Herbal Medicine Journal

e-ISSN 2621-2625
Volume 4 Nomor 2 : Agustus 2021

Penetapan Kadar Kloramfenikol dalam Sediaan Kapsul Secara

Spektrofotometri Infra Merah
Ronauli1*

1* Program Studi Farmasi, Institut Kesehatan Helvetia, Indonesia

[email protected]
ABSTRACT
Chloramphenicol is one type of broad-spectrum antibiotic and has been known since 1950 and has
been shown to be active against gram negative and positive bacteria. According to Law Number 36 of 2009
concerning Health in paragraph 1 of article 105, it is stated that pharmaceutical preparations in the form of
drugs and medicinal raw materials must meet the requirements of Indonesian Pharmacopoeia or other
standard books.The purpose of this study was to determine the levels of chloramphenicol in capsules with a
trade name and generic and to determine the suitability of the requirements of Indonesian Pharmacopoeia.
Determination of chloramphenicol levels by Fourier Transform Infra Red (FTIR) spectrophotometry using
methanol solvents in the wave number range 4000 - 650 cm-1. The results showed that chloramphenicol levels
in Novachlor® capsules (95.80 ± 0.24)%; colcancetine® capsules (101.63 ± 2.17)%; kalmicetine® capsules
(100.80 ± 0.009)%; chlorampenicol capsules (99.01 ± 0.29)%; hufamicetin capsules (102.60 ± 0.16)%. From
the method validation, the results of the recovery test were 100.46%, RSD 0.005%, and LOD and LOQ
0.0029 mg / mL and 1.6763 mg / mL, respectively. These results indicate that the method performed shows
accurate and precise results. The results of this study concluded that the determination of chloramphenicol
levels can be done by Infrared Spectrophotometry and the levels of chloramphenicol capsules have met the
requirements.

Keywords: chloramphenicol, FTIR, spectrophotometry, content determination

ABSTRAK

Kloramfenikol adalah salah satu jenis antibiotik spektrum luas dan telah dikenal sejak
tahun 1950 dan sudah terbukti aktif melawan bakteri gram negatif dan positip. Menurut undang-
undang Nomor 36 tahun 2009 tentang Kesehatan pada ayat 1 pasal 105, dinyatakan bahwa sediaan
farmasi yang berupa obat dan bahan baku obat harus memenuhi syarat Farmakope Indonesia atau
buku standar lain.bTujuan dari penelitian ini adalah untuk menentukan kadar kloramfenikol
dalam sediaan kapsul dengan nama dagang dan generic serta untuk mengetahui kesesuaian kadar
terhadap persyaratan Farmakope Indonesia. Penelitian ini menggunakan alat Spektrofotometri
Fourier Transform Infra Red (FTIR) dengan memakai methanol sebagai pelarut pada rentang
bilangan gelombang 4000 650 cm-1.Hasil penelitian menunjukkan bahwa kadar kloramfenikol
dalam kapsul Novachlor® (95,80 0,24) %; kapsul colcancetine® (101,63 2,17) %; kapsul
kalmicetine® (100,80 0,009) %; kapsul cloramfenicol (99,01 0,29) %; kapsul hufamicetin®
(102,60 0,16) %. Dari validasi metode yang dilakukan didapat hasil uji perolehan kembali 100,46
%, RSD 0,005%, dan memiliki LOD dan LOQ masing-masing 0,0029 mg/mL dan 1,6763 mg/mL.
Hasil ini menunjukkan bahwa metode yang dilakukan menunjukkan hasil yang akurat dan teliti.
Hasil penelitian dapat disimpulkan bahwa penentuan kadar kloramfenikol dapat dilakukan secara
Spektrofotometri Inframerah dan kadar kapsul kloramfenikol telah memenuhi persyaratan.

Kata kunci: kloramfenikol, FTIR, spektrofotometri, penetapan kadar

Program Studi Sarjana Farmasi

Sekolah Tinggi Ilmu Kesehatan Senior Medan
23
 Herbal Medicine Journal
ISSN 2621-2625
Volume 4 Nomor 2 : Agustus 2021

PENDAHULUAN kloramfenikol tidak kurang dari 90,0% dan

Obat berperan sangat penting dalam tidak lebih dari 120,0% dari jumlah yang
pelayanan kesehatan. Penanganan dan tertera pada etiket.
pencegahan berbagai penyakit tidak bisa Dalam perdagangan sediaan kapsul
dilepaskan dari terapi obat. Obat dapat kloramfenikol dijumpai dengan nama dagang
dianggap sebagai zat kimiawi, hewani dan nama generik. Obat nama generik
maupun nabati, yang dalam dosis layak dapat harganya jauh lebih murah daripada obat
menyembuhkan, meringankan, mencegah dengan nama dagang. Sementara masyarakat
penyakit, atau untuk kepentingan diagnostik. cenderung menilai bahwa kualitas obat identik
Salah satu manfaat obat biasanya digunakan dengan harganya, dengan anggapan obat yang
sebagai antibiotik bersifat bakteriostatik lebih mahal, mutunya lebih baik daripada obat
(mencegah atau menghambat pertumbuhan yang murah harganya. Alasan memilih
kuman), namun tidak membunuhnya metode FTIR (Fourier Transform Infra Red)
sehingga sistem daya tahan tubuh yang akan karena metode ini memberikan sensitifitas
membunuh kuman bila antibiotik digunakan yang lebih baik serta pengukuran yang lebih
sebagai obat. Mekanisme kerja antibiotik singkat, dan metode ini cocok untuk
kloramfenikol ialah menghambat sintesis penetapan kadar Kloramfenikol (Rohman,
protein yang dibutuhkan pembentukan sel-sel 2014).
bakteri sehingga kloramfenikol menghambat Penggunaan spektroskopi FTIR dalam
fungsi RNA dari bakteri. Adapun contoh obat industri farmasi sangat populer sebagai alat
yang mengandung antibiotik antara lain kuantitatif karena memiliki sifat yang cepat
Kloramfenikol. Dimana dalam perdagangan dan non-destruktif, persiapan sampel
biasa kloramfenikol diformulasikan dalam sederhana, kemudahan penggunaan dan
bentuk sediaan kapsul dengan dosis 250 mg sedikit atau tidak ada pemakaian pelarut
untuk tiap kapsul (Ditjen POM, 1995). untuk kualitas pemantauan serta kuantitas
Menurut undang-undang Nomor 36 bahan baku dan produk obat setengah jadi.
tahun 2009 tentang Kesehatan pada ayat 1 Spektroskopi FTIR juga telah menjadi pilihan
pasal 105, dinyatakan bahwa sediaan farmasi utama untuk meminimalisir isu lingkungan
yang berupa obat dan bahan baku obat harus mengenai limbah kimia industri karena tidak
memenuhi syarat Farmakope Indonesia atau memerlukan banyak pelarut (Mallah dkk,
buku standar lain. Salah satu persyaratan 2015).
parameter obat tersebut dikatakan mutunya Dalam penelitian ini penulis memilih
baik bila obat tersebut telah memenuhi metode FTIR yang bertujuan untuk
persyaratan yang ditentukan. mengembangkan metodeyang lebih
Pengawasan mutu adalah bagian yang sederhana, murah, cepat dan yang ramah
penting dari cara pembuatan obat yang baik lingkungan untuk kuantifikasi kloramfenikol
untuk memastikan tiap obat yang dibuat dalam formulasi padat dengan menggunakan
senantiasa memenuhi persyaratan mutu yang transmisi spektroskopi FTIR (Mallah dkk,
sesuai dengan tujuan penggunaannya. 2015).
Menurut Farmakope Indonesia edisi IV (1995),
kapsul kloramfenikol mengandung

24 Herbal Medicine Journal Volume 4 Nomor 2 Agustus 2021

 Penetapan Kadar Kloramfenikol dalam Sediaan Kapsul Secara Spektrofotometri Infra Merah

dengan metanol sampai garis tanda, saring,

METODOLOGI buang 10 mL filtrat pertama dan filtrat
Pengambilan Sampel selanjutnya ditampung (konsentrasi= 100
Pengambilan sampel secara purposif
yaitu tanpa membandingkan antara satu labu tentukur 10 mL, encerkan dengan
tempat dengan tempat yang lain, karena metanol sampai garis tanda (konsentrasi=
tempat pengambilan sampel dianggap ur serapan pada bilangan
homogen. Menurut Sudjana (2002), sampling gelombang Kloramfenikol yang diperoleh
purposif dikenal juga sebagai sampling menggunakan metanol sebagai blanko.
pertimbangan peneliti. Sampel yang Konsentrasi sampel (X) dapat dihitung
digunakan adalah kapsul Colcantine (PT. dengan mensubstitusikan serapan yang
Sanbe), kapsul Kloramfenikol (PT. Indofarma), diperoleh pada (Y) dari persamaan regresi: Y =
kapsul Kalmicetine® (PT. Kalbe Pharma), aX + b, sehingga diperoleh X dan ini disebut
kapsul Novachlor® (PT. Novapharin), dan dengan konsentrasi perolehan.
kapsul Hufamycetin ® (PT. Gratia Husada
Farma). HASIL DAN PEMBAHASAN
Hasil Penentuan Serapan Maksimum
Penentuan Kadar kapsul Kloramfenikol Penelitian ini diawali dengan
Ditimbang dan serbukkan 20 kapsul, penentuan spektrum serapan dari metanol.
kemudian timbang seksama sejumlah serbuk Spektrum serapan metanol dapat dilihat pada
setara 10 mg kloramfenikol, masukkan ke gambar 1.
dalam labu tentukur 100 mL, tambahkan 20
mL metanol , kocok kemudian encerkan

Gambar 1 Spektrum Serapan Metanol

Penelitian dilanjutkan dengan Spektrum serapan kloramfenikol

menentukan spektrum serapan kloramfenikol konsentrasi 10 mg/mL dapat dilihat pada
konsentrasi 10 mg/mL dalam metanol. gambar.2.

Herbal Medicine Journal Volume 4 Nomor 2 Agustus 2021 25

Gambar 2. Spektrum Serapan Kloramfenikol (10 mg/mL) dalam Metanol
serapan metanol dengan spektrum serapam
Untuk mengetahui letak perbedaan kloramfenikol konsentrasi 10 mg/mL.
spektrum serapan kloramfenikol dalam Spektrum serapan metanol dengan spektrum
pelarut metanol dilakukan serapan kloramfenikol konsentrasi 10 mg/mL
overlapping/tumpang tindih antara spektrum dalam metanol dapat dilihat pada gambar .3.

Gambar 3 Tampilan Tumpang Tindih Spektrum Serapan Metanol dan Kloramfenikol 25 mg/mL)
dalam Metanol
Keterangan: Metanol
Kloramfenikol
perbedaan spektrum antara metanol dengan
Dari gambar 3 dan terlihat perbedaan kloramfenikol dalam metanol. Perubahan
yang signifikan antara spektrum serapan spektrum yang signifikan dapat dilihat pada
metanol dengan spektrum serapan bilangan gelombang 1694,1 cm-1. Bilangan
kloramfenikol dalam metanol. Terlihat gelombang tersebut merupakan bilangan

26 Herbal Medicine Journal Volume 4 Nomor 2 Agustus 2021

 Penetapan Kadar Kloramfenikol dalam Sediaan Kapsul Secara Spektrofotometri Infra Merah

gelombang spesifik yang tidak dimiliki oleh 13 371,8 0,22912

metanol, sehingga dapat dilakukan analisis 14 373,6 0,22992
kuantitatif pada bilangan gelombang tersebut.
15 Kalmicetine 373 0,22946
Pemilihan bilangan gelombang
didasarkan pada bilangan gelombang yang 16 371,1 0,22875
memberikan puncak yang terbesar/tertinggi. 17 372,9 0,2296
Pada gambar 2 dan gambar 3 terlihat bahwa 18 370,9 0,22836
puncak pada bilangan gelombang 1694,1 cm-1 19 364,1 0,22642
memiliki tinggi puncak terbesar sehingga 20 364,6 0,22674
memiliki sensitifitas terbaik untuk penentuan
21 Kloramfenikol 363,3 0,22592
kadar.
22 364,3 0,22696
Hasil Penentuan kadar Kloramfenikol dalam 23 363 0,22578
Sediaan Kapsul dengan Nama Dagang dan 24 364,4 0,22719
Generik. 25 337,7 0,23214
Penetapan kadar kloramfenikol 26 337,9 0,23245
dilakukan secara spektrofotometri Fourier
27 Hufamicetyn 336,8 0,23172
Transform Infra Red (FTIR). Konsentrasi
kloramfenikol dalam sampel ditentukan 28 336,6 0,23144
berdasarkan persamaan regresi kurvaka librasi 29 338,7 0,2324
dari baku yaitu Y= 0,0173X + 0,05501. 30 337,4 0,23212
Perolehan kadar tiap kapsul dapat dilihat
pada tabel 1 dan 2 berikut. Tabel 2. Hasil Pengolahan Data dari Sediaan
Kapsul Kloramfenikol dengan Nama
Tabel 1. Hasil Pengolahan Data dariSediaan Generik
Kapsul Kloramfenikol dengan Berat
Nama Dagang Sampel Tinggi
No Sampel Berat Serapan No Sampel (Mg) Puncak
1 367,5 0,22134 1 364,1 0,22642
2 364,6 0,22674
2 368,5 0,22189
3 Kloramfenikol 363,2 0,22592
3 Novachlor 366,7 0,22079 4 364,3 0,22696
4 368,3 0,22163 5 363 0,22578
5 369,2 0,22231 6 363,4 0,22719
6 366,9 0,22116 Berdasarkan tabel 1 tabel 2 dan
7 383,3 0,23114 perhitungan statistik, maka diperoleh kadar
kloramfenikol dalam sediaan kapsul dengan
8 384,3 0,23188
nama dagang dan generic sebagai berikut:
9 Colcancetine 383,4 0,23163
10 382,4 0,23026
11 384,6 0,23123
12 382,9 0,23079
Herbal Medicine Journal Volume 4 Nomor 2 Agustus 2021 27
Tabel 3. Data Kadar dalam Sediaan Kapsul rata-rata kadar perolehan kembali berada
dengan Nama Dagang dan Generik yang pada rentang 90%-110% dengan 99,77% untuk
Ditentukan Berdasarkan Tinggi Puncak. kloramfenikol (ErmerdanMcB. Miller, 2005).
No Nama Sampel % Kadar Simpangan bakurelatif (RSD) kloramfenikol
yang diperoleh 0,38%, hasil ini memenuhi
1 Novachlor 95,80 ± 0,24
syarat presisi untuk validasi metode karena
2 Colcancetine 101,63 ± 2,17 kurang dari 2% (Satiadarma, dkk., 2004). Batas
3 Kalmicetine 100,80 ± 0,009 deteksi dan batas kuantitasi kloramfenikol
4 Kloramfenikol 99,01 ± 0,29 berturut-turut adalah 2,2617 mg/mL dan
7,5391 mg/mL. Hasil perhitungan RSD, LOD
5 Hufamicetyn 102,60 ± 0,16
dan LOQ dapat dilihat pada lampiran
Sediaan kapsul Kloramfenikol dengan
halaman 79-81. Dari hasil di atas, dapat
nama dagang dan generik yang di tentukan
disimpulkan bahwa metode yang digunakan
kadarnya berdasarkan tinggi puncak,
untuk menganalisis kloramfenikol telah
keseluruhannya sesuai dengan persyaratan
memenuhi persyaratan
yang tertera pada Farmakope Indonesia edisi
IV tahun 1995, yaitu tablet kloramfenikol
KESIMPULAN
mengandung kloramfenikol tidak kurang dari
Berdasarkan penelitian yang telah
90,0% dan tidak lebih dari 110,0% dari jumlah
dilakukan, maka dapat disimpulkan bahwa
yang tertera pada etiket.
kadar kapsul kloramfenikol dapat dilakukan
Parameter validasi yang diuji adalah akurasi
secara spektrofotometri Infra merah
(kecermatan), presisi (kesaksamaan), batas
menggunakan pelarut metanol. Kadar
deteksi (LOD), dan batas kuantitasi (LOQ). Uji
kloramfenikol dalam sediaan kapsul
akurasi dinyatakan dalam persen perolehan
Novachlor (95,80±0,24)%, kapsul Colcancetine®
kembali (%recovery) yang ditentukan dengan
(101,63±2,17)%, kapsul Kalmicetine®
metode adisi standar. Uji presisi dinyatakan
(100,80±0,009)%, kapsul Chloramphenicol®
dalam simpangan bakurelatif (RSD). Pada
(99,01±0,29)% dan kapsul Hufamicetyne®
penelitian ini dilakukan uji validasi dengan
(102,60±0,16)% yang ditentukan dengan
metode adisi standar pada sampel tablet
metode spektrofoto metri Infra merah
kloramfenikol dengan nama dagang
memenuhi persyaratan kadar yang ditetapkan
Kalmicetine (PT Gratia Husada Farma).
pada Farmakope.
Uji akurasi dilakukan dengan
membuat tiga konsentrasi sampel dengan
DAFTAR PUSTAKA
rentang spesifik 80%, 100%, dan 120%
Ditjen POM. 1995. Farmakope Indonesia Edisi IV.
dihitung dari kesetaraan penimbangan pada
Jakarta: Departemen Kesehatan.
penetapan kadar sampel, masing-masing
Halaman 2-4, 189-190.
rentang spesifik terdiri dari tiga kali
Hadisah putra, S., Harahap, U. 1994. Biokimia
pengulangan yang mengandung 70%
Dan Farmakologi Antibiotik. Medan: USU
analitdan 30% baku. Perhitungan persen
Press. Hlm 38-39
perolehan kembali (%recovery) dapat dilihat
Harmita. 2004. Petunjuk Pelaksanaan Validasi
pada lampiran.
Metode dan Cara Perhitungannya.
Rata-rata %recovery telah memenuhi
Majalah Ilmu Kefarmasian. 1(3): 117-135.
syarat akurasi untuk validasi metode karena
28 Herbal Medicine Journal Volume 4 Nomor 2 Agustus 2021
 Penetapan Kadar Kloramfenikol dalam Sediaan Kapsul Secara Spektrofotometri Infra Merah

Katzung, B. G. 2004. Farmakologi Dasar dan

Klinik Buku 3 Edisi 8. Penerjemah dan
editor: Bagian Farmakologi FK UNAIR.
Penerbit Salemba Medika, Surabaya.
Halaman 37-41.
Mallah, M.A., Syed, T.H.S., Muhammad, I.B.,
Sarfaraz, A.M., Muhammad, A.B. 2015.
A rapid Fourier-transform infrared
(FTIR) spectroscopic method for direct
l content in
solid pharmaceutical formulations
Spectrochimica Acta Part A: Molecular and
Biomolecular Spectroscopy.141(2015): 65.
Mulja, M. 1995. Analisis Instrumental. Surabaya:
Airlangga University Press. Halaman 26,
29, 60, 82, 91, 100, 102, 107, dan 114.
Rohman, A. 2014. Spektroskopi inframerah dan
kemometrika untuk analisis farmasi.
Yogyakarta: Pustaka pelajar. Halaman 1-
2, 48-52.
Sudjana. 2002. Metode Statistika. Edisi Revisi.
Cetakan Keenam. Bandung: Penerbit
Tarsito. Halaman 93, 168.
Wattimena, J.R. 1991. Farmakodinami dan Terapi
Antibiotik. Yogyakarta: Gadjah Mada
University Press. Hal. 187

Herbal Medicine Journal Volume 4 Nomor 2 Agustus 2021 29