BILIRRUBINAS

Profª. Regina Helena Pires

BILIRRUBINA

A maior parte da
bilirrubina (80-85%)
provém da degeneração
de hemácias velhas
(cerca de 0,8% das
hemácias são
destruídas diariamente)
em função do
catabolismo da
molécula de
hemoglobina. O restante
provém de outras
proteínas hêmicas
(citocromos e
mioglobina).
BILIRRUBINA

Na circulação a
hemoglobina dissocia-
se nos dímeros α e ,
que são ligados à
HAPTOGLOBINA de
forma a preservar o
ferro corpóreo e os
depósitos proteicos.
Assim, a haptoglobina
“entrega” a
hemoglobina à células
do sistema retículo
endotelial (macrófagos).
 BILIRRUBINA

No citoplasma dos macrófagos, a hemoglobina é quebrada em

globina (proteína) e heme. A globina é digerida em aminoácidos
que serão reutilizados.

A) GRUPAMENTO HEME:

Consiste de um átomo ferroso e um

anel tetrapirrólico – PROTOFORFIRINA.

Porção orgânica derivada de 8 resíduos

de glicina e de succinil-CoA.
 BILIRRUBINA
PERDA DO ÁTOMO FERRO:

O heme é cindido por ação da enzima heme-oxidase. Perde o

ferro e a porfirina tem seu anel tetrapirrólico aberto a nível de
uma das pontes de meteno, com liberação de uma molécula de
monóxido de carbono (CO). É a única reação metabólica que
produz CO. O pigmento que resulta é a biliverdina.
 BILIRRUBINA

c) CONVERSÃO DA
BILIVERDINA EM BILIRRUBINA:
A biliverdina sofre a ação da
enzima biliverdina-redutase e
passa a bilirrubina, um pigmento
amarelo. A bilirrubina (na forma
não-conjugada, ou indireta) é
liberada pelas células do SRE e,
sendo pouco hidrossolúvel,
circula no plasma ligada à
albumina. Esta variedade de
bilirrubina é processada para
eliminação no fígado.
CICLO EXTRA-HEPÁTICO DA BILIRRUBINA
MECANISMO DE TRANSPORTE DA
BILIRRUBINA AO FÍGADO
 BILIRRUBINA
O metabolismo hepático da bilirrubina envolve 3 fases:
a) captação
b) conjugação
c) excreção
 BILIRRUBINA
a) CAPTAÇÃO:

A bilirrubina é removida da
albumina na superfície
sinusoidal dos hepatócitos por
um sistema de alta capacidade. É
um sistema de transporte
facilitado que permite equilibrar
a concentração de bilirrubina
dentro e fora do hepatócito.
Como a bilirrubina que entra é
logo ligada a proteínas
chamadas ligandinas, a
concentração de bilirrubina livre
no citoplasma é sempre baixa,
de modo que o equilíbrio é
favorável à entrada de mais
bilirrubina.
BILIRRUBINA

b) CONJUGAÇÃO NO
HEPATÓCITO:
A bilirrubina não conjugada é
captada pelos hepatócitos,
que adicionam 2 moléculas de
ácido glicurônico à bilirrubina
por molécula, catalizada pela
enzima UDP-glicuronil-
transferase, tornando-a
hidrossolúvel. Esta forma, dita
conjugada ou direta, é
secretada ativamente pelos
hepatócitos para o interior
dos canalículos biliares
existentes entre eles. É a
forma encontrada na bile.
 BILIRRUBINA

c) SECREÇÃO:

É um processo de transporte ativo com consumo

energético, e o passo limitante de todo o processo. Ocorre
a nível da membrana do hepatócito que constitui a parede
dos canalículos biliares. Quando este processo está
diminuído, a bilirrubina que continua sendo conjugada no
citoplasma do hepatócito não pode ser excretada na bile e
termina por passar para o sangue, um processo chamado
regurgitação. Normalmente, toda bilirrubina excretada na
bile está na forma conjugada.
 BILIRRUBINA

A ampola hepatopancreática,
também chamada de ampola de
Vater (Abraham Vater - 1684-1751),
é formada pela união do ducto
pancreático com o ducto colédoco
(biliar comum). A ampola está
especificamente localizada na
papila maior do duodeno. Vários
músculos controlam o fluxo de bile e
de suco pancreático através da
ampola: o esfíncter da ampola
hepatopancreática controla a
introdução da bile e das secreções
pancreáticas no duodeno, assim
como previne a entrada do
conteúdo do duodeno na ampola.
 BILIRRUBINA
DESTINO FINAL DA BILIRRUBINA

No íleo e intestino grosso, os

glicuronatos são removidos
por enzimas bacterianas (b-
glicuronidases), resultando em
urobilinogênios, que são
incolores. Estes são
oxidados a compostos
corados, estercobilinas, que
dão cor às fezes. Parte do
urobilinogênio reabsorvido nos
intestinos (ciclo
enterohepático) é excretado na
urina (urobilina), dando-lhe
coloração amarela.
CICLO HEPÁTICO DA BILIRRUBINA
 INTERPRETAÇÃO DOS VALORES DE
BILIRRUBINA
Acompanhando os mecanismos envolvidos no
metabolismo da bilirrubina, é possível correlacionar o
aumento de seus níveis séricos com alterações de uma
dessas etapas.
Os níveis séricos da bilirrubina indireta são determinados
pela velocidade de produção e pela velocidade de
remoção dessa bilirrubina da circulação. Os distúrbios
que alteram a capacidade de depuração do fígado estão
ligados à captação e/ou conjugação hepática.

Os níveis séricos da bilirrubina direta são determinados

pela capacidade de excreção da bilirrubina pelo fígado ou
seja, pela integridade fisiológica do hepatócito e da
permeabilidade das vias biliares intra- e extra-hepáticas.
 PATOLOGIAS HEPÁTICAS

É a pigmentação da pele, mucosa e

esclera ocular pela bilirrubina, em
ICTERÍCIA
conseqüência de
hiperbilirrubinemia. A concentração
de bilirrubina no soro é 0,5 a 1,0
mg%. A icterícia torna-se perceptível
a partir de níveis de bilirrubinemia de
2 a 2,5 mg%.

Classificação simples das icterícias:

a) Icterícia pré-hepática ou hemolítica

(predomina bilirrubina não-
conjugada- indireta)

b) Icterícia hepática ou por lesão

hepatocelular e Icterícia pós-hepática
ou colestática (onde predomina a
bilirrubina conjugada- direta).
HIPERBILIRRUBINEMIA PREDOMINABTEMENTE NÃO-CONJUGADA
(INDIRETA)

A) Por superprodução de bilirrubina

Ocorre principalmente por superprodução de bilirrubina na destruição

excessiva de hemácias (hemólise). A quantidade de bilirrubina não-
conjugada excede a capacidade do fígado de removê-la. A bilirrubina
total fica entre 3-5 mg %, com forte predomínio da forma não-
conjugada. Porém, há cerca de 15% ou menos de forma conjugada.
O aumento da bilirrubina conjugada é explicado como uma
insuficiência da secreção da mesma para os canalículos biliares.
Como há muita bilirrubina não conjugada para ser processada, nem
toda bilirrubina conjugada que se forma é secretada para a bile. Parte
reflui para o sangue a partir dos próprios hepatócitos, aumentando os
níveis séricos de bilirrubina conjugada (normalmente próximos de
zero).
 HIPERBILIRRUBINEMIA PREDOMINABTEMENTE NÃO-CONJUGADA
(INDIRETA)

B) Por decréscimo da conjugação - Icterícia fisiológica do recém-nascido.

Quase todo RN apresenta

hiperbilirrubinemia não-conjugada
entre o 2°. e 5°. dias, que geralmente
não excede 5 mg%. O motivo é que a
glicuronil-transferase (a enzima de
conjugação) está ainda “imatura”. A
enzima pode ser induzida pelo
tratamento da mãe ou da criança com
fenobarbital. A icterícia fisiológica não
está presente ao nascimento porque a
placenta retira a bilirrubina fetal e a
transfere ao sangue materno. No
prematuro, a icterícia fisiológica pode
ser mais acentuada.
HIPERBILIRRUBINEMIA PREDOMINABTEMENTE NÃO-CONJUGADA
(INDIRETA)

c) ERITROBLASTOSE FETAL / KERNICTERUS

Eritroblastose fetal
(incompatibilidade para fator Rh)
O nível de bilirribina não-conjugada
pode atingir 20 mg% ou mais. Como
a barreira hemoencefálica no RN, é
ainda imatura, a bilirrubina pode
atravessá-la e passar ao tecido
nervoso, onde é tóxica, causando
morte de neurônios. O tecido fica
impregnado de bilirrubina, tomando
cor amarela. A doença recebe o
nome de kernicterus (kern em
alemão significa núcleo) e causa
crises convulsivas, sendo fatal ou
deixando graves sequelas.
HIPERBILIRRUBINEMIA PREDOMINABTEMENTE NÃO-CONJUGADA
(INDIRETA)

c) KERNICTERUS

Usa-se fototerapia para

evitar o kernicterus que
consiste na forte
iluminação da criança
com luz branca ou azul,
levando a foto-
isomerização da
bilirrubina não-
conjugada a formas
hidrossolúveis que
podem ser eliminadas na
bile sem necessidade de
conjugação.
HIPERBILIRRUBINEMIA PREDOMINABTEMENTE NÃO-CONJUGADA
(INDIRETA)

d) SÍNDROME DE GILBERT

Na síndrome de Gilbert pode

haver uma deficiência de
ligandina, (1 no diagrama) a
proteína que se liga à bilirrubina
e a transporta ao retículo
endoplasmático para
conjugação com a enzima
UDPglucuronil transferase,
resultando em decréscimo da
conjugação (2 no diagrama) e
consequentemente excreção
insuficiente da bilirrubina na bile.
HIPERBILIRRUBINEMIA PREDOMINABTEMENTE NÃO-CONJUGADA
(INDIRETA)

e) SÍNDROME DE CRIGLER-NAJJAR

Conjugação da bilirrubina
com o ácido glicurônico é
insuficiente ou ausente, de
maneira que a bilirrubina não
pode ser excretada nos
canículos biliares.
HIPERBILIRRUBINEMIA PREDOMINANTEMENTE CONJUGADA
(DIRETA)

Ocorre em duas situações básicas:

a) Lesão hepática difusa, como nas hepatites e

cirroses.
b) Síndromes colestáticas.
 HIPERBILIRRUBINEMIA PREDOMINABTEMENTE CONJUGADA
(DIRETA)
Em uma hepatite por virus há lesão dos
hepatócitos, envolvendo as três fases do
metabolismo da bilirrubina. A secreção é
A) Icterícia hepática (hepatites) o mais atingido. Em consequência,
grande quantidade de bilirrubina
conjugada entra no sangue. A bilirrubina
não-conjugada também aumenta devido à
redução da captação e da
conjugação. Ocorrem
• Ruptura de canalículos biliares, em
virtude da necrose dos hepatócitos, que
delimitam os canalículos. (Lembrar que
cada canalículo fica entre dois
hepatócitos vizinhos e não tem parede
própria).
• Compressão de canalículos por
hepatócitos balonizados.
• Obstrução de ductos biliares
intrahepáticos terminais (colangíolos) por
células inflamatórias.
 HIPERBILIRRUBINEMIA PREDOMINANTEMENTE CONJUGADA
(DIRETA)

B) Icterícia hepática (cirroses)

Nas cirroses há desorganização da arquitetura do lóbulo hepático,

com dificuldade na excreção de bile e compressão de ductos biliares
intrahepáticos por nódulos degenerativos.
 HIPERBILIRRUBINEMIA PREDOMINANTEMENTE CONJUGADA
(DIRETA)

c) Icterícia pós-hepática (Síndromes colestáticas)

As principais causas são

cálculos biliares a nível do
canal colédoco e tumores que
comprimem as vias biliares
extrahepáticas, como o
carcinoma da cabeça do
pâncreas.
Provocam hiperbilirrubinemia
predominantemente conjugada,
bilirrubinúria e fezes
descoradas (acólicas). A
bilirrubinemia sobe até 30 a 40
mg % e tende a estabilizar-se,
provavelmente por ser
compensada pela excreção
renal (a bilirrubina conjugada é
filtrada nos glomérulos).
 Bilirrubina
direta

Bilirrubina indireta
ASPECTOS DAS AMOSTRAS BIOLÓGICAS

Soro ictérico
 DOSAGEM LABORATORIAL DAS
BILIRRUBINAS

FUNDAMENTO: A bilirrubina reage com o diazo reagente (ácido sulfanílico +

nitrito de sódio), formando azobilirrubina de coloração vermelha, cuja
absorbância medida em 525 nm é diretamente proporcional à concentração
de bilirrubina na amostra.
A reação da bilirrubina direta (conjugada) ocorre em meio aquoso enquanto
que a reação da bilirrubina indireta e da total (não conjugada) requer a
presença de um acelerador (benzoato + cafeína). A bilirrubina indireta é
calculada pela diferença entre bilirrubina total e bilirrubina direta.

AMOSTRA: SORO e PLASMA (heparina ou EDTA).

Quando protegido da luz o analito é estável 4 dias entre 2-8 ºC.