Université Batna 2
Faculté SNV
Département d’écologie et environnement
L3 Biotechnologie végétale
Module: Transgénèse végétale
COURS 1
CONSTRUCTION D’UNE PLANTE
TRANSGÉNIQUE
Dr. Bousnane N.H
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I. Historique
1982 : la première plante transgénique est mise au point. Il s'agit d'une plante de
tabac qui résiste à un antibiotique. Cette découverte ouvre la voie à
l'incorporation dans des plantes de nouvelles caractéristiques, telles que la
résistance à un insecte.
1985 : les premiers essais en champ de plantes transgéniques qui résistent à un
insecte, à un virus ou à une bactérie ont lieu aux États-Unis
1994 : l'Administration des produits pharmaceutiques et alimentaires (FDA)
autorise la mise sur le marché d'une tomate transgénique.
1995-1996 : la mise sur le marché du soja et du maïs transgéniques est autorisée,
et le premier coton transgénique est commercialisé aux États-Unis.
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Historique
1999 : des chercheurs allemands et suisses mettent au point une variété de riz, le
riz doré, qui est enrichi de bêta-carotène, ce qui stimule la production de la
vitamine A
2000 : le premier séquençage complet du
génome d'une plante, Arabadopsis thaliana,
offre aux chercheurs de nouvelles
connaissances sur les gènes qui sont
responsables de traits spécifiques dans de
nombreuses plantes cultivées
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Plante du Tabac attaqué par des champignons Alternaria alternaria, Alternaria solani.
Améliorer la résistance du tabac (Nicotiana tabacum)
Introduire un gène codant pour la chitinase (enzyme hydrolytique de la paroi
cellulaire) du champignon
Les plantes transformés est inoculées par des champignons pathogènes pour tester
leurs activités chitinase et l'expression des symptômes des maladies fongiques
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II. Définition
La transgènèse ou la transformation génétique est la
modification héréditaire d'un génome à la suite de
l'intégration et d'un gène étranger et son expression.
On dit qu'une plante est transgénique lorsqu'elle a acquis un
ou plusieurs caractères, non pas par
transfert de gènes entre deux plantes
parentales lors d'un croisement, mais
par génie génétique.
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III. Etapes de la transgénèse
Etape 1 : Identifier, isoler, intégrer et multiplier un gène
d’intérêt
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Le choix d’un caractère que l’on veut introduire dans la plante (qualité
nutritionnelle, la résistance à certains insectes, à certaines maladies, à
des herbicides, etc…)
Identifier les gènes à l’origine du caractère recherché. Ces gènes
d’intérêt peuvent provenir de tout organisme vivant, plante, animal ou
bactérie puisque le code génétique est universel.
Le gène d’intérêt isolé est intégré dans une construction génique
associant souvent un gène marqueur qui permet de sélectionner les
cellules qui ont intégré le gène d’intérêt.
La construction est ensuite multipliée (clonée) afin de disposer d’une
quantité suffisante d’ADN pour son introduction dans les cellules
végétales que l’on veut transformer.
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Etape 2 : Transférer le gène
a. Méthodes directes
Méthodes chimiques ou physiques
employées pour introduire un gène
étranger dans une cellule végétale.
On distingue, le traitement au
polyéthylèneglycol (P.E.G.),
l'électroporation et la biolistique.
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b. La transformation biologique (indirecte).
Cette technique utilise une bactérie du sol, Agrobacterium, qui a la
propriété de réaliser naturellement la transformation génétique d’une
plante, afin de la parasiter. Ainsi, une construction génique introduite
dans la bactérie (rendue avirulente au préalable) sera transférée dans
la plante et intégrée à son génome.
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Etape 3 : Régénérer et évaluer les plantes transformées
Après sélection des cellules transformées, régénérer les nouvelles
plantes transgéniques. Les cellules transformées se développent en cals.
Après quelques semaines, on observe le développement de pousses qui
seront placées dans un nouveau milieu de culture pour le
développement des racines. Quand les racines sont suffisamment
développées, les plantules sont repiquées en pot et acclimatées en
serre.
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Les plantes régénérées sont ensuite analysées aux niveaux :
Moléculaire : nombre de copies de transgène et intensité
de son expression.
Biochimique : présence de l’enzyme traduite et de son activité.
Physiologique : morphologie de la plante, paramètres de croissance,
photosynthèse, reproduction.
Agronomique : comportement en champ et paramètres agronomiques.
Ecologique : effet éventuel sur l’environnement.
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Etape 4 : Incorporer dans une variété commerciale
Les plantes transformées obtenues sont soumises à des croisements
contrôlés pour étudier les modalités de transmission du nouveau
caractère à la descendance
La transformation et la régénération étant des opérations délicates, le
génotype de la plante choisie est celui facilitant ces étapes. C’est
pourquoi les plantes retenues sont ensuite soumises à une succession
de rétrocroisements afin d’introduire le gène dans le matériel élite et
d’obtenir de nouvelles variétés commerciales exprimant ce caractère.
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