zone d’inhibition autour des disques n’a été observée vis-à-vis
de aspergillus Escherichia coli. Ces bactérie possède un potentiel de résistance très
élevé visa vis de l’huile essentielle.

1.2 Résultats de Caractérisation des formulations :

1.2.2 Résultats de la caractérisation des microparticules :

 Détermination du rendement d’encapsulation :

Le pourcentage de rendement de chaque formulation a été calculé par la formulation
suivante :
R (%) = Ps/Pt×100R: Le rendement en %.............(2)

Ps : Le poids des microparticules séchées.

Pt : Le poids total des matières premières.
Tableau 18 : Le pourcentage du rendement pour chaque formulation.
Formulation R%

F1 (2%) 2.40g 6.46g 63%

F2 (3%) 2.78g 6.83g 59%

F3 (4%) 2.95g 7g 58%

F4 (5%) 2.60g 6.65g 62%

F5 (6%) 2.58 6.63g 61%

50
 Résultats et discutions
CHAPITRE IV

Au vue de ces résultats on remarque que les rendements d’encapsulation sont compris entre
58 et 63 % ce qui parait intéressent comparé aux résultats des études antérieurs sont élevés.

1.2.3 Caractérisation par microscopie optique :

Figure 21. La solution polymérique 3% dans l’eau ce microscope G*10

Figure 22. la dispersion de HET dans L’émulsion (essai préliminaire 3% ) ce microscope G*40

51
 Résultats et discutions
CHAPITRE IV

Tableau 19 .les microparticules formés par méthode direct et indirect ce microscope optique
La formulation Les figures

Méthode direct G*4 Méthode indirect G* 4

(3%)1

(3%)2

(5%)1

(5%)2

52
 Résultats et discutions
CHAPITRE IV

Tableau 20 . Les microparticules formés méthode indirect ce microscope optique :

La Les Figures Description

formulation
Grossissement *4 Grossissement *10

Microparticul
e sphérique
(2%) de taille plus
ou homogène

(3%) Microparticul
e sphérique
de taille plus
ou homogène

Microparticul
e sphérique
(4%) de taille plus
ou homogène

Microparticul
e sphérique
(5%) de taille plus
ou homogène

53
 Résultats et discutions
CHAPITRE IV

1.2.3 Caractérisation rhéologique des microparticules :

 caractérisation des émulsions d’HE :

 Test de viscoélasticité :

Nous représentons ci-joint un graphe caractéristique du test de viscoélasticité d’un

essai type

essai3%

1000

def % vs G'
def % vs G''
G' G''

100

10
0,0001 0,001 0,01 0,1 1 10 100 1000 10000

déformation %
Figure 23 .Courbe de viscoélasticité d’un essai type 3%

 Commentaire :

L’évolution des deux modules de conservation G’ et de perte G’ en fonction de la

déformation de cisaillement est illustrée dans la (figure ). Aux faibles déformations, on
remarque bien que les deux modules sont constants, ce qui correspond au domaine de la
viscoélasticité linéaire, appelé, LinearVisco-ElasticRange ,LVE range. Dans ce domaine, le
comportement des microsphères est viscoélastique et les déformations enregistrées
sont récupérables.. Lorsque la déformation dépasse une certaine valeur, on remarque que G’
diminue et intercepte G’ au point de gel. A ce stade le comportement s’inverse et devient

54
 Résultats et discutions
CHAPITRE IV

celui d’un liquide plastique, auquel cas, les déformations ne sont plus réversibles.

Les valeurs du module de conservationG’ et le module de perte G’’ des autres essais sont
représenté dans le tableau ci-joint

Tableau 21. Valeur de G’ et G’’ des essais

Formulations G’ (%) G’’ Pas

F1 10 1.76

F2 10 1.23

F3 1 7,22

F4 31,6 2,45

variation de la viscosité en fonction de la vitesse de cisaillement

10000
Gammapoint vs VISCOSITE
Gammapoint vs tau

1000

100
Viscosité
Tau

10

0,1
0,0001 0,001 0,01 0,1 1 10 100 1000 10000

Gammapoint

Figure 24 . Courbe d’écoulement D’un assai type ( 2%)

55
 Résultats et discutions
CHAPITRE IV

 Commentaire :

La figure montre comment varie la viscosité apparente de l’émulsion d’HE en

fonction de la vitesse de cisaillement. On peut remarquer la présence de deux zones :

 Aux très faibles cisaillements, la viscosité enregistre un p e t i t plateau qui suggère un

comportement liquide newtonien. La viscosité de ce palier est dite viscosité au taux de
cisaillement nul (zero shear viscosity).
 Au-delà d’une certaine valeur de cisaillement critique, on remarque que la viscosité
commence à chuter progressivement, ce qui correspond au comportement d’un fluide
rhéofluidifiant. Le paramètre caractéristique de cette zone est la vitesse de cisaillement
critique, dénoté .
1.2.3 Résultats de la caractérisation rhéologique des microparticules :

 caractérisation des émulsions d’HE :

 Test de viscoélasticité :

Test de viscoélasticité des microparticules d'un essai type

1e+5

déformation vs g'
déformation vs g''
1e+4

1e+3
G' G''
pa

1e+2

1e+1

1e+0
0,0001 0,001 0,01 0,1 1 10 100 1000 10000

déformation%

Figure 25 . Courbe de viscoélasticité des microparticules d’un essai type (2%)

56
 Résultats et discutions
CHAPITRE IV

Tableau 22. Les valeurs de la viscoélasticité

Les formulations G’ (%) G’’ Pas

F1 10 1,47
F2 9,98 3,29
F3 9,97 4,96
F4 5,62 6,27

1.2.4 Résulta par spectroscopie infrarouge :

La spectroscopie infrarouge a été appliquée pour la caractérisation de :
- L’alginate de sodium
- Les quatre formulations
1/-Spectre IR de L’alginate de sodium :
 Le spectre d’alginate est présenté sur la figure 26 les bandes caractéristiques sont :

 3257 cm-1 : une large bande caractéristique du groupement OH

 1597 cm-1 : bandes caractéristiques des groupements carboxylate COO- asymétrique
 1407 cm-1 : bandes caractéristiques des groupements carboxylates COO- symétrique
 1025 cm- 1 : bande caractéristique des groupements C-O-C
 947 cm-1 : bande caractéristique d’un composé cyclique

57
Résultats et discutions
CHAPITRE IV

58
Figure 26. Le spectre infrarouge de l’alginate de sodium.
 Résultats et discutions
CHAPITRE IV

2/-Spectre IR-TF des microparticules :

- Les figures ci-dessous représentent le spectre I
Figure 27. Spectre IR des Microparticules de la formule 4 entre 450 et 4000 cm-1

59
 Résultats et discutions
CHAPITRE IV

 En comparant les spectres IR de Thymus vulgaris à celui des microparticules, nous

remarquons l’apparition de toutes les bandes qui sont déjà apparues dans le spectre IR de
Thymus vulgaris Donc il n’y a pas de modification de la structure suite à une interaction. Il
y a apparition des bandes correspondantes à l’alginate de sodium situées à 3257 cm-1, 1597
cm-1 et 1407 cm-1. [60]

1.2.5 Etude de libération in vitro :

Les figures suivants représentent le pourcentage de dissolution des quatre formules

dans Ph=1,2 et Ph=6,8

Figure 28 . Le pourcentage de dissolution des formulations à ph 1.2.

 Commentaire :
A ph 1.2 la libération de l’HE à partir des microparticules est faible (Inférieur à 25%à la
première heure) et ce raison de l’insolubilité de la matrice dans ce milieu.

60
 Résultats et discutions
CHAPITRE IV

Figure 29Le pourcentage de dissolution 6.8

 Commentaire :
A partir des résultats obtenus, le profil de dissolution essais obtenus présente un caractère
ralenti qui se prolonge sur 4H ceci démontre le type à libération prolongée de l’HE à partir
des formulations réalisées.

1.3 Résulta Caractérisations de l’émulgel :

1.3.1 Caractérisation macroscopique :
 Aspect et couleur : La figure ci-dessous confirme que la préparation possède un aspect
homogène et de couleur blanche caractérisé et d’un étalement facile.

Figure 30 . Emulgel à base de l’HE de Thymus vulgaris 0.5%.

61
 Résultats et discutions
CHAPITRE IV

 Odeur : La préparation d’émulgel a une odeur caractéristique de l’huile essentielle de

Thymus vulgaris.
1.2.3 Résulta Caractérisation microscopique :
 Microscope Optique : Les deux émulgels a examiné sous un microscope à lumière
pour étudier la structure globulaire de la base du gel, ils sont dilués de manière appropriée
et examiner au microscope optique avec un grossissement de 4 et 10.

Figure 31. Grossissement ×4

Figure 32 . Grossissement ×1

62
 Résultats et discutions
CHAPITRE IV

 Les photos microscopiques démontrent un aspect homogène avec des globules de

l’HE très petits, de forme régulière dispersé de façon homogène .

1.3.3 Résulta Caractérisation physico-chimiques

 Mesure de pH :
Les deux formules de l’émulgel préparés à base de Thymus vulgaris possède un pH de
5.807 et 5.709 conformes aux normes établies par les recommandations relatifs aux
préparations semi solides (pH = 5.5-6.5).

Figure 33. Mesurer le PH pour les deux formules de l’émulgel préparés à base de Thymus
vulgaris
 Evaluation de la stabilité :
Centrifugation : L’observation visuelle indique que les deux préparations sont stables
(pas de séparation des phases) avec une couleur homogène comme est montré dans la figure
34 ci- dessous.

Avant Après
Figure 34. Résultat de test de centrifugation des deux formules de l’émulgel 1%-2%
respectivement.

63
 Résultats et discutions
CHAPITRE IV

1.3.4 Résulta Caractérisation rhéologique :

Variation de la viscosité en fonction de la vitesse de cisaillement

10000

Gamma point vs emulgel E1

1000 Gamma point vs Emilgel E2
Viscosité Pa.s

100

10

0,1
0,01 0,1 1 10 100 1000 10000

Gamma point

Figure 35 . courbe de la viscoélasticité des émulgels

 Commentaire :
La figure montre la variation de la viscosité apparente en fonction de la vitesse de
cisaillement des eux essais emulgel réalisés. On remarque qu’on a un seul tronçon, au-delà
d’une certaine valeur de cisaillement critique, on remarque que la viscosité commence à
chuter progressivement ce qui correspond au comportement d’un fluide rhéofluidifiant, et
ce pour les deux essais , avec une viscosité plus importante pour l’essai 2 pour lequel la
concentration de l’agent gélifiant (CARBOPOL) est plus importante .

1.3.5 Résulta évaluation des activités anti microbienne et antifongique :

 Résultat du Test de l’activité antibactérienne et antifongique

Après 24heurs d’incubation des boites ensemencées, les résultats sont présentés dans
le (Tableau 23)

64
 Résultats et discutions
CHAPITRE IV

Les résultats de l’activité antimicrobienne et antifongique des émulgels obtenues, par

mesure des diamètres d’inhibition de la croissance des microorganismes, sont reportés dans
les figures (36) et le tableau 6 :

Escherichia coli Bacillus subtilis

Aspergillus Pseudomonas aeruginosa

Figure 36 . Les résultats de l’activité antimicrobienne et antifongique des émulgels obtenues

Tableau 23 . Diamètres d’inhibition en mm provoqués par l’emulgel

Les souches Le diamètre d’inhibition Sensibilité vis-à-vis de

(mm) l’émulgel
Aspergillus 16.45 Très sensible

65
 Résultats et discutions
CHAPITRE IV

Escherichia coli >20mm absence totale Extrêmement sensible

Bacillus subtilis 15.9 Très sensible

Pseudomonas >20mm absence totale Extrêmement sensible

aeruginosa

 Discussion des résultats :

Les résultats ci-dessus concernant l’activité antimicrobienne et antifongique « in vitro »

obtenue à l’aide de la méthode de diffusion sur gélose (aromatogramme) montrent que
l’activité antibactérienne et antifongique du Thymus vulgaris testé est en fonction de la
bactérie cible.
Il s’est avéré qu’aucune zone d’inhibition autour des disques n’a été observée vis-à-vis de
Escherichia coli et Pseudomonas aeruginosa. Ces bactérie possède un potentiel de résistance
très élevé visa vis de l’émulgel.
En revanche, Bacillus subtilis et Aspergillus ont manifesté une sensibilité appréciable vis-à-
vis de l’émulgel, surtout pour la 2ème bactérie.

66
 Conclusion Générale

De nos jours, le monde industriel et plus précisément l'industrie pharmaceutique, porte un

intérêt particulier sur la résolution des problèmes liés à la stabilité, l'efficacité, l'administration,
le contrôle de la vitesse et le site de libération des matières actives dans les différentes formes
galéniques. La microencapsulation connait donc un essor important dans ce domaine, où elle
trouve de nombreuses applications et répond à pas mal de difficultés.

Le développement d'un procédé d'encapsulation requiert une démarche complexe qui

consiste à choisir son type, définir les matières premières utilisables, étudier leurs compositions
et les paramètres opératoires à exécuter.

L'utilisation des plantes médicinales en phytothérapie présente un grand intérêt dans la

recherche biomédicale. Ce regain d'intérêt vient d'une part du fait que les plantes médicinale
représentent une source inépuisable de substances et de composés naturels bioactifs et d'autre
part du besoin de la recherche d'une meilleure médication par une thérapie plus douce sans
effets secondaires. Ces plantes possèdent des composés qui ont des propriétés anti
inflammatoires et anti oxydante.

Dans ce contexte, l'activité antioxydante, antimicrobienne et antifongique de l'huile

essentielle Thymus vulgaris, les tests physico-chimiques, organoleptiques, les comportements
rhéologiques ont été évalués.

Les spectres d'IRTF des différentes formulations enregistré mettant en évidence la présence
d'une substance aromatique, la fonction hydroxyle.

La formulation d'émulgel à base de Thymus vulgaris répond aux tests organoleptiques et

physico-chimiques.

La recherche de l'activité antioxydante, antimicrobienne et antifongique a montré que l'huile

essentielle de Thymus vulgaris ainsi que l'émulgel possèdent une activité antioxydante,
antimicrobienne et antifongique.

67
Annexe
Annexe 1 : Courbes d’écoulement des différents essais de solution polymériques
réalisées.

Figure 1. Courbes d’écoulement des solutions polymérique à T= 20°C

 Annexe 1 : Courbes des viscoplasticités des différentes formulations de réalisées.

Figure 2: Courbes de viscoélasticités des différentes formulations des microparticules.

Annexe 2 : Courbes des viscoplasticités des différents essais de solution polymériques
réalisées.
 Figure 3 : Courbes de viscoélasticités des différents essais de formulation des
solutionspolymériques.

Annexe 3 : Les Spectres IR des différentes formulations desMicroparticules

Figure 4 : Les spectre IR des différentes formulation de Microparticules.

Figure : Huile essentielle de thym à thymol utiliser

[1]. Malik S. Essential Oil Research: Trends in Biosynthesis, Analytics, Industrial (2019) .

Applications and Biotechnological Production. Springer International Publishing.703p.

[2]. Shaaban H.A.E., El-Ghorab A.H., et Shibamoto T. (2012). Bioactivity of Essential Oils
and Their Volatile Aroma Components: Review. Journal of Essential Oil Research 24 (2):

203-12.

[3]. Velasco J., Dobarganes C., et rquez-Ruiz G. (2003). Variables affecting lipid oxidation in
dried microencapsulated oils. Grasas y Aceites.54. (3):304-1.

[4]. eirão C, Duarte C, Bourbon A, Pinheiro A, Isabel N. Januário, António A. Vicente, M.

Luísa et Ivonne Delgadillo. (2013). Potentiel d'inuline pour l'encapsulation et la
livraisoncontrôlée de l'huile essentielle d'origan. Food Hydrocolloids. 33.199‑206

[5]. Weibin B., Li B., Li W., Chen W., Chen F., et Shu C. (2021). Encapsulation. In
Anthocyanins: Chemistry, Processing & Bioactivity. Springer Nature. Singapore. 185-200p

[6].Ben Messaoud G. Structuration et contrôle de l’architecture de capsules à cœur liquide à

base d’hydrogel d’alginate par association de biopolymères. [Thèse]. Université de Lorraine
;2015

[7]. Zahaf M. Formulation de microcapsules à libération prolongée à base de principe actif

très peu soluble ou insoluble et caractérisation biopharmaceutique [Mémoire]. Blida :
Université Blida1 ; département de chimie industrielle ; 2014.

[8]. Guendouzen H. Bousnan M. Formulation et caractérisation des microparticules à base

debiopolymères [Mémoire]. Bejaia : Université Abderrahmane Mira; 2017.

[9].S.-F. Lin, Y.-C. Chen, R.-N. Chen, L.-C. Chen, H.-O. Ho, Y.-H. Tsung, M.-T. Sheu, D.-Z.
Liu, Improving the stability of astaxanthin by microencapsulation in calcium alginate beads,
PloS one. 11 (2016) e0153685

[10].Vincent E. Les alginates et leurs applications en pharmacie et en ingénierie, application à

la construction d’un biomatériau [Thèse]. Unversité HENRI POINCARE - NANCY 1; 2010.

[11].Arrouj.C B.Hanane, Etude d’un procédé de microencapsulation par émulsification d’un

principe actif anti-inflammatoire et caractérisation biopharmaceutique. [Mémoire]. Bejaïa.
Université A. Mira ; 2016
[12].Benyahia S ; Abdallah Bouamrane.A. Encapsulation de la doxycycline et de l’aspirine :
étude de l’effet des paramètres physicochimiques de préparation sur la stabilité des
microcapsules d’alginate. [Mémoire]. Khemis Miliana : Université Djilali Bounaâma ; 2017.

[13].Merakchi A. Etude de la formulation d’un principe actif (la metformine) dans des
polymères biodégradables [mémoire]. Bejaia : Universite A.mira ; 2012.

[14].Gouin S. " Microencapsulation : industriel appraisal of existing technologies and trends".

Trends in Food Sci. and Technol. 15, (2007), 330- 347.

[15]. Desprairies M. Société Degussa- texturant systems. “ Les hydrocolloïdes autres que
l'amidon ”. Septembre 2002

[16]. Annadurai G., Juang R.-S and Lee D.-J. “ Factorial design analysis for adsorption of
dye on activated carbon beads incorporated with calcium alginate ”. Adv. Environ. Res. V.6,
(2002), 191-198

[17].Diliana, D. S. “ Arsenic oxidation of Cenibacterium arsenoxidans: Potential application

in bioremediation of arsenic contaminated water Thèse de l’Université Louis Pasteur, (2004),
Strasbourg I Et de l’Université de Sofia ”. St. Kliment Ohridsky."

[18]. Daemi H, Barikani M. Synthèse et caractérisation des nanoparticules d'alginate de

calcium, le sel d'homopolymannuronate de sodium et ses nanoparticules de calcium. Sci Iran.
2012;19(6) : 2023–8.

[19]. Florián-Algarín V et Acevedo A, Rhéologie et gélification thermotrope de solutions

aqueuses d'alginate de sodium.J Pharm Innov 5:37–44 (2010)

[20].Colwell R.R., Pariser ER, Sinskey Anthony J. Biotechnology of marine polysaccharides.

Proceedings of the third anual MIT Sea Grant College program lecture and seminar,1984.

[21].Papageorgiou, S. K., Katsaros F. K., Kouvelos E. P., Nolan J. W., Le Deit H. and

Kanellopoulos N. K. " Heavy metal sorption by calcium alginate beads from Laminaria
digitata ". J. Hazard. Mat. 137, (3), (2006), 1765-1772.

[22].Papageorgiou, S. K., Kouvelos E. P. and Katsaros F. K. " Calcium alginate beadsfrom

Laminaria digitata for the removal of Cu+2 and Cd+2 from dilute aqueousmetal solutions ".
Desalination. 224, (1-3), (2008), 293-306.
[23].Lagoa. R., Rodrigues J.R." Evaluation of dry protonated calcium alginate beads for

biosorption applications and studies of lead uptake ". Appl. Biochem. Biotechnol. 143,

(2007), 115-128.

[24].Raymond .C ,Rowe, Paul .J ,Sheskey, Marian.E, Quinn., “Handbook of pharmaceutical

excipients,6ème edition, Pharmaceutical Press” ,(2009).

[25]. S. Rabeau (2009), Etude d’un procede continu d’une microencapsulation basée sur un
micromélangeur , mémoire de doctorat, université Nancy ( France).

[26].Dawson. R. M. C, et al, Neugebauer.J. M., “Data for Biochemical Research, 3rd ed.,
Oxford University Press ,p. 289., Detergents: An overview”. Methods Enzymol., 182, 247
(NewYork, NY: 1986), (1990).

[27].SUNIL KUMAR YADAV, MANOJ KUMAR, ANUPAMAA TIWARA, ASHUTOSH

SHUKLA. « Emulgel »: A new approach for enhanced topical drug delivery. 2016.

[28].Pakhare A. V. ;Deshmane S. V. ;Deshmane S. S. ;Biyani K. R. Design and

Development of Emulgel Preparation Containing Diclofenac Potassium. Asian Journal of
Pharmaceutics. Oct-Dec 2017. (Suppl) 11 (4).

[29].Joshi B, Singh G, Rana AC, Saini S and Singla V. (2011). Emulgel: A comprehensive
Review on the recent advance in topical drug delivery. International Research Journal of
Pharmacy, 2(11), 66-70.

[30].Panwar S, Mukhopandhay S and Kothiyal P. (2015). Emulgel: A novel approach for

topical drug delivery system. International Journal of Pharmaceutical Research and Bio-
Science, 4(4), 209-223.

[31].Y. Cohen, C. Jacquot. « Abréges phamacologie ». s.l. : 5eme edition, 2001. pp. 326-327.

[32].Y.E. Hamza, A.M. Molokhia, I.I. Soliman, F.H. Ahmed, N.A. Soliman. « Formulation
and evaluation of topical preparations containing phenol and local vesicants » s.l. : Az J
Pharm Sci, 2002. pp. 412-432. 29.

[33]. Formulation, évaluations in vitro et in silico de l'émulsion d'huile essentielle d'anis

(Pimpinella anisum L.) avec des effets antimicrobiens améliorés Shamshir Khan 6 et Aftab
Alam 2,* Gels 2022
[34]. Rahmani Soraya, Kanoun Khedoudja ,Ali Nahari Abdelkader and Harir NoriaBio-
chemical study of essential oils of Thymus vulgaris on pathogenic strains responsible for
urinary tract infections International Journal of Minor Fruits, Medicinal and Aromatic Plants.
Vol. 8 (2) : 43- 53, December 2022.

[35].Ghaderinia P, Shapouri R. Assessment of immunogenicity of alginate microparticle

containing Brucella melitensis 16M oligo polysaccharide tetanus toxoid conjugate in mouse,
Banat's Journal of Biotechnology (2017), 8(16), 83–92.

[36].Anastas PT, Warner JC. Green Chemistry: Theory and Practice. New York:
OxfordUniversity.

[37].composition chimique, activités pharmacologiques et hémi-synthèse,, Québec:

l'université du québec à chicoutimi. Mémoire, 2008.

[38].Rao, V.P.S. Extraction of essential oil and its applications.” National Institute of
Technology Rourkela, (2006).

[39].H. Samir, Mise en évidence des huiles essentielles contenues dans les plantes
Pituranthos scoparius et Rhantherium adpressum de la région de Ghardaïa, Ouargla: mémoire
de magister,2009.

[40].l. rivera, Etude de l’extraction de métabolites secondaires de différentes matières

végétales en réacteur chauffe par induction thermomagnétique directe, France: Thèse de
l’institut national polytechnique de Toulouse,, 2006.

[41].M. E. LUCCHESI, Extraction Sans Solvant Assistée par Micro-ondes Conception et

Application à l’extraction des huiles essentielles, Université de La Réunion: thèse, 2005.

[42].A , Tayseer Sh. Mahmood , M. A J Alqayim , Shahad Tareq Antigoagulan and

antioxidant activities of thymus vulgaris in dexamethasone treated female adulte Ola E. 4
Jan., 2023.

[43]. A , Tayseer Sh. Mahmood , M. A J Alqayim , Shahad Tareq Antigoagulan and

antioxidant activities of thymus vulgaris in dexamethasone treated female adulte Ola E. 4
Jan., 2023.

[44].Parisa Gupta, Shabad Preet, Ananya & Navneet SinghPreparation of Thymus

vulgaris(L.) essential oil nanoemulsion and its chitosan encapsulation for controlling
mosquito vectorswww.nature.com/scientificreports Scientific Reports 2022) 12:4335
[45]. Desta, K.T.; Kim, G.S.; Abd El-Aty, A.; Raha, S.; Kim, M.-B.; Jeong, J.H.; Warda, M.;
Hacımüftüoğlu, A.; Shin, H.-C.; Shim, J.-H. Flavone polyphenols dominate in Thymus
schimperi Ronniger: LC–ESI–MS/MS characterization and study of anti-proliferative effects
of plant extract on AGS and HepG2 cancer cells. J. Chromatogr. B 2017, 1053, 1–8.

[46].Prabodh Satyal ,, Brittney L. Murray , Robert L. McFeeters and William N. Setzer

,Essential Oil Characterization of Thymus vulgarisfrom Various Geographical Locations
Alchemy Aromatic LLC, 621 Park East Blvd., New Albany, IN 47150, USA; Department of
Chemistry, University of Alabama in Huntsville, , 24 October 2016; .

[47]. Giedre Kasparaviciene,1,2 Zenona Kalveniene,1,2 Alvydas Pavilonis,3 Ruta

Marksiene,4 Jurgita Dauksiene,1 and Jurga BernatonieneEvidence-Based Complementary and
Alternative Medicine Volume 2018, Article ID 9431819.

[48]. TOUHAMI Aicha Etude chimique et microbiologique des composants des

Huiles essentielles de différents genres Thymus récoltées dans les régions de l’Est Algérien
pendant les deux périodes de développement DOCTORAT en Sciences Année : 2017

[49].Borugă O, Jianu C, Mişcă C, Goleţ I, Gruia AT, Horhat FG ;Thymus vulgaris essential
oil: chemical compositionand antimicrobial activity Journal of Medicine and Life Volume 7,
Special Issue 3, 2014

[50]. Mahmoudi, H.; Marzouki, M.; M’Rabet, Y.; Mezni, M.; Ouazzou, A.A.; Hosni, K.
Enzyme pretreatment improves the recovery of bioactive phytochemicals from sweet basil
(Ocimum basilicum L.) leaves and their hydrodistilled residue by-products, and potentiates
their biological activities. Arab. J. Chem. 2020, 13, 6451–6460.

[51]. Mohamed Nadjib Boukhatem , Mohamed Amine Ferhat, Abdelkrim Kameli , Fairouz
Saidi1 , Houria Taibi and Teffahi Djamel Valorisation de l’essence aromatique du Thym
(Thymus vulgaris L.) en aromathérapie anti-infectieus in aromatherapy International Journal
of Innovation and Applied Studies ISSN 2028-9324 Vol. 8 No. 4 Oct. 2014, pp. 1418-1431©
2014 .

[52].Vassiliou, E.; Awoleye, O.; Davis, A.; Mishra, S. Anti-Inflammatory and Antimicrobial
Properties of Thyme Oil and Its Main Constituents. Int. J. Mol. Sci. 2023, 24, 6936.
[53].Par : TOUHAMI AichaEtude chimique et microbiologique des composants des huiles
essentielles de différents genres Thymus récoltées dans les régions de l’Est Algérien pendant
les deux périodes de développement DOCTORAT en Sciences Année : 2017

[54] .Sateriale, D. Forgione, G. De Cristofaro, G.A.;Pagliuca, C. Colicchio, R.; Salvatore,

P.Paolucci, M.Pagliarulo, C. Antibacterial and Antibiofilm Efficacy of Thyme (Thymus
vulgaris L.) Essential Oil against Foodborne Illness Pathogens, Salmonella enterica subsp.
enterica Serovar Typhimurium and Bacillus cereus. Antibiotics 2023, 12, 485

[55].Abdelhamed, F.M.; Abdeltawab, N.F.; ElRakaiby, M.T.; Shamma, R.N.; Moneib,

N.A.Antibacterial and Anti-Inflammatory Activities of Thymus vulgaris Essential Oil
Nanoemulsion on Acne Vulgaris. Microorganisms 2022, 10, 1874.

[56].Sateriale, D.; Forgione, G.; De Cristofaro, G.A.; Pagliuca, C.; Colicchio, R.; Salvatore,
P.;Paolucci, M.; Pagliarulo, C. Antibacterial and Antibiofilm Efficacy of Thyme (Thymus
vulgaris L.) Essential Oil against Foodborne Illness Pathogens, Salmonella enterica subsp.
Enterica Serovar Typhimurium and Bacillus cereus. Antibiotics 2023, 12, 485.

[57].Hassiba Ben Bouali University of Chlef Bio-chemical study of essential oils of Thymus
vulgaris on pathogenic strains responsible for urinary tract infectio 1 Biotechnology and
Agronomic Sciences Department, Natural Sciences and Life Faculty, , Algeria. Molecular
Microbiology,Health and Proteomics Laboratory,Journal of Minor Fruits, Medicinal and
Aromatic Plants. Vol. 8 (2) : 43- 53, December 2022

[58]. Pandur, E.; Micalizzi, G.; Mondello, L.; Horváth, A.; Sipos, K.; Horváth, G. Antioxidant
and Anti-Inflammatory Effects of Thyme (Thymus vulgaris L.) Essential Oils Prepared at
Different Plant Phenophases on Pseudomonas aeruginosa LPS-Activated THP-1
Macrophages. Antioxidants 2022, 11, 1330.

[59].Essential Oils Composition and Antioxidant Properties of Three Thymus Species

Hamzeh Amiri Department of Biology, Lorestan University, P.O. Box 465, Khoram-Abad,
Iran Correspondence should be addressed to Hamzeh Amiri, amiri h [email protected] Received
17 January 2011; Revised 4 April 2011
[60]. R, Rowe. P, J, Sheskey. M, E, Quinn. Handbook of Pharmaceutical Excipients 6th Ed.

London, Chicago, Pharmaceutical Press.2009.

[61].National Library of Medicine. (2022). Explorez la chimie. Bethesda, États-Unis de

https://pubchem.ncbi.nlm.nih.gov

[62]. Alves Filho, E. G., Silva, L. M. A., de Brito, E. S., Castro, D. R., Bezerra, J. A.,
Sanches, E. A. & Campelo, P. H. (2021). Effet de la lueur et des décharges de barrière
diélectrique plasma sur le profilage chimique volatil et non volatil du jus de camu-camu.
Technologie des aliments et des bioprocédés, 14(7), 1275–1286.

[63] R., Diallo, D., Diarra, S., Ekoumon, C., Bougoudougou, F. 2006. Activité antibactérienne
et antalgique des deux recettes traditionnelles utilisées dans le traitement des infections
urinaires et la cystite au Mali. Mali Medical, 1: 18-24.