4. Urine samples are stable for at least 7 days at 4°C.

PERFORMANCE
INTERFERENCES Linearity:
INTENDED USE Studies to determine the level of interference for hemoglobin, bilirubin, and When run as recommended the assay is linear from 0.1 - 20.0 mg/dL
For the in vitro quantitative determination of Creatinine in serum, and urine lipemia were carried out, the following results were obtained:
Hemoglobin: No significant interference (± 10%) from hemoglobin up to 200 Method Comparison:
SUMMARY AND EXPLANATION 1 mg/dL. Studies performed between this procedure and a similar methodology yielded the
Creatinine measurements are used in the diagnosis and treatment of renal function, Bilirubin: No significant interference (± 10%) from bilirubin up to 24.3 mg/dL. following results:
including diseases, monitoring renal dialysis, and as a calculation basis for Lipemia: No significant interference (± 10%) from lipemia up to 1020 mg/dL Serum Urine *
measuring other urine analytes. Elevated Creatinine levels are found in renal measured as triglycerides. Number of samples pairs: 49 44
diseases and insufficiency with decreased glomerular filtration (uremia or A number of drugs and substances may affect the accuracy of creatinine. Range of samples: 0.4 – 19.80 (mg/dL) 17-355 (mg/dL)
azotemia if severe); urinary tract obstruction; reduced renal blood flow including See Young, et al.9 Correlation Coefficient: 0.9994 0.9952
congestive heart failure, shock and dehydration; rhabdomyolysis causes high ADDITIONAL EQUIPMENT REQUIRED BUT NOT PROVIDED Slope: 0.9734 1.04
serum creatinine, which may be elevated out of proportion to BUN, or to the 1. A clinical chemistry analyzer capable maintaining constant temperature Intercept: -0.02 (mg/dL) -0.30 (mg/dL)
reduction in renal function. (37°C), and measuring absorbance at 510nm (500-510nm).
2. Deionized water and related equipment, e.g.: pipettes Precision:
METHODOLOGY 3. Analyzer specific consumables, e.g.: sample cups Within Run Level 1 Level 2 Level 3
Jaffe2 described a method in 1886 for the determination of creatinine involving a 4. Controls and Calibrator materials such as those provided by JAS Diagnostics. Mean (mg/dL) 1.28 7.24 12.00
protein free filtrate and a reaction with picric acid in alkaline solution. Although S.D.(mg/dL) 0.08 0.06 0.10
since then several methods have been described the classic Jaffe reaction method ASSAY PROCEDURE C.V. (%) 6.3 0.9 0.8
is still the most widely used. The Jaffe reaction is subject to interferences by a These instructions are to be used as a general guideline for adapting to select
number of substances, including protein and glucose. 3,4,5 Modifications of the automated instruments. Refer to your specific JAS instrument application Run to Run Level 1 Level 2 Level 3
procedure have been developed to combat the drawbacks. 6 The kinetic instructions available upon request. S.D.(mg/dL) 0.08 0.10 0.16
procedures7 have become popular because they are fast, simple and avoid C.V. (%) 6.3 1.3 1.3
interferences. This method is based on a modification of the above procedure, SYSTEM PARAMETERS
incorporating a surfactant and other ingredients to minimize protein and Temperature: 37°C Sensitivity:
carbohydrate interferences. Wavelength: 510 nm A calibration factor of approximately 100.6 obtained, which is equivalent to a
Assay Type: Fixed Rate sensitivity of 0.00994 Δ Abs per mg/dL.
PRINCIPLE Direction: Increase
Alkali Sample/ Rgt. Ratio: 1: 10 * NOTES: Performance established on the Synchron CX.
Creatinine + Sodium Picrate Creatinine-picrate complex e.g. Sample Vol. 0.1 mL (100L) Urine Method Comparison performance established on the Roche Cobas Mira
(yellow-orange) Reagent Vol. 1.0 mL
First Read Time: 60 Sec REFERENCES
Creatinine reacts with picric acid in alkaline conditions to form a color complex Delay Time: 120 Sec 1. Tilzer L.L., Jacobs D.S. “Laboratory Test Handbook” 3rd Ed, Lexi-Comp Inc., p.202 (1994).
which absorbs at 510 nm. The rate of formation of color is proportional to the Last Read Time: 180 Sec 2. Jaffe, M., Z. Physiol. Chem. 10:391 (1886).
creatinine in the sample. 3. DiGiorgio, J., Clinical Chemistry: Principles and Technics, 2 nd Ed., Edited by Henry, R.J., et al,
Hagerstown (MD), Harper & Row, pp. 541-553 (1974).
PROCEDURE NOTES 4. Cook, J.G.H., Ann. Clin. Biochem. 12:219 (1975).
REAGENT COMPOSITION The reagent and sample volumes may be altered proportionally to accommodate 5. Taussky, H.H., Standard Methods of Clinical Chemistry, Vol. 3, New York Academic Press, p.99
Active Ingredients Concentration various instrument requirements. (1966).
6. Heinegard, D., Tiderstom, G., Clin. Chem. Acta, 43:305 (1973).
Picric Acid 10 mM 7. Fabiny, D.L., Ertingshausen, G., Clin. Chem. 17:391 (1971).
Sodium Hydroxide 250 mM Calculations: (A = Absorbance) 8. Tietz N.W. (Ed). Textbook of Clinial Chemistry, W.B. Saunders, 1986;1278.
pH (12.8 – 13.2) 9. Young, D.S. et al, Clin. Chem. 21:1D (1975).
10. Henry RJ (Ed), Clin. Chem., Principles and Technics (2nd Ed), Harper and Row, 1974;548-551.
A patient x Concentration of standard = Creatinine
PRECAUTIONS A standard (mg/dL) (mg/dL)
1. This reagent is for in vitro diagnostic use only.
2. Picric Acid is a strong oxidizing agent. Avoid contact with skin. WIPE ANY Example: JAS Diagnostics, Inc.
SPILLAGE, SINCE EVAPORATED PICRIC ACID IS EXPLOSIVE. A patient = 0.01
14100 NW 57th Court. Miami Lakes FL 33014
3. Sodium hydroxide is an alkali. Avoid ingestion and contact. A (standard) = 0.05
Concentration of standard = 5 mgldL.
Tel. 305.418.2320 Fax. 305.418.2321
REAGENT PREPARATION www.jasdiagnostics.com
Reagent is supplied as a single vial ready to use liquid. 0.01 x 5 = 1.0 mg/dL Creatinine
0.05
Obelis (O.E.A.R.C.) “European Authorized Representative”
REAGENT STORAGE
Avenue de Tervuren, 34 box 44 1040 Brussels
1. Store the reagent at 2-8°C (refrigerated). LIMITATIONS Tel.: +32.2.732.59.54 Fax: +32.2.732.60.03
2. The reagent is stable until the expiration date when stored at 2-8°C. Samples with values exceeding 20.0 mg/dL should be diluted 1:1 with saline and Email: [email protected]
3. Reagent should be protected from light when not in use. re-run. The final answer should be multiplied by two.

REAGENT DETERIORATION CALIBRATION

The reagent should not be used if: A calibrator such as JAS Chemistry Calibrator (P/N: CAL1-5) , or an appropriate

CREATININE
1. The reagent is cloudy (contaminated). aqueous standard should be used to calibrate this test.
2. The reagent fails to meet stated parameters of performance.
3. The initial reagent absorbance is greater than 0.330 at 500 -510nm. QUALITY CONTROL

SPECIMEN COLLECTION AND STORAGE 8 (SINGLE VIAL) REAGENT

The integrity of the reaction should be monitored by use of a two level control
with known values such as JAS Chemistry Controls (P/N: CON1-5 and CON2-5)
1. Un-hemolyzed serum is recommended.
2. Urine should be diluted to a final concentration of approximately 34 to 64 EXPECTED VALUE10
mg/dL. A 1:100 dilution is recommended. Serum: 0.60 – 1.40 mg/dl
3. Creatinine in serum is stable for 7 days at refrigerated temperatures (2-8°C) Urine: 0.80 – 2.00 g/day
and for several months when frozen (-20°C) and protected from evaporation It is highly recommended that each laboratory establish its own reference range.
and contamination.
PI: CRE2.JS03 REV: 10/19/09
 CALIBRACIÓN:
USO INTERFERENCIA Esta prueba debe ser calibrada utilizando un calibrador como el Calibrador de Quimica
Para a determinación cuantitativa in vitro de Creatinina en suero y orina. Se realizaron estudios para determinar el nivel de interferencia de hemoglobina, de JAS ( P/N: CAL1-5) o un estandard apropiado.
bilirrubina y lipemia, se obtuvieron los siguientes resultados:
RESUMEN 1 Hemoglobina: Ninguna (± 10%) interferencia significativa de hemoglobina hasta 200 CONTROL DE CALIDAD:
Las medidas de Creatinina son utilizadas en el diagnostico y tratamiento de la función mg/dL. La integridad de la reaccion debe ser evaluada usando un control de dos niveles con
renal, incluyendo enfermedades, monitoreo de la diálisis renal y como una base en el Bilirubina: Ninguna (± 10%) interferencia significativa de bilirrubina hasta 24.3 mg/dL. valores conocidos como el JAS Control de Quimica ( P/N: CON1-5 y CON2-5).
calculo para medir otros compuestos en la orina. Niveles altos de Creatinina son Lipemia: Ninguna (± 10%) interferencia significativa de lipemia hasta 1020 mg/dL
encontrados en enfermedades renales y en la deficiencia con la disminución de la medida como triglicéridos. VALORES ESPERADOS10
filtración glomerular (uremia o azotemia, si es severo); obstrucción del tracto urinario; Un sinnúmero de drogas y sustancias pueden afectar la exactitud de de la Creatinina. Vea Suero: 0.60 – 1.40 mg/dL
flujo de sangre renal reducido incluyendo falla congestiva del corazón, deshidratación e Young, et al.9 Orina: 0.80 – 2.00 g/día
impresión; la rhabdomyiolysis causa nivele alto de Creatinina, el cual puede elevarse EQUIPO ADICIONAL REQUERIDO NO PROVISTO Es estrictamente recomendado que cada laboratorio establezca su propio rango de
fuera de proporción para BUN, o a la reducción de la función renal. 1. Analizador químico capaz de mantener la temperatura constante (37ºC) y medir la referencia.
absorbancia a 500 – 510nm.
METODOLOGIA 2. Agua deionizada y equipo relacionado, e.g pipetas. DESEMPEÑO
Jaffe2 describió un método en 1886 para la determinación de Creatinina, el cual envolvía 3. Consumibles especificos del analizador, e.g.: copas de muestras Linealidad:
un filtrado libre de proteína y una reacción con ácido pícrico en una solución alcalina. 4. Controles y Calibradores como los provistos por JAS. Cuando se analiza como recomendado el ensayo es lineal de 0.1 – 20.0 mg/dL
Aunque desde entonces se han descrito varios métodos, el método clásico de reacción de
Jaffe sigue siendo el más utilizado. La reacción de Jaffe esta sujeta a interferencias por PROCEDIMIENTO MANUAL Método de Comparación:
un sinnúmero de sustancias, incluyendo proteína y glucosa. 3,4,5 Se han desarrollado 1. Prepare la cubeta del espectrofotómetro a una temperatura de 37°C. Estudios realizados entre este procedimiento y un metodo similar recuperaron los
modificaciones del procedimiento para combatir estas desventajas. 6 Los procedimientos7 2. Añada 1.0 mL de reactivo en cada tubo. siguientes resultados:
cinéticos han sido populares ya que son rápidos, simples y evitan interferencias. Este 3. Pre-caliente los tubos a 37°C por aproximadamente 5 minutos. Serum Orina *
método esta basado en la modificación del procedimiento descrito, incorporando el 4. Lleve a cero el espectrofotómetro con el blanco del reactivo a 510 nm (500 – 520 Numero de pares de muestras: 49 44
surfactante y otros ingredientes para minimizar las interferencias de proteínas y nm). Rango de muestras: 0.40 – 19.80 (mg/dL) 17-355 (mg/dL)
carbohidratos. 5. Añada 0.10 mL (100ul) de muestra al reactivo, mezcle y colóquelo en la cubeta Coeficiente Correlación: 0.9994 0.9952
inmediatamente. Pendiente: 0.9734 1.04
PRINCIPIO 6. Después de exactamente 60 segundos lea y documente la absorbancia (A1). Intercepto: -0.02 (mg/dL) -0.30 (mg/dL)
Alkali 7. Después de exactamente 60 segundos de la lectura A1, vuelva a leer y a documentar la
Creatinina + Picrate de Sodio Complejo Creatinina-picrate absorbancia (A2), i.e. el tiempo entre A1 y A2 es 60 segundos. Precision:
(amarillo-anaranjado) 8. Calcule el cambio en absorbancia (D Abs/min) sustrayendo (A2-A1). Vea la seccion Entre Corridas Nivel 1 Nivel 2 Nivel 3
de calculos. Promedio (mg/dL) 1.28 7.24 12.00
La Creatinina reacciona con el ácido pícrico en condiciones alcalinas para formar un S.D.(mg/dL) 0.08 0.06 0.10
complejo de color, el cual absorbe a 510nm. La velocidad en la que se forma el color es PROCEDIMIENTO AUTOMATIZADO C.V. (%) 6.3 0.9 0.8
proporcional a la Creatinina en la muestra. Estas instrucciones son para ser utilizadas como guía general para adaptar instrumentos
automatizados seleccionados. Refiérase a la aplicación del instrumento disponible. Corrida a Corrida Nivel 1 Nivel 2 Nivel 3
COMPOSICION DEL REACTIVO S.D.(mg/dL) 0.08 0.10 0.16
Ingredientes Activos Concentracion PARAMETROS C.V. (%) 6.3 1.3 1.3
Acido Picrico 10 mM Temperatura: 37°C
Hidroxido de Sodio 250 mM Largo de Onda: 510 nm Sensitividad:
pH (12.8 – 13.2) Tipo Ensayo: Fixed Rate Un factor de calibración aproximado de 100.6 obtenido, lo cual es equivalente a una
Direccion: Increase sensitividad de 0.0094 Abs por mg/dL.
PRECAUCIONES Razon Muestra// Reactivo: 1: 10
1. Este reactivo es solo para uso in vitro. e.g. Vol. Muestra 0.1 mL (100L) * NOTAS: El desempeño se estableció en el Synchron CX.
2. El ácido pícrico es un agente oxidante fuerte. Evite contacto con la piel. LIMPIE Vol. Reactivo 1.0 mL Método de Comparación de orina se estableció en el Roche Cobas Mira.
CUALQUIER DERRAME, YA QUE EL ÁCIDO PÍCRICO EVAPORADO ES 1er tiempo de lectura: 60 Sec
EXPLOSIVO. Tiempo de retraso: 120 Sec REFERENCIAS
3. El hidróxido de sodio es una base. Evite ingestión y contacto. Ultimo tiempo de lectura: 180 Sec 1. Tilzer L.L., Jacobs D.S. “Laboratory Test Handbook” 3 rd Ed, Lexi-Comp Inc.,
p.202 (1994).
PREPARACION DEL REACTIVO NOTAS DEL PROCEDIMIENTO 2. Jaffe, M., Z. Physiol. Chem. 10:391 (1886).
El reactivo se provee en un solo vial listo para ser utilizado. Los volúmenes de la muestra y del reactivo pueden ser alterados proporcionalmente para 3. DiGiorgio, J., Clinical Chemistry: Principles and Technics, 2 nd Ed., Edited by
acomodar varios requisitos del instrumento. Henry, R.J., et al, Hagerstown (MD), Harper & Row, pp. 541-553 (1974).
ALMACENAJE 4. Cook, J.G.H., Ann. Clin. Biochem. 12:219 (1975).
1. Almacene el reactivo de 2 – 8ºC (refrigerado). Calculos: (A = Absorbancia) 5. Taussky, H.H., Standard Methods of Clinical Chemistry, Vol. 3, New York
2. El reactivo es estable hasta la fecha de expiración cuando se almacena de 2 – 8ºC. Academic Press, p.99 (1966).
3. El reactivo debe protegerse de la luz cuando no este en uso. A paciente x Concentración del estándar = Creatinina 6. Heinegard, D., Tiderstom, G., Clin. Chem. Acta, 43:305 (1973).
A estándar (mg/dL) (mg/dL) 7. Fabiny, D.L., Ertingshausen, G., Clin. Chem. 17:391 (1971).
DETERIORO DEL REACTIVO 8. Tietz N.W. (Ed). Textbook of Clinial Chemistry, W.B. Saunders, 1986;1278.
El reactivo no debe utilizarse si: Ejemplo: 9. Young, D.S. et al, Clin. Chem. 21:1D (1975).
1. El reactivo esta turbio (contaminado). A paciente = 0.01 10. Henry RJ (Ed), Clin. Chem., Principles and Technics (2 nd Ed), Harper and Row,
2. El reactivo falla en cumplir los parámetros de desempeño. A estándar = 0.05 1974;548-551.
3. La absorbancia inicial del reactivo es mayor de 0.330 a 500 – 510nm. Concentración del estándar = 5 mgldL. JAS Diagnostics, Inc.
0.01 x 5 = 1.0 mg/dL Creatinina 14100 NW 57th Court. Miami Lakes FL 33014
COLECCION Y ALMACENAJE DE LA MUESTRA 8
Tel. 305.418.2320 Fax. 305.418.2321
0.05
1. Se recomienda suero no hemolizado. www.jasdiagnostics.com
2. Orina debe disolverse a una concentración final de aproximadamente 34 a 64 mg/dL.
LIMITACIONES
Se recomienda una dilución de 1: 100. Obelis (O.E.A.R.C.) “European Authorized Representative”
Muestras con valores mayores de 20.0 mg/dL deben diluirse 1:1 con salina y re-
3. La Creatinina en suero es estable por 7 días refrigerada (2 – 8ºC) y por varios meses Avenue de Tervuren, 34 box 44 1040 Brussels
analizarlas. El resultado final debe ser multiplicado por dos. Tel.: +32.2.732.59.54 Fax: +32.2.732.60.03
al congelarse (-20ºC) y protegerse de evaporación y contaminación.
Email: [email protected]
4. Muestras de orina son estables por lo menos por 7 días a 4ºC.

CREATININA (UNI VIAL)

PI: CRE2.JS03 REV: 10/19/09