ICSC48 - Classificação dos animais de laboratório quanto ao status sanitário
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1) O documento classifica os animais de laboratório em três grupos de acordo com seu status sanitário: animais convencionais, animais gnotobióticos e animais livres de patógenos específicos (SPF). 2) Animais convencionais possuem microbiota indefinida e são mantidos sem barreiras sanitárias rigorosas. Animais gnotobióticos são livres de microrganismos ou contaminados intencionalmente com microrganismos específicos. Animais SPF são livres de microrganismos patogênicos
ICSC48 - Classificação dos animais de laboratório quanto ao status sanitário
- 1. Universidade Federal da Bahia Instituto de Ciências da Saúde Classificação dos Animais de Laboratório quanto ao Status Sanitário 1
- 2. Introdução • Confiabilidade dos resultados de uma pesquisa... Uniformidade do grupo animal Menor variabilidade individual e dos resultados Menos indivíduos para alcançar a exatidão científica 2 GenéticaSanitária
- 3. Status sanitário • Relação dos animais com o seu ambiente • Organismos associados aos animais • Organismos presentes dentro dos limites do ambiente físico e barreiras sanitárias • Barreiras sanitárias eficientes - menores as chances de contaminação dos animais • Microbiota / Microbioma Classificação em três grupos 1. Animais Convencionais 2. Animais Gnotobióticos 3. Animais Livres de Germes Patogênicos Específicos (Specific Pathogen Free – SPF)
- 4. Comportamento altera o microbioma • Alterações da aquisição e manutenção da microbiota (Ezenwa et al, 2012)
- 5. • Alterações no acasalamento, alimentação e níveis de ansiedade Microbioma altera o comportamento
- 6. Vias de comunicação entre microbiota e cérebro • Cortisol • Citocinas • Triptofano • Ácidos graxos de cadeia curta (Cryan & Dinan, 2012)
- 7. Regulação da síntese de corticosterona pelo intestino • Glicocorticóides • Sistema imune inato (TLR) • Regulação de genes associados ao ritmo circadiano • Alterações circadianas e comportamentais
- 8. Relação microbiota-saúde-doença (Cryan & Dinan, 2012)
- 9. Transferência de microbiota • Adoção do padrão ponderal do animal doador no animal receptor
- 10. ANIMAIS GNOTOBIÓTICOS • GNOTOBIÓTICO – palavra de origem grega (gnoto = conhecer + biota = vida) • DEFINIÇÃO: são animais que possuem microbiota associada definida ou conhecida (ausente ou indetectável) • Classificados em germfree (GF) ou Flora Definida (FD). • Devem ser criados em ambientes dotados de barreiras sanitárias absolutas • Produção - manutenção em equipamentos isoladores • Diferentes materiais - aço inox, plástico rígido, acrílico, fibra de vidro • Trexler e Reynolds (1957) - isolador flexível e transparente, que facilita a manipulação
- 11. Isoladores
- 12. GERMFREE (GF) • DEFINIÇÃO: são animais totalmente livres de microbiota, isto é, isentos de quaisquer parasitas internos e externos, bactérias, fungos, protozoários, algas, richetsia e vírus • Axênicos - animais livres de vida associada • Espécies GF - ratos, camundongos, cobaias, coelhos, galinhas, porcos, peixes, macacos, carneiros e cães • OBTENÇÃO: método primário é a intervenção cirúrgica • Histerectomia estéril do útero gravídico 24 h pré-parto • Barreira placentária + controle das matrizes • Ama-de-leite ou amamentação manual
- 14. FLORA DEFINIDA (FD) • DEFINIÇÃO: são animais GF que foram intencionalmente contaminados com microrganismos ou parasitos específicos • Continuamente monitorados para constatar a presença dos organismos selecionados e a ausência de outros • Monoxênico - contaminado com apenas um tipo de microbiota • Dixênico - dois tipos de microbiota • Polixênico - vários microbiota • OBTENÇÃO: o primeiro passo para a obtenção de animais de FD é obter-se animais GF • Método – transferência para outro isolador, alimentação saturada com microorganismos específicos, amamentação, contato com a cama • Confirmação por teste laboratorial
- 15. Animais livres de patógenos específicos (SPF) • Specific Pathogen Free – SPF • DEFINIÇÃO: são animais livres de microrganismos e parasitos específicos, porém não necessariamente livres de outros não- específicos • Heteroxênicos - não apresentam microbiota capaz de lhes determinar doenças (albergam somente microorganismos não-patogênicos) • OBTENÇÃO: animais SPF são obtidos e mantidos livres de contaminantes específicos • Condições opostas dos animais FD, intencionalmente expostos a contaminantes específicos Ambientes protegidos por barreiras sanitárias rigorosas Não necessitam ser estéreis (isoladores)!
- 16. ANIMAIS CONVENCIONAIS • DEFINIÇÃO: são animais que possuem microbiota indefinida por serem mantidos em ambiente desprovido de barreiras sanitárias rigorosas • Criação - princípios básicos de higiene • Limpeza e desinfecção do ambiente e material utilizado • Troca de uniforme (avental) para o trabalho com os animais • Aqueles que não são germfree, Flora Definida ou SPF, são arbitrariamente chamados de Convencionais • Animais que não são espontaneamente infectados por alguns microorganismos patogênicos • Animais infectados com todos os microorganismos • Procedência dos animais • Últimos 30 anos