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Aula Prática Imunologia - Técnicas de Diagnóstico

O documento apresenta diversas técnicas de imunodiagnóstico utilizadas na Imunologia Veterinária, incluindo Imunofluorescência, Imunoperoxidase, ELISA, Imunohistoquímica e Imunocromatografia. Cada técnica é descrita com suas vantagens, desvantagens e aplicações específicas, como identificação de antígenos e diagnóstico de infecções. Exemplos práticos e links para vídeos explicativos também são fornecidos.

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lisandrooliveirafreitas
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Aula Prática Imunologia - Técnicas de Diagnóstico

O documento apresenta diversas técnicas de imunodiagnóstico utilizadas na Imunologia Veterinária, incluindo Imunofluorescência, Imunoperoxidase, ELISA, Imunohistoquímica e Imunocromatografia. Cada técnica é descrita com suas vantagens, desvantagens e aplicações específicas, como identificação de antígenos e diagnóstico de infecções. Exemplos práticos e links para vídeos explicativos também são fornecidos.

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23/02/2022

Técnicas:
Disciplina de Imunologia Veterinária
• Imunofluorescência (IF)
• Imunoperoxidase (IPX)
Técnicas de imunodiagnóstico • Imunohistoquimica (IHC)
• ELISA
• Imunocromatografia

Profa. Paula Finger

Fevereiro, 2022

Imunofluorescência direta
IMUNOFLUORESCÊNCIA (IF) IFD
1.

• Direta ou Indireta MATERIAL


NEGATIVO

DE CAMPO

• Marcação com fluorocromo


+ CONJUGADO
ESPECÍFICO
• Vantagens: Rápida, específica

• Desvantagens: custo, dificuldade automação, 2.


sensibilidade limitada POSITIVO
SERVE PARA
IDENTIFICAR ANTÍGENOS

Imunofluorescência indireta IFI Imunofluorescência indireta IFI


identificação de antígeno titulagem de anticorpos

MAT. CAMPO OU OU
1a FASE 1a FASE
+ ANTICORPO OU + OU
ANTIGENO ANTIGENO ANTICORPOS
DESCONHECIDO específico CONHECIDO DA ESPÉCIE
(Ex.coelho) PESQUISADA

2a FASE NEGATIVO 2a FASE NEGATIVO

COM PLEXO
Ag + Ac + COM PLEXO
Ag + Ac +
CONJUGADO POSITIVO CONJUGADO POSITIVO
ANTIESPÉCIE ANTIESPÉCIE
Anti-Ig coelho

1
23/02/2022

IMUNOFLUORESCÊNCIA
• Microscópio de fluorescência • https://youtu.be/Yq8DFQQHR2A

Imunofluorescência indireta (IFI):


identificação do antígeno IMUNOPEROXIDASE (IPX)
• Muito utilizada em diagnóstico de infecções
víricas

• Utilização de células ou tecidos

• Marcação com enzima – substrato - cor


• IFI: Vírus de Gumboro em RK 13
• Soro anti vírus em coelho
• Conjugado anti-coelho

IMUNOPEROXIDASE IMUNOPEROXIDASE (IPX)

2
23/02/2022

IMUNOPEROXIDASE (IPX) ELISA

Ensaio imunoenzimático
-- E L I S A -- ELISA
Porção da Enzima
(peroxidase ou fosfatase alcalina)
Ag
1. Sensibilização da Placa
com antígeno Conjugado
2. Lavagem (anti-IgG)

3. Adição do Ac. de Teste Ag

4. Lavagem
Substrato
5. Adição do anticorpo
marcado (conjugado) Ag
6. Lavagem
7. Adição do Substrato da
enzima Ag

8. Desenvolvimento da cor

Exemplos de
ELISAs

https://www.youtube.com/watch?v=dW8XKeLkY3g

3
23/02/2022

IMUNOHISTOQUÍMICA (IHC)
• Detecção de antígenos em fragmentos de
tecidos
• Aplicações:
– Presença de neoplasias
– Caracterizar sítios de tumores
– Subtipar as neoplasias
– Detectar agentes infecciosos

IMUNOCROMATOGRAFIA
• https://www.youtube.com/watch?v=N8jIpApp • Testes rápidos
9Ac

TESTES RÁPIDOS

https://youtu.be/HzLWus7ImfY

4
23/02/2022

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