UNIVERSIDADE FEDERAL DE PERNAMBUCO
CENTRO DE CIÊNCIAS DA SAÚDE
DEPARTAMENTO DE CIÊNCIAS FARMACÊUTICAS
DISCIPLINA BIOQUÍMICA CLÍNICA
DOSAGEM DE BILIRRUBINA
EWELN CINTYA
KLEBER MEDEIROS
LARISSA XAVIER
PÁMINA RAFAELA
REBECA RODRIGUES
VANESSA MARIA
RECIFE-PE
Setembro de 2018
EWELYN CINTYA
KLEBER MEDEIROS
LARISSA XAVIER
PÁMINA RAFAELA
REBECA RODRIGUES
VANESSA MARIA
DOSAGEM DE BILIRRUBINA
Relatório apresentado pelos estudantes
Ewelyn Cintya, Kleber Cardoso, Larissa
Xavier, Pámina Rafaela, Rebeca
Rodrigues e Vanessa Maria do curso de
Farmácia da UFPE à disciplina
Bioquímica Clínica ministrada pelo Prof.
Ricardo Brandão, com a finalidade de
obtenção de nota parcial referente ao
semestre de 2018.2.
RECIFE-PE
Setembro de 2018
SUMÁRIO
1. INTRODUÇÃO....................................................................................................................... 3
2. OBJETIVO........................................................................................................4
3. MATERIAIS E MÉTODO.....................................................................................................
4. RESULTADOS E DISCUSSÃO...................................................................................6
5. CONCLUSÃO.........................................................................................................................
REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS......................................................................................
3
1 INTRODUÇÃO
A bilirrubina é uma substância amarelada encontrada na bile e que é produzida a partir
da degradação do heme, uma parte da hemoglobina presente nas hemácias. Estas circulam no
sangue durante cerca de 120 dias, após o que são destruídas. A hemoglobina é então
degradada, e a bilirrubina resultante é liberada no sangue, permanecendo no plasma sanguíneo
até ser eliminada nas fezes, principalmente, e na urina. Excesso de bilirrubina
(hiperbilirrubinemia) pode indicar problemas no fígado, baço, nos rins ou na vesícula biliar.
Existem dois tipos de bilirrubina circulantes - a não conjugada (ligada à albumina), também
chamada de bilirrubina indireta, e a conjugada, chamada de bilirrubina direta.
As bilirrubinas são medidas (dosadas) quando há suspeita ou para avaliar anemias
hemolíticas, doenças hepáticas ou das vias biliares. Essa dosagem é especialmente importante
em recém-nascidos com icterícia, pois um excesso de bilirrubina não conjugada no sangue
pode se depositar em partes do cérebro do bebê, causando lesões irreversíveis. A bilirrubina
eleva-se no soro na presença de lesões hepáticas, obstrução biliar ou quando a velocidade de
destruição dos glóbulos vermelhos está aumentada. A bilirrubina e dosada como total , direta
e indireta, sendo que esta última normalmente é calculada pela subtração da total menos a
direta.
Aumentos da bilirrubina não conjugada (indireta) podem ser causados por anemias
hemolíticas, em que há aumento da destruição de hemácias, como a anemia falciforme,
reações a transfusão de sangue (transfusionais), hemorragias internas ou grandes hematomas.
O aumento da bilirrubina indireta é observado na síndrome hemolítica, na icterícia neonatal,
na síndrome de Crigler-Najjar e na doença de Gilbert.
Aumentos com predomínio da bilirrubina conjugada (direta) sugerem lesão hepática ou
obstrução biliar e as causas mais comuns de lesão hepática incluem hepatites virais, consumo
excessivo de álcool e reação a medicamentos. A bilirrubina direta está aumentada nas
hepatites agudas e crônicas, nas reações tóxicas a várias drogas e nas obstruções do trato
biliar.
A icterícia é a pigmentação amarela que acomete a pele, esclera e membranas mucosas,
devido ao acúmulo de bilirrubina ou de seus conjugados. É um indicativo clínico quando as
concentrações plasmáticas de bilirrubina total excedem 3,0 mg/dL, ainda que graus
menores também podem ter significância clínica.
4
2 OBJETIVOS
Dosar a bilirrubina direta na amostra soro
Dosar a bilirrubina total na amostra soro
A partir da dosagem de bilirrubina direta e total verificar o teor de bilirrubina indireta
na amostra soro.
Observar se os valores encontrados estão dentro ou fora dos valores de referência para
cada uma das bilirrubinas.
5
3 MATERIAIS E MÉTODO
Materiais:
Pipeta automática
Ponteiras
Luvas
Tubos de ensaio
Reagente 1 e reagente 2 para preparação do diazo reagente
Água
Amostra
Equipamento de espectrofotômetro
Soro controle
Frasco de vidro
Método:
Preparo do soro controle:
Adicionou-se 5 mL de água destilada ao frasco do soro controle, o frasco foi fechado e
agitado em círculos por 30 minutos.
Preparo do diazo reagente:
Foi colocado em um recipiente de vidro 1 gota do reagente 1, 1,5 mL do reagente 2 e
homogeneizou-se.
Preparo das amostras:
Branco: Em um tubo de ensaio foi colocado 100μl do reagente 2, 900μl de água e 60μl da
amostra de soro.
Bilirrubina Direta: Em outro tubo de ensaio adicionou-se 100μl do diazo reagente, 900μl de
água e 60μl da amostra de soro.
Bilirrubina Total: A um tubo de ensaio diferente foi adicionado 100μl do diazo reagente,
900μl do reagente 3 e 60μl da amostra de soro.
6
. Posteriormente seus conteúdos foram lidos em um espectrofotômetro no comprimento de
onda de 525nm.
Após a obtenção dos resultados, foram feitos cálculos a fim de encontrar a concentração de
bilirrubina direta, indireta e total, esses cálculos estão descritos nos resultados.
4 RESULTADOS E DISCUSSÃO
O exame de bilirrubina auxilia o diagnóstico, por exemplo, de problemas no fígado, vias
biliares ou anemia hemolítica, já que a bilirrubina é produto da destruição das hemácias.
Existem dois tipos principais que podem ser dosados, sendo a bilirrubina direta que se
apresenta conjugada ao ácido glicurônico ou a bilirrubina indireta, não conjugada. Os valores
de referência para a dosagem de bilirrubinas são:
Bilirrubinas totais: 0,1-1,2mg/dL
Bilirrubinas diretas: até 0,4mg/dL
Bilirrubinas indiretas: 0,1-0,8mg/dL
A hiperbilirrubinemia causada pelo aumento significativo da bilirrubina direta, quando
comparada a bilirrubina indireta, pode indicar uma lesão hepática ou obstrução biliar,
impossibilitando a sua eliminação. Algumas condições que causam essa quadro são: hepatite,
cirrose, colestase síndrome como a síndrome de Dubin-Johnson, entre outras.
Nos casos em que a hiperrrubilinemia é causada por aumento significativo da bilirrubina
indireta, em comparação com a direta, pode ser um indicativo de problemas como: icterícia do
recém-nascido, síndrome de Crigler-Najjar, icterícia hemolítica, entre outras.
Níveis de bilirrubina mais baixos que o normal raramente indicam uma condição grave e
não são motivo para se preocupar.
A partir dos dados obtidos na aula prática, com a análise das amostras em
espectrofotômetro, foram observadas as seguintes dosagens:
Absorbâncias:
Foram medidas as absorbâncias das amostras tratadas de bilirrubina direta, indireta e o
branco. Os valores foram consolidados na Tabela 1.
7
Amostra 1
Absorbância
Branco 0
Bilirrubina Direta 0,006
Bilirrubina Total 0,010
Tabela 1: Consolidação de resultados para as absorbâncias obtidas.
Cálculo do Fator:
Fator (F)= (Concentração do Padrão) ÷ (Absorbância do Padrão)
Fator = (10) ÷ (0,480) = 20,83
Cálculo para obtenção da concentração de Bilirrubina:
- Bilirrubinas totais (BT):
BT = F x Absorbância
BT = 20,83 x 0,010
BT = 0,208 mg/dL
- Bilirrubina direta (BD):
BD = F x Absorbância
BD = 20,83 x 0,006
BD = 0,125 mg/Dl
- Bilirrubinas indireta (BI):
BI = BT – BD
BI = 0,208 mg/dL - 0,125 mg/dL
BI = 0,083 mg/dL
8
5 CONCLUSÃO
Em comparação com os valores de referência da bilirrubina direta (até 0,4 mg/dL) e
indireta (0,1 – 0,8 mg/dL) em indivíduos adultos, os níveis dosados no paciente para fração
conjugada encontram-se, nas análises realizadas, dentro do intervalo determinado (0,125
mg/dL). Já os níveis de bilirrubina indireta, que é a fração lipossolúvel não-conjugada,
encontram-se abaixo do estabelecido (0,08 mg/dL). Entretanto, não caracteriza nenhuma
patologia associada ao metabolismo do Heme. Assim sendo, apesar do indivíduo não possuir
nenhum quadro patológico em relação as dosagens realizadas, recomenda-se a realização de
exames complementares para maior satisfação em relação aos parâmetros clínicos observados.
9
REFERÊNCIAS:
Disponível em:<https://labtestsonline.org.br/tests/bilirrubinas>, acessado em 24/09/18
Disponível em:<https://www.indice.eu/pt/medicamentos/DCI/bilirrubina/informacao-geral >,
acessado em 24/09/18
Disponível em:<https://edoc.site/bioquimica-basica-valter-t-mottapdf-pdf-free.html>,
acessado em 24/09/18