C4

Complement C4
Turbidimetry

Quantitative determination of complement C4 (C4) MINDRAY BS-120 / BS-200E APPLICATION

IVD PARAMETERS

Store 2 - 8ºC. Test C4 R1 240

Nº ** R2 60
PRINCIPLE OF THE METHOD Full Name C4 Sample Volume 6
Anti-human C4 antibodies when mixed with samples containing C4,
form insoluble complexes. These complexes cause an absorbance Standard nº R1 Blank
change, dependent upon the C4 concentration of the patient sample, Reac. type Endpoint Mixed Rgt Blank *
that can be quantified by comparison from a calibrator of know C4 Pri. Wavelength 340 nm Linearity range *
concentration.
Sec. Wavelength Linearity limit 100mg/dL
CLINICAL SIGNIFICANCE1 Direction Increase Substrate limit *
C4 is the second component reacting in the classical pathway Reac. time 1-7 / -1-10 Factor
cascade. Most synthesis occurs in the hepatic parenchymal cells,
Incub. Time Prozone check *
although some may be synthesized by monocytes or others tissues.
C4 levels in plasma rise modestly after trauma or inflammation and Units mg/dL q1 q2
tissue necrosis (acute phase process). Precision Interger q3 q4
Inherited primary deficiency of C4 is associated with a high
PC Abs
prevalence of autoimmune or collagen vascular disease, particularly
Systemic Lupus Erythematosus (SLE). Also, levels of C4 are more CALIBRATION (CAL + REAGENT BLK)
commonly depressed because of consumption as a consequence of BS120 (MANUAL) / BS200E (AUTODILUTION)
formed immune-complexes. Rule Spline
Sensitivity 1
REAGENTS
Tris buffer 20 mmol/L, PEG 8000, pH 8.3. Replicates 2
Diluent (R1)
Sodium azide 0.95 g/L. Interval (days) 0
Goat serum, anti-human C4, pH 7.5. BS200E CALIBRATION (DILUTION) →5 CAL LEVELS + 1 WATER LEVEL
Antibody (R2)
Sodium azida 0.95 g/L.
Nº CAL DIL CONCENTRATION DIL SAMPLE DIL VOL SAMPLE VOL
Optional Cod: 1102003 PROT CAL. 1 CAL *0.1 13.0 115 6.0
2 CAL *0.25 38.0 115 6.0
CALIBRATION 3 CAL *0.5 38.0 115 12.0
The assay is calibrated to the Reference Material CRM 470/RPPHS 4 CAL *0.75 38.0 115 18.0
(Institute for Reference Materials and Measurements). It must be 5 CAL*1 6.0
used the PROT CAL to calibrate the reagent. The reagent (both
monoreagent and bireagent) should be recalibrated every 2 weeks, Blank parameter must be performed in order to get good results in
when the controls are out of specifications, and when changing the CALIB screen from main menu. The blank calibration is stable until 35
reagent lot or the instrument settings. days. After this period the blank parameter must be performed again in
order to validate the calibration.
PREPARATION REFERENCE VALUES5
Reagents: Ready to use. Neonates: Between 13 - 38 mg/dL.
Calibration Curve: Prepare the following PROT CAL dilutions in Adults: Between 10 – 40 mg/dL.
NaCl 9 g/L as diluent. Multiply the concentration of the C4 calibrator Each laboratory should establish its own reference range.
by the corresponding factor stated in table bellow to obtain the C4
concentration of each dilution. QUALITY CONTROL
Control sera are recommended to monitor the performance of manual
Calibrator dilution 1 2 3 4 5 6 and automated assay procedures. Spinreact PROT CONTROL
Calibrator (µL) -- 10 25 50 75 100 (Cod.:1102004). Each laboratory should establish its own Quality
NaCl 9 g/L (µL) 100 90 75 50 25 - Control scheme and corrective actions if controls do not meet the
Factor 0 0.1 0.25 0.5 0.75 1.0 acceptable tolerances.
NOTES
STORAGE AND STABILITY 1. The linearity depends on the calibrator concentration.
All the components of the kit are stable until the expiration date on 2. Clinical diagnosis should not be made on findings of a single test
the label when stored tightly closed at 2-8ºC and contaminations are result, but should integrate both clinical and laboratory data.
prevented during their use. Do not use reagents over the expiration
BIBLIOGRAPHY
date.
1. Clinical Guide to Laboratory Tests, Edited by NW Tietz W B Saunders Co.,
Reagent deterioration: The presence of particles and turbidity. Do Phipladelphia, 483, 1983.
not use. 2. Yang Y et al. Curr Dir Autoimmun 2004: 7: 98-132.
Do not freeze; frozen Antibody or Diluent could change the 3. Borque L et al. Clin Biochem 1983; 16: 330-333.
funcitionality of the test. 4. Pesce AJ and Kaplan, LA. Methods in Clinical Chemistry. The CV Mosby Company,
St. Louis MO, 1987.
5. Dati F et al. Eur J Clin Chem Clin Biochem 1996; 34: 517-520.
ADDITIONAL EQUIPMENT 6. Young DS.Effects of disease on clinical laboratory tests, 3th ed. AACC Pres, 1997.
- MINDRAY BS-120 / BS-200E autoanalyzer. 7. Friedman and Young. Effects of disease on clinical laboratory tests, 3tn ed. AACC
- Laboratory equipment. Pres, 1997.
PACKAGING
SAMPLES
Fresh serum or plasma. EDTA or heparin should be used as R1.Diluent: 2 x 30 mL
Ref.: MI1102104
anticoagulant. Stable 7 days at 2-8ºC or 3 months at –20ºC. Cont. R2.Antibody: 1 x 15 mL
The samples with presence of fibrin should be centrifuged.
Do not use highly hemolized or lipemic samples.

MIITIS37-I 24/01/13 SPINREACT,S.A./S.A.U. Ctra.Santa Coloma, 7 E-17176 SANT ESTEVE DE BAS (GI) SPAIN
Tel. +34 972 69 08 00 Fax +34 972 69 00 99 e-mail: [email protected]
 C4

Complemento C4
Turbidimetría

Determinación cuantitativa del complemento C4 (C4) APLICACIÓN AL MINDRAY BS-120 / BS-200E

IVD
PARAMETROS
Conservar a 2 - 8ºC. Nombre Abrev C4 R1 240
Numero ** R2 60
PRINCIPIO DEL METODO
Los anticuerpos anti-C4 forman compuestos insolubles cuando se Nombre C4 Volumen muestra 6
combinan con el C4 de la muestra del paciente, ocasionando un cambio Num standard Blanco R1
de absorbancia proporcional a la concentración de C4 en la muestra, y Modo Punto final Blanco mezcla reactivo *
que puede ser cuantificada por comparación con un calibrador de C4 de
concentración conocida. Long onda primaria 340 nm Rango linealidad *
Long onda secundaria Límite lineralidad 100mg/dL
SIGNIFICADO CLINICO1 Dirección Aumentar Límite Substrato *
El complemento C4 es el segundo componente reactivo de la vía
Tiempo reacción 1-7 / -1-10 Factor
clásica de activación del complemento. Es una proteína sintetizada por
el hígado, aunque también pude ser sintetizado por los monocitos u Tiempo Incubación Efecto Prozona *
otros tejidos. Unidades mg/dL q1 q2
La concentración de C4 en plasma, aumenta como consecuencia de una
Precision Entero q3 q4
respuesta de fase aguda (trauma, inflamación o necrosis tisular).
Una deficiencia genética completa induce una disminución de la PC Abs
concentración de C4 en plasma, asociada a una elevada prevalencia de CALIBRACIÓN (CAL + BL REACTIVO)
enfermedades autoinmunes o colágeno-vasculares , particularmente, el
BS120 (MANUAL) / BS200E (AUTODILUCION)
Lupus Eritematoso Sistémico (SLE). También su concentración puede
disminuir como consecuencia del consumo en la formación de complejos Tipo curva Spline
inmuno. Sensibilidad 1
Replicados 2
REACTIVOS
Intervalos (días) 0
Tampón tris 20 mmol/L, PEG 8000, pH, 8,3.
Diluyente (R1) CALIBRACION BS200E (DILUCION) →5 PUNTOS CAL DIL + 1 PUNTO DE AGUA
Azida sódica 0,95 g/L.
Suero de cabra, anti-C4 humana, pH 7,5. Azida Nº CAL DIL CONCENTRACION MUESTRA DIL DIL VOL VOL MUESTRA
Anticuerpo (R2) 1 CAL *0.1 13.0 115 6.0
sódica 0,95 g/L.
2 CAL *0.25 38.0 115 6.0
Opcional: Cod: 1102003 PROT CAL. 3 CAL *0.5 38.0 115 12.0
4 CAL *0.75 38.0 115 18.0
CALIBRACION 5 CAL *1 6.0
El ensayo está estandarizado frente al Material de Referencia CRM
470/RPHS (Institute for Reference Materials and Measurements, IRMM). Es necesario solicitar el blanco en este parámetro para obtener
Debe utilizarse el PROT CAL para la calibración. El reactivo (tanto resultados correctos en la pantalla principal de CALIB. La Calibración
monoreactivo como bireactivo) se debe recalibrar cada 2 semanas, junto al blanco de reactivo es estable hasta 35 días. Pasado este
cuando los controles están fuera de especificaciones, y cuando el lote de período es necesario solicitar de nuevo el blanco de reactivo para hacer
reactivo o la configuración del instrumento cambia. validar la calibración.

PREPARACION VALORES DE REFERENCIA4

Reactivos: Listos Para el uso. Recién nacidos: Entre 13 - 38 mg/dL.
Curva de Calibración: Preparar las siguientes diluciones del PROT Adultos: Entre 10 – 40 mg/dL.
CAL en ClNa 9 g/L como diluyente. Para obtener las concentraciones Es recomendable que cada laboratorio establezca sus propios valores
de cada dilución de C4, multiplicar la concentración de C4 del calibrador de referencia.
por el factor correspondiente indicado en la tabla: CONTROL DE CALIDAD
Dilución calibrador 1 2 3 4 5 6 Se recomienda utilizar sueros control para controlar los ensayos tanto
Calibrador (µL) -- 10 25 50 75 100 en procedimiento manual como en automático. Spinreact dispone del
ClNa 9 g/L (µL) 100 90 75 50 25 - PROT CONTROL cod: 1102004.
Factor 0 0.1 0,25 0,5 0,75 1,0 Cada laboratorio debería establecer su propio Control de Calidad y
establecer correcciones en el caso de que los controles no cumplan con
CONSERVACION Y ESTABILIDAD las tolerancias exigidas.
Todos los componentes del kit son estables hasta la fecha de caducidad NOTAS
cuando se mantienen los viales bien cerrados a 2-8ºC, y se evita la 1. El diagnóstico clínico no debe realizarse únicamente con los
contaminación durante su uso. No utilizar reactivos que hayan resultados de un único ensayo, sino que debe considerarse al
sobrepasado la fecha de caducidad. mismo tiempo los datos clínicos del paciente.
Indicadores de deterioro: Presencia de partículas y turbidez.
No congelar; la congelación del Anticuerpo o Diluyente puede afectar la BIBLIOGRAFIA
funcionalidad de los mismos. 1. Clinical Guide to Laboratory Tests, Edited by NW Tietz W B Saunders Co.,
Phipladelphia, 483, 1983.
MATERIAL ADICIONAL 2. Yang Y et al. Curr Dir Autoimmun 2004: 7: 98-132.
3. Borque L et al. Clin Biochem 1983; 16: 330-333.
- Autoanalizador MINDRAY BS-120 / BS-200E.
4. Pesce AJ and Kaplan, LA. Methods in Clinical Chemistry. The CV Mosby
- Equipamiento habitual de laboratorio. Company, St. Louis MO, 1987.
5. Dati F et al. Eur J Clin Chem Clin Biochem 1996; 34: 517-520.
MUESTRAS 6. Young DS.Effects of disease on clinical laboratory tests, 3th ed. AACC Pres,
Suero o plasma fresco, recogido con heparina o EDTA como 1997.
anticoagulantes. Estable 7 días a 2-8ºC o 3 meses a -20ºC. 7. Friedman and Young. Effects of disease on clinical laboratory tests, 3tn ed.
Las muestras con restos de fibrina deben ser centrifugadas. AACC Pres, 1997.
No utilizar muestras altamente hemolizadas o lipémicas. PRESENTACION
Ref.: MI1102104 R1.Diluyente: 2 x 30 mL
Cont. R2.Anticuerpo: 1 x 15 mL

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