English

/ EDTA CSF Sample Storage Tube

shipment during extreme temperature conditions. TransFix/EDTA CSF Sample

INSTRUCTIONS FOR USE Storage Tubes must be stored at 2-8°C on arrival.
Intended Purpose Unused TransFix/EDTA CSF Sample Storage Tubes are stable at 2-8°C for up to
12 months or until the expiration date on the label.
TransFix®/EDTA Cerebrospinal Fluid (CSF) Sample Storage Tubes are intended for
the stabilisation and storage of human CSF specimens for characterisation of TransFix/EDTA CSF Sample Storage Tubes are supplied in sealed foil pouches.
infiltrated white blood cells by flow cytometry. Recovery of infiltrated leucocyte
Instructions for Use
subsets can be accomplished over a 3-day period following stabilisation.
TransFix/EDTA CSF Sample Storage Tubes are for In Vitro Diagnostic Use. 1. Collect cerebrospinal fluid (CSF) by lumbar puncture according to the
relevant clinical standard.
Summary and Principles 2. TransFix/EDTA 1-4 mL CSF Tubes: Carefully mix the sample and transfer
1-4 mL CSF into the 5 mL tube using a manual pipette as soon as possible
Within CSF specimens, the qualitative and quantitative characterisation of
and no later than 1 hour after lumbar puncture.
infiltrated leucocytes via flow cytometry is an important tool for identification of
3. TransFix/EDTA 0.25-1 mL CSF Tubes: Carefully mix the sample and
various immunodeficiencies and haematologic diseases [1-4]. However, the
transfer 0.25-1 mL CSF into the 2 mL tube using a manual pipette as soon
number of leucocytes present in CSF is often very low and degrade quickly.
as possible and no later than 1 hour after lumbar puncture.
Therefore, assessment of these cells is reliant upon urgent analysis which is not
4. Gently mix the TransFix treated sample and close the cap.
always possible.
5. Store / transport the TransFix treated sample for up to 72 hours at 2-8°C.
Subsets of leucocytes can be distinguished by cell surface antigens using 6. Stain and analyse your stabilised CSF sample as per your usual CSF flow
fluorescent antibodies and flow cytometry. The TransFix stabiliser acts by cytometry protocol (N.B. see Notes)
preserving cell surface antigens of lymphocyte subsets until processing and
analysis can be performed. Notes
Addition of CSF to TransFix/EDTA CSF Sample Storage Tubes at the time of 1. It is recommended that all antibody conjugates are validated in
lumbar puncture has been shown to significantly extend the integrity of these association with TransFix/EDTA CSF Sample Storage Tubes prior to use.
leucocytes compared to unstabilised samples or stabilisation by other methods 2. Use caution when implementing automatic gating strategies as light
[1, see Representative Data Figure 1]. TransFix/EDTA preserves the cell surface scatter positions of cells stabilised by TransFix may differ from those of
antigens until processing and analysis can be performed [1, 2]. untreated cells.
3. Gating for lymphocytes should be performed on CD45+/SSc.
TransFix/EDTA CSF 1-4 mL Sample Storage Tubes consist of 5 mL polypropylene
4. If calculating absolute cell counts, the dilution with TransFix/EDTA must
vials containing 0.2 mL TransFix/EDTA suitable for stabilising 1-4 mL of CSF.
be accounted for. I.e., for a sample size of 1 mL adjust the absolute cell
TransFix/EDTA CSF 0.25-1 mL Sample Storage Tubes consist of 2 mL count by multiplying the output by 1.2. For a sample size of 2 mL adjust
polypropylene vials containing 0.05 mL TransFix/EDTA suitable for stabilising the absolute cell count by multiplying the output by 1.1, etc.
0.25-1 mL of CSF.
Disposal
Precautions and Warnings
TransFix/EDTA (EU Waste Code 18-01-06) contains formaldehyde which should
1. TransFix/EDTA CSFSample Storage Tube is intended for use as specified in be disposed of in accordance with local regulations. Avoid disposing into
this document. It is an ‘In Vitro Diagnostic’ product for professional use drainage systems and the environment.
only.
Once the TransFix/EDTA CSF Sample Storage Tube contains a biological sample
2. TransFix/EDTA CSF Sample Storage Tubes are only for use with flow
it must be considered an ‘Absolute Hazard’ (EU Waste Code 18-01-03) and
cytometry analysis.
disposal is in accordance with local regulations regarding clinical waste.
3. TransFix/EDTA CSF Sample Storage Tubes must be stored at 2-8°C. Do not
freeze. References
4. Use the correct volume of CSF to ensure accurate results.
5. Do not use after the expiration date on the tubes and packaging. 1. Use of TransFix Cerebrospinal Fluid Storage Tubes Prevents Cellular Loss
6. Do not dilute or add other components to the tube before use. and Enhances Flow Cytometric Detection of Malignant Haematological
7. Do not use cell viability stains on samples treated with TransFix as they Cells after 18 Hours of Storage. De Jongste et. al., Cytometry Part
are fixed instantaneously. B 2014; 86B: 272– 279.
8. TransFix/EDTA CSF Sample Storage Tubes are single-use only. Do not re- 2. Guidelines on the use of Multicolour Flow Cytometry in the Diagnosis of
use. Haematological Neoplasms. Johansson et. al., British Journal of
9. TransFix treated samples and all materials coming into contact with it Haematology, 2014, 165, 455-488.
should be handled as if capable of transmitting infection. 3. Flow Cytometric Characterization of Cerebrospinal Fluid Cells. De Graaf
10. Avoid contact of TransFix treated samples with the skin and mucous MT et. al., Cytometry, 2011, 80B: 271-281.
membranes. The cell preservative is an irritant and any contact should be 4. ESCCA/ISCCA Protocol for the Analysis of Cerebrospinal Fluid by
washed off with soap and water immediately. Multiparametric Flow‐cytometry in Hematological Malignancies. Del
11. Safety Data Sheet can be obtained at www.cytomark.co.uk or by calling Principe et. al., Cytometry, 2020; 1– 13.
+44(0)1280 827460. See overleaf for ordering information
Reagents Cytomark, a Division of Caltag Medsystems Ltd.
TransFix/EDTA is a clear green liquid containing formaldehyde and other Caltag Medsystems Ltd, Whiteleaf Business Centre, 11
chemicals.
Little Balmer, Buckingham, MK18 1TF, UK
Indications of Product Deterioration
Advena Ltd, Tower Business Centre, 2nd Flr,
1. Cloudiness or precipitate visible in the TransFix/EDTA. Tower Street, Swatar, BKR 4013, Malta
2. Colour change of TransFix/EDTA from a clear green liquid.
3. TransFix/EDTA change from liquid to solid.
If indications of product deterioration occur, do not use and contact Cytomark
immediately on: +44(0)1280 827460 or [email protected].
Pre-Use Storage Conditions and Stability
TransFix/EDTA CSF Sample Storage Tubes are shipped in ambient conditions,
between temperatures of -5°C to 26°C. Additional insulation may be required for

IFU CSF CE IVD, Revision 2, 2023-01

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/ EDTA CSF Sample Storage Tube

REPRESENTATIVE DATA (P-CSF-005 REPORT Length of Stabilisation of CSF Figure 1 d. CD45+CD3-CD56+ NK Cells
Samples treated with TransFix/EDTA (MC009), Caltag Medsystems Ltd 2021–
unpublished) 6
Figure 1 a-e. shows recovery of monocytes, T cell subsets, NK cells and B cells
5
from Mock CSF (Thermo Fisher Scientific MAS-CSF (CSF-MP) spiked with

Events (thousands)
PBMCs) stabilised with TransFix/EDTA, basal RPMI and complete RPMI, and 4
compared to unstabilised Mock CSF (control) at various time points. Data from
three replicates for each sample were averaged at each time point. Each 3
replicate was 100 µL of sample at approximately 1x106 PBMCs/mL, so a total of
approximately 100,000 PBMCs per replicate in each tube. 2

Figure 1 a. CD45+CD3+CD4+ T Cells 1

0
20
0 0.5 1.5 3 24 48 72
Time (hours)
Events (thousands)

15
Control TransFix/EDTA RPMI Basal RPMI Complete

10
Figure 1 e. CD45+CD14+ Monocytes

5
14
0 12
Events (thousands)

0 0.5 1.5 3 24 48 72 10
Time (hours)
8
Control TransFix/EDTA RPMI Basal RPMI Complete
6
4
Figure 1 b. CD45+CD3+CD8+ T Cells
2
12 0
0 0.5 1.5 3 24 48 72
10 Time (hours)
Events (thousands)

8 Control TransFix/EDTA RPMI Basal RPMI Complete

4
Ordering Information
2 Please call Cytomark on +44(0)1280 827460 or email [email protected]
0 for assistance. Additional information can be found online at
www.cytomark.co.uk. A certificate of conformity can be provided with every
0 0.5 1.5 3 24 48 72
Time (hours) batch of TransFix/EDTA CSF Sample Storage Tubes.

Control TransFix/EDTA RPMI Basal RPMI Complete In case of any serious incident, please contact the legal manufacturer Caltag
Medsystems (via Cytomark) and the competent authority of the Member State
in which the user and/or the patient is established.
Figure 1 c. CD45+CD3-CD19+CD20+ B Cells
Product Description Catalogue
5 Numbers
TransFix / EDTA CSF 0.25-1 mL Sample Storage Tube TF-CSF-S-2
4 (2 tubes)
Event (thousands)

3 TransFix / EDTA CSF 0.25-1 mL Sample Storage Tube TF-CSF-S-10

(10 tubes)
2 TransFix / EDTA CSF 0.25-1 mL Sample Storage Tube TF-CSF-S-50
(50 tubes)
1
TransFix / EDTA CSF 1-4 mL Sample Storage Tube (2 tubes) TF-CSF-L-2
0 TransFix / EDTA CSF 1-4 mL Sample Storage Tube (10 tubes) TF-CSF-L-10
0 0.5 1.5 3 24 48 72
Time (hours) TransFix / EDTA CSF 1-4 mL Sample Storage Tube (50 tubes) TF-CSF-L-50

Control TransFix/EDTA RPMI Basal RPMI Complete

IFU CSF CE IVD, Revision 2, 2023-01

 Čeština
/ EDTA CSF zkumavka k uložení vzorku

NÁVOD K POUŽITÍ Nepoužité zkumavky TransFix/EDTA CSF k uložení vzorků jsou stabilní při
teplotách 2-8°C až po dobu 12 měsíců nebo do data exspirace uvedeného na
Zamýšlené použití štítku.
Zkumavky TransFix®/EDTA k uložení vzorků mozkomíšního moku (cerebrospinal
fluid, CSF) jsou určeny ke stabilizaci a uložení vzorků lidského CSF pro Zkumavky TransFix/EDTA CSF k uložení vzorků se dodávají v uzavřených sáčcích.
charakterizaci infiltrovaných bílých krvinek pomocí cytometrie. Získání Návod k použití
podmnožin infiltrovaných leukocytů je možné během 3 dní po stabilizaci. 1. Odeberte mozkomíšní mok (CSF) prostřednictvím lumbální punkce podle
Zkumavky TransFix/EDTA CSF k uložení vzorků jsou určeny k diagnostickému příslušné klinické normy.
použití in vitro. 2. TransFix/EDTA CSF 1-4 mL k uložení vzorků: Opatrně přeneste 1-4 mL
CSF do 5 mL zkumavky manuální pipetou co možná nejdříve, ale nejdéle 1
Shrnutí a zásady hodinu pro provedení lumbální punkce.
U vzorků CSF je kvalitativní a kvantitativní charakterizace infiltrovaných 3. TransFix/EDTA CSF 0.25-1 mL k uložení vzorků: Opatrně přeneste 0.25-1
leukocytů pomocí cytometrie důležitým nástrojem pro zjišťování různých mL CSF do 2 mL zkumavky manuální pipetou co možná nejdříve, ale
imunodeficiencí a hematologických onemocnění [1-4]. Nicméně, leukocyty se nejdéle 1 hodinu pro provedení lumbální punkce.
v CSF obvykle nacházejí v nízkém počtu a rychle degradují. Vyšetření těchto 4. Opatrně promíchejte vzorek ošetřený látkou TransFix a uzavřete víčko.
buněk proto vyžaduje rychlou analýzu, což není vždy možné. 5. Vzorek ošetřený látkou TransFix uchovávejte / přepravujte až po dobu 72
Podmnožiny leukocytů lze rozeznat podle povrchových antigenů pomocí hodin při teplotách 2-8°C.
fluorescenčně značených protilátek a průtokové cytometrie. Stabilizátor 6. Stabilizovaný vzorek CSF obarvěte a analyzujte podle Vašeho obvyklého
TransFix uchovává povrchové antigeny u podmnožin lymfocytů do doby, kdy je protokolu pro průtokovou cytometrii CSF (věnujte pozornost
možno provést zpracování a analýzu. poznámkám)
Bylo prokázáno, že se přidáním CSF do zkumavek TransFix/EDTA CSF k uložení Poznámky
vzorků v okamžik lumbální punkce významně zvýší integrita těchto leukocytů ve 1. Doporučuje se před použitím validovat všechny konjugáty protilátek ve
srovnání s nestabilizovanými vzorky nebo se vzorky stabilizovanými jinými spojení se zkumavkami TransFix/EDTA CSF k uložení vzorků.
způsoby [1, viz reprezentativní údaje obr. 1]. TransFix/EDTA uchovává povrchové 2. U strategií automatického třídění je zapotřebí postupovat obzvlášť
antigeny do doby, kdy je možné provést zpracování a analýzu [1, 2]. opatrně, protože pozice buněk stabilizovaných látkou TransFix pro rozptyl
světla se mohou lišit od pozic neošetřených buněk.
Zkumavky TransFix/EDTA CSF 1-4 mL k uložení vzorků se skládají z 5 mL
3. Třídění lymfocytů by mělo být prováděno u CD45+/SSc.
polypropylenových lahviček s 0,2 mL TransFix/EDTA a jsou vhodné ke stabilizaci
4. Při výpočtu absolutních počtů buněk je zapotřebí zohlednit naředění
1-4 mL CSF.
TransFix/EDTA. To znamená, že absolutní počet buněk u vzorku o velikosti
Zkumavky TransFix/EDTA CSF 0.25-1 mL k uložení vzorků se skládají z 2 mL 1 mL se musí upravit znásobením výsledku číslem 1,2. Výsledek u vzorku
polypropylenových lahviček s 0,05 mL TransFix/EDTA a jsou vhodné ke stabilizaci o velikosti 2 mL je zapotřebí upravit znásobením číslem 1,1 atd.
0.25-1 mL CSF.
Likvidace
Opatření a upozornění TransFix/EDTA (EU kód pro odpad 18-01-06) obsahuje formaldehyd, který se
1. Zkumavka TransFix/EDTA CSF k uložení vzorku je určena pro použití musí likvidovat v souladu s místními předpisy. Zamezte likvidaci do kanalizace či
definované v tomto dokumentu. Jedná se o diagnostický produkt in vitro prostředí.
výhradně pro profesionální použití.
Jakmile je do zkumavky TransFix/EDTA CSF k uložení vzorku vložen biologický
2. Zkumavky TransFix/EDTA CSF k uložení vzorků jsou určeny výhradně pro
vzorek, musí se považovat za „absolutně nebezpečný“ odpad (EU kód pro odpad
analýzu prostřednictvím průtokové cytometrie.
18-01-03) a musí být likvidován v souladu s místními předpisy pro klinický odpad.
3. Zkumavky TransFix/EDTA CSF k uložení vzorků se musí skladovat při
teplotách 2-8°C. Nezmrazujte. Odkazy
4. Pro přesné výsledky je nutné použít správný objem CSF. 1. Use of TransFix Cerebrospinal Fluid Storage Tubes Prevents Cellular Loss
5. Nepoužívejte po uplynutí data exspirace uvedeného na zkumavkách a and Enhances Flow Cytometric Detection of Malignant Haematological
obalu. Cells after 18 Hours of Storage. De Jongste et. al., Cytometry Part
6. Před použitím zkumavky obsah neřeďte a nepřidávejte žádné další složky. B 2014; 86B: 272– 279.
7. U vzorků ošetřených látkou TransFix nepoužívejte přípravky pro zajištění 2. Guidelines on the use of Multicolour Flow Cytometry in the Diagnosis of
životaschopnosti buněk, protože tyto vzorky jsou okamžitě zafixovány. Haematological Neoplasms. Johansson et. al., British Journal of
8. Zkumavky TransFix/EDTA CSF k uložení vzorků jsou určeny Haematology, 2014, 165, 455-488.
k jednorázovému použití. Nepoužívejte opakovaně. 3. Flow Cytometric Characterization of Cerebrospinal Fluid Cells. De Graaf
9. Se vzorky ošetřenými látkou TransFix a všemi materiály, které s touto MT et. al., Cytometry, 2011, 80B: 271-281.
látkou přišly do styku, by se mělo zacházet jako s materiálem schopným 4. ESCCA/ISCCA Protocol for the Analysis of Cerebrospinal Fluid by
přenášet infekce. Multiparametric Flow‐cytometry in Hematological Malignancies. Del
10. Zamezte kontaktu vzorků ošetřených látkou TransFix s kůží a sliznicemi. Principe et. al., Cytometry, 2020; 1– 13.
Buněčný konzervant je dráždivá látka a proto je nutné jakýkoli kontakt
řešit okamžitým omýváním mýdlem a vodou. Informace k objednávkám
11. Bezpečnostní list je k dispozici na www.cytomark.co.uk nebo na telefonním S žádostí o pomoc kontaktujte Cytomark telefonicky na čísle +44(0)1280 827460
čísle +44(0)1280 827460. nebo e-mailem na adrese [email protected]. Další informace jsou
k dispozici online na www.cytomark.co.uk. Potvrzení o shodě lze poskytnout
Reagencie s každou dávkou zkumavek TransFix/EDTA CSF k uložení vzorků.
TransFix/EDTA je čirá zelená kapalina obsahující formaldehyd a další chemikálie.
V případě jakéhokoli vážného incidentu kontaktujte prosím zákonného výrobce
Známky zhoršování kvality produktu Caltag Medsystems (prostřednictvím Cytomark) a příslušný úřad členského
1. Viditelné zakalení nebo sraženina v látce TransFix/EDTA. státu, kde je uživatel a/nebo pacient usazen.
2. Změna barvy látky TransFix/EDTA na jinou z čiré zelené kapaliny.
3. Změna skupenství látky TransFix/EDTA z kapaliny na pevnou látku. Cytomark, divize společnosti Caltag Medsystems Ltd.
Pokud se objeví známky zhoršování kvality produktu, nepoužívejte jej a okamžitě
kontaktujte na: +44(0)1280 827460 nebo [email protected]. Caltag Medsystems Ltd, Whiteleaf Business Centre, 11
Little Balmer, Buckingham, MK18 1TF, UK
Skladovací podmínky před použitím a stabilita
Zkumavky TransFix/EDTA CSF k uložení vzorků se dodávají při podmínkách Advena Ltd, Tower Business Centre, 2nd Flr,
okolního prostředí při teplotách od -5°C do 26°C. Při dodávce v extrémních
Tower Street, Swatar, BKR 4013, Malta
teplotách může být nezbytná dodatečná izolace. Zkumavky TransFix/EDTA CSF
k uložení vzorků se musí po dodání skladovat při teplotách 2-8°C.

IFU CSF CE IVD, revize 2, 2023-01

 Čeština
/ EDTA CSF zkumavka k uložení vzorku

Popis produktu Katalogová Obr. 1 c. CD45+CD3-CD19+CD20+ B buňky

čísla
Zkumavka TransFix / EDTA CSF 0.25-1 mL k uložení TF-CSF-S-2 5
vzorku (2 zkumavky)
Zkumavka TransFix / EDTA CSF 0.25-1 mL k uložení TF-CSF-S-10 4
vzorku (10 zkumavek)

Příhoda (tis.)
Zkumavka TransFix / EDTA CSF 0.25-1 mL k uložení TF-CSF-S-50 3
vzorku (50 zkumavek)
Zkumavka TransFix / EDTA CSF 1-4 mL k uložení vzorku TF-CSF-L-2 2
(2 zkumavky)
Zkumavka TransFix / EDTA CSF 1-4 mL k uložení vzorku TF-CSF-L-10
1
(10 zkumavek)
Zkumavka TransFix / EDTA CSF 1-4 mL k uložení vzorku TF-CSF-L-50
0
(50 zkumavek)
0 0.5 1.5 3 24 48 72
Čas (hod.)
REPREZENTATIVNÍ ÚDAJE (P-CSF-005 REPORT doba trvání stabilizace vzorků Control TransFix/EDTA RPMI Basal RPMI Complete
CSF ošetřených látkou TransFix/EDTA (MC009), Caltag Medsystems Ltd 2021–
nepublikováno)
Obr. 1 d. CD45+CD3-CD56+ NK buňky
Na obrázcích 1 a-e je ukázáno zjištění podmnožin monocytů, T buněk, NK
buněk a B buněk v imitaci CSF (Thermo Fisher Scientific MAS-CSF (CSF-MP) s
přidanými PBMCs) stabilizované látkou TransFix/EDTA, bazální RPMI a 6
kompletní RPMI, a ve srovnání s nestabilizovanou imitací CSF (kontrola) 5
v různých časových bodech. Údaje ze třech opakování s každým ze vzorků byly
zprůměrovány v každém časovém bodě. Každé opakování bylo 100 µL vzorku s Příhody (tis.) 4
přibližně 1x106 PBMCs/mL, což znamená přibližně 100 000 PBMCs na každé
opakování v každé zkumavce. 3

Obr. 1 a. CD45+CD3+CD4+ T buňky 2

20 1

0
15 0 0.5 1.5 3 24 48 72
Příhody (tis.)

Čas (hod.)
10 Control TransFix/EDTA RPMI Basal RPMI Complete

5 Obr. 1 e. CD45+CD14+ monocyty

0 14
0 0.5 1.5 3 24 48 72
Čas (hod.) 12
10
Control TransFix/EDTA RPMI Basal RPMI Complete
Příhody (tis.)

Obr. 1 b. CD45+CD3+CD8+ T buňky 6

4
12 2
10 0
0 0.5 1.5 3 24 48 72
8
Příhody (tis.)

Čas (hod.)
6 Control TransFix/EDTA RPMI Basal RPMI Complete

0
0 0.5 1.5 3 24 48 72
Čas (hod.)
Control TransFix/EDTA RPMI Basal RPMI Complete

IFU CSF CE IVD, revize 2, 2023-01

 Dansk

/ EDTA CSF Prøveopbevaringsrør

INSTRUKTIONER FOR BRUG Ubrugte TransFix/EDTA CSF prøveopbevaringsrør er stabile ved 2-8°C i op til 12
måneder, eller indtil udløbsdatoen på mærkatet.
Anvendelsesformål
TransFix®/EDTA Cerebrospinavæske (CSF) prøveopbevaringsrør er beregnet til TransFix/EDTA CSF prøveopbevaringsrør leveres i forseglede poser.
stabilisering og opbevaring af humane CSV-prøver til karakterisering af Instruktioner for brug
infiltrerede hvide blodlegemer ved hjælp af flowcytometri. Gendannelse af 1. Opsa mL cerebrospinalvæske (CSF) ved lumbal punktering i henhold til
infiltrerede leukocytundergrupper kan udføres over en 3 dages periode efter den relevante kliniske standard.
stabilisering. 2. TransFix/EDTA CSF 1-4 mL prøveopbevaringsrør: Overfør forsigtigt 1–4
TransFix/EDTA CSF Prøveopbevaringsrør er til In Vitro diagnostic brug. mL CSF til 5 mL røret ved brug af en manuel pipette så hurtigt som muligt,
og ikke senere end en time efter lumbal punktering.
Resumé og principper 3. TransFix/EDTA CSF 0.25-1 mL prøveopbevaringsrør: Overfør forsigtigt
Indenfor CSF-prøver, er den kvalitative og kvantitative karakterisering af 0.25-1 mL CSF til 2 mL røret ved brug af en manuel pipette så hurtigt som
infiltrerede leukocytter via flowcytometri et vigtigt redskab til identifikation af muligt, og ikke senere end en time efter lumbal punktering.
forskellige immundefekter og hæmatologiske sygdomme [1-4]. Imidlertid er 4. Bland forsigtigt den TransFix behandlede prøve og luk hætten.
antallet af leukocytter til stede i CSF ofte meget lavt og nedbrydes hurtigt. Derfor 5. Opbevar / transporter den TransFix behandlede prøve i op til 72 timer
er vurdering af disse celler afhængig af hasteanalyse, hvilket ikke altid er muligt. ved 2-8°C.
Undergrupper af leukocytter kan skelnes ved overfladeantigener ved hjælp af 6. Plet og analyser din stabiliserede CSF-prøve i henhold til din sædvanlige
fluorescerende antistoffer og flowcytometri. TransFix-stabilisatoren virker ved CSF-cytometriprotokol (N.B. se noter)
at bevare celleoverfladeantigener i lymfocytundergrupper, indtil behandling og Noter
analyse kan udføres. 1. Det anbefales at alle antistofkonjugater valideres i forbindelse med
Tilføjelse af CSF til TransFix/EDTA CSF prøveopbevaringsrør på tidspunktet for TransFix/EDTA CSF prøveopbevaringsrør før brug.
lumbal punktering har vist sig at øge integriteten af disse leukocytter betydeligt 2. Vær forsigtig når du implementerer automatiske gating strategier, da
i forhold til ustabiliserede prøver eller stabilisering ved andre metoder [1, se lysspredningspositioner af celler stabiliseret med TransFix kan afvige fra
repræsentationsdata Figur 1]. TransFix/EDTA bevarer ubehandlede celler.
celleoverfladeantigenerne, indtil behandling og analyse kan udføres [1, 2]. 3. Gating for lymfocytter skal udføres på CD45+/SSc.
4. Når det absolutte celletal skal beregnes, skal opløsningen med
TransFix/EDTA CSF 1-4 mL prøveopbevaringsrør består af 5 mL polypropylen
TransFix/EDTA redegøres for. Det vil sige, for en prøve på 1 mL justeres
hætteglas indeholdende 0.2 mL TransFix/EDTA egnet til stabilisering af 1-4 mL
det absolutte celletal med 1,2 mL. For en prøve på 2 mL justeres det
CSF.
absolutte celletal ved at gange output med 1,1, og så videre.
TransFix/EDTA CSF 0.25-1 mL prøveopbevaringsrør består af 2 mL polypropylen
hætteglas indeholdende 0.2 mL TransFix/EDTA egnet til stabilisering af 0.25-1 Bortskaffelse
mL CSF. TransFix/EDTA (EU affaldskode 18-01-06) indeholder formaldehyd, som skal
bortskaffes jævnfør de lokale regler. Undgå at det hældes i afløb eller efterlades
Forholdsregler og advarsler i miljøet.
1. TransFix/EDTA CSF prøveopbevaringsrør er beregnet til brug som er
Når TransFix/EDTA CSF prøveopbevaringsrør indeholder en biologisk prøve, skal
specificeret i dette dokument. Det er et produkt ‘In vitro diagnostic’ kun
det betragtes som ‘absolut fare” (EU affaldskode 18-01-03) og bortskaffelse skal
til professionel brug.
ske jævnfør de lokale regler om klinisk affald.
2. TransFix/EDTA CSF prøveopbevaringsrør er kun til brug med
flowcytometrianalyse. Referencer
3. TransFix/EDTA CSF prøveopbevaringsrør skal opbevares ved 2-8°C. Må 1. Brug af cerebrospinalvæske opbevaringsrør forhindrer tab af celler og
ikke fryses. forbedrer flowcytometrisk detektion af ondartede hæmatologiske celler
4. Brug den korrekte mængde CSF for at sikre nøjagtige resultater. efter 18 timers opbevaring. De Jongste et. al., Cytometry Part
5. Må ikke benyttes efter den udløbsdato der er anført på rørene og B 2014; 86B: 272– 279.
pakningerne. 2. Retningslinjer for brug af flerfarvet flowcytometri til diagnosticering af
6. Der må ikke fortyndes eller tilsættes andre komponenter til røret før hæmatologiske neoplasmer. Johansson et. al., British Journal of
brug. Haematology, 2014, 165, 455-488.
7. Brug ikke cellelevedygtighedspletter på prøver behandlet med TransFix, 3. Flowcytometrisk karakterisering af cerebrospinalvæske. De Graaf MT et.
da de rettes øjeblikkeligt. al., Cytometry, 2011, 80B: 271-281.
8. TransFix/EDTA CSF prøveopbevaringsrør er kun til engangsbrug. Må ikke 4. ESCCA/ISCCA protokol til analyse af cerebrospinalvæske ved
genbruges. multiparametrisk flowcytometri ved hæmatologiske maligniteter. Del
9. TransFix-behandlede prøver og al materiale der kommer i kontakt med Principe et. al., Cytometry, 2020; 1– 13.
det, bør behandles som om det kan overføre infektion.
10. Undgå kontakt mellem TransFix behandlede prøve og hud og slimhinder. Bestillingsinformation
Cellebeskyttelsen er irriterende, og efter en eventuel kontakt, bør der Ring venligst til Cytomark på +44(0)1280 827460 eller email
straks vaskes med vand og sæbe. [email protected] for assistance. Yderligere information kan findes
11. Sikkerhedsdatablad kan fås på www.cytomark.co.uk eller ved at ringe til online på www.cytomark.co.uk. Der kan leveres et overensstemmelsescertifikat
+44(0)1280 827460. med hvert parti TransFix/EDTA CSF prøveopbevaringsrør.
I tilfælde af en alvorlig hændelse bedes du kontakte den lovlige producent Caltag
Reagenser
Medsystems (via Cytomark) og den kompetente myndighed i den medlemsstat,
TransFix/EDTA er en grøn væske der indeholder formaldehyd og andre
kemikalier. hvor brugeren og/eller patienten er etableret.

Tegn på forringelse af produktet

1. Synligt bundfald i TransFix/EDTA. Produktbeskrivelse Katalognumre
2. Farveskift af TransFix/EDTA fra en klar grøn væske. TransFix / EDTA CSF 0.25-1 mL prøveopbevaringsrør (2 rør) TF-CSF-S-2
3. TransFix/EDTA skifter fra væske til fast masse. TransFix / EDTA CSF 0.25-1 mL prøveopbevaringsrør (10 rør) TF-CSF-S-10
TransFix / EDTA CSF 0.25-1 mL prøveopbevaringsrør (50 rør) TF-CSF-S-50
Hvis der er tegn på forringelse af produktet må det ikke bruges, men kontakt da TransFix / EDTA CSF 1-4 mL prøveopbevaringsrør (2 rør) TF-CSF-L-2
Cytomark omgående på: +44(0)1280 827460 eller [email protected]. TransFix / EDTA CSF 1-4 mL prøveopbevaringsrør (10 rør) TF-CSF-L-10
Opbevaringsbetingelser og stabilitet før brug TransFix / EDTA CSF 1-4 mL prøveopbevaringsrør (50 rør) TF-CSF-L-50
TransFix/EDTA CSF prøveopbevaringsrør sendes i omgivebetingelser der ligger
mellem temperaturer på -5°C til 26°C. Yderligere isolering kan være påkrævet
under ekstreme temperaturforhold. TransFix/EDTA CSF prøveopbevaringsrør
skal efter ankomst opbevares ved 2-8°C.
IFU CSF CE IVD, Revision 2, 2023-01
 Dansk

/ EDTA CSF Prøveopbevaringsrør

Cytomark, en division af Caltag Medsystems Ltd. Figur 1 c. CD45+CD3-CD19+CD20+ B-celler

5
Caltag Medsystems Ltd, Whiteleaf Business Centre, 11
Little Balmer, Buckingham, MK18 1TF, UK

Begivenheder (tusinder)
4

Advena Ltd, Tower Business Centre, 2nd Flr, 3

Tower Street, Swatar, BKR 4013, Malta
2
REPRÆSENTANTSDATA (P-CSF-005 RAPPORT længde på stabilisering af CSV-
prøver behandlet med TransFix/EDTA (MC009), Caltag Medsystems Ltd 2021– 1
upubliseret)
0
Figur 1 a-e. viser genopretning af monocytter, T-celleundergrupper, NK-celler 0 0.5 1.5 3 24 48 72
og B-celler fra Mock CSF (Thermo Fisher Scientific MAS-CSF (CSF-MP) tilsat Tid (timer)
PBMCs) stabiliseret med TransFix/EDTA, basal RPMI og komplet RPMI, og Kontrol TransFix/EDTA RPMI Basal RPMI Complete
sammenlignet med ustabiliseret Mock CSF (kontrol) på forskellige tidspunkter.
Data fra tre replikater for hver prøve blev beregnet gennemsnitligt for hvert
tidspunkt. Hvert replikat var 100 µL med cirka 1x106 PBMCs/mL, så i alt cirka
100,000 PBMCs pr. replikat i hvert rør.
Figur 1 d. CD45+CD3-CD56+ NK-celler
Figur 1 a. CD45+CD3+CD4+ T-celler
6
20

Begivenheder (tusinder)
5
Begivenheder (tusinder)

15 4

3
10
2
5 1

0
0
0 0.5 1.5 3 24 48 72
0 0.5 1.5 3 24 48 72
Tid (timer) Tid (timer)
Kontrol TransFix/EDTA RPMI Basal RPMI Complete
Kontrol TransFix/EDTA RPMI Basal RPMI Complete

Figur 1 e. CD45+CD14+ Monocytter

Figur 1 b. CD45+CD3+CD8+ T-celler
14
12
12
Begivenheder (tusinder)
Begivenheder (tusinder)

10
10
8 8
6 6
4 4

2 2
0
0
0 0.5 1.5 3 24 48 72
0 0.5 1.5 3 24 48 72
Tid (timer) Tid (timer)
Kontrol TransFix/EDTA RPMI Basal RPMI Complete
Kontrol TransFix/EDTA RPMI Basal RPMI Complete

IFU CSF CE IVD, Revision 2, 2023-01

 Deutsch

/ EDTA CSF Probenaufbewahrungsröhrchen

GEBRAUCHSANWEISUNG 3. TransFix/EDTA wird von flüssig zu fest.

Wenn Anzeichen für eine Verschlechterung des Produkts auftreten, verwenden
Verwendungszweck
TransFix®/EDTA-Röhrchen zur Aufbewahrung von Liquorproben sind für die Sie es nicht und wenden Sie sich sofort an Cytomark: +44(0)1280 827460 oder
Stabilisierung und Lagerung von menschlichen Liquorproben zur [email protected].
Charakterisierung infiltrierter weißer Blutkörperchen mittels Lagerungsbedingungen und Stabilität vor der Verwendung
Durchflusszytometrie bestimmt. Die Erholung der infiltrierten TransFix/EDTA CSF Probenaufbewahrungsröhrchen werden unter
Leukozytenuntergruppen kann innerhalb von 3 Tagen nach der Stabilisierung Umgebungsbedingungen bei Temperaturen von -5°C bis 26°C versandt. Für den
erfolgen. Versand bei extremen Temperaturbedingungen kann eine zusätzliche Isolierung
TransFix/EDTA CSF Probenaufbewahrungsröhrchen sind für die in- erforderlich sein. TransFix/EDTA CSF Probenaufbewahrungsröhrchen müssen
vitroDiagnostik geeignet. bei der Ankunft bei 2-8°C gelagert werden.
Unbenutzte TransFix/EDTA CSF Probenlagerungsröhrchen sind bei 2-8°C bis zu
Zusammenfassung und Grundsätze
Die qualitative und quantitative Charakterisierung von infiltrierten Leukozyten 12 Monate oder bis zum Verfallsdatum auf dem Etikett haltbar.
in Liquorproben mittels Durchflusszytometrie ist ein wichtiges Instrument zur TransFix/EDTA CSF Probenaufbewahrungsröhrchen werden in versiegelten
Identifizierung verschiedener Immundefekte und hämatologischer Folienbeuteln geliefert.
Erkrankungen [1-4]. Die Zahl der Leukozyten im Liquor ist jedoch oft sehr gering
und wird schnell abgebaut. Daher ist die Bewertung dieser Zellen von einer Gebrauchsanweisung
dringenden Analyse abhängig, die nicht immer möglich ist. 1. Entnehmen Sie Liquor durch Lumbalpunktion nach dem einschlägigen
klinischen Standard.
Untergruppen von Leukozyten können anhand von Zelloberflächenantigenen 2. TransFix / EDTA CSF 1-4 mL Probenaufbewahrungsröhrchen: Übertragen
mit Hilfe von fluoreszierenden Antikörpern und Durchflusszytometrie Sie vorsichtig 1-4 mL Liquor mit einer Handpipette in das 5- mL-Röhrchen,
unterschieden werden. Der TransFix-Stabilisator bewahrt die und zwar so schnell wie möglich, spätestens jedoch 1 Stunde nach der
Zelloberflächenantigene von Lymphozyten-Untergruppen, bis die Verarbeitung Lumbalpunktion.
und Analyse durchgeführt werden kann. 3. TransFix / EDTA CSF 0.25-1 mL Probenaufbewahrungsröhrchen:
Es hat sich gezeigt, dass die Zugabe von Liquor zu TransFix/EDTA-CSF Übertragen Sie vorsichtig 0.25-1 mL Liquor mit einer Handpipette in das
Probenaufbewahrungsröhrchen zum Zeitpunkt der Lumbalpunktion die 2- mL-Röhrchen, und zwar so schnell wie möglich, spätestens jedoch 1
Integrität dieser Leukozyten im Vergleich zu unstabilisierten Proben oder zur Stunde nach der Lumbalpunktion.
Stabilisierung durch andere Methoden deutlich erhöht [1, siehe Repräsentative 4. Mischen Sie die mit TransFix behandelte Probe vorsichtig und schließen
Daten Abbildung 1]. TransFix/EDTA bewahrt die Zelloberflächenantigene, bis die Sie die Kappe.
Verarbeitung und Analyse durchgeführt werden kann [1, 2]. 5. Lagern / transportieren Sie die mit TransFix behandelte Probe bis zu 72
Stunden bei 2-8°C.
TransFix/EDTA CSF 1-4 mL Probenaufbewahrungsröhrchen bestehen aus 5 mL 6. Färben und analysieren Sie Ihre stabilisierte Liquorprobe gemäß Ihrem
Polypropylen-Fläschchen, die 0,2 mL TransFix/EDTA enthalten und zur üblichen Liquor-Durchflusszytometrie-Protokoll (N.B.siehe
Stabilisierung von 1-4 mL Liquor geeignet sind. Anmerkungen).
TransFix/EDTA CSF 0.25-1 mL Probenaufbewahrungsröhrchen bestehen aus 2
mL Polypropylen-Fläschchen, die 0,05 mL TransFix/EDTA enthalten und zur Anmerkungen
1. Es wird empfohlen, alle Antikörperkonjugate vor ihrer Verwendung in
Stabilisierung von 1-4 mL Liquor geeignet sind.
Verbindung mit den TransFix/EDTA CSF Probenaufbewahrungsröhrchen
Vorsichtsmaßnahmen und Warnhinweise zu validieren.
1. Das TransFix/EDTA CSF Probenaufbewahrungsröhrchen ist für den in 2. Bei der Anwendung automatischer Gating-Strategien ist Vorsicht
diesem Dokument beschriebenen Gebrauch bestimmt. Es handelt sich um geboten, da sich die Streulichtpositionen der mit TransFix stabilisierten
ein "In-vitro-Diagnostikum", das nur für den professionellen Gebrauch Zellen von denen der unbehandelten Zellen unterscheiden können.
bestimmt ist. 3. Das Gating für Lymphozyten sollte auf CD45+/SSc durchgeführt werden.
2. TransFix/EDTA CSF Probenaufbewahrungsröhrchen sind nur für die 4. Bei der Berechnung der absoluten Zellzahlen muss die Verdünnung mit
Verwendung mit Durchflusszytometrie-Analysen bestimmt. TransFix/EDTA berücksichtigt werden. D.h. bei einer Probengröße von 1
3. TransFix/EDTA CSF Probenaufbewahrungsröhrchen müssen bei 2-8°C mL wird die absolute Zellzahl durch Multiplikation des Ergebnisses mit 1,2
gelagert werden. Nicht einfrieren. angepasst. Für eine Probengröße von 2 mL passen Sie die absolute
4. Verwenden Sie das richtige Liquorvolumen, um genaue Ergebnisse zu Zellzahl an, indem Sie das Ergebnis mit 1,1 multiplizieren, usw.
erzielen.
5. Nach Ablauf des Verfallsdatums auf den Röhrchen und der Verpackung Entsorgung
TransFix/EDTA (EU-Abfallverzeichnis 18-01-06) enthält Formaldehyd, das gemäß
nicht mehr verwenden.
6. Verdünnen Sie das Röhrchen nicht und fügen Sie keine anderen den örtlichen Vorschriften entsorgt werden muss. Nicht in die Kanalisation und
Komponenten hinzu, bevor Sie es verwenden. die Umwelt gelangen lassen.
7. Verwenden Sie keine Zelllebensfähigkeitsfärbungen für mit TransFix Sobald das TransFix/EDTA CSF Probenaufbewahrungsröhrchen eine biologische
behandelte Proben, da diese sofort fixiert werden. Probe enthält, muss es als "absolut gefährlich" (EU-Abfallverzeichnis 18-01-03)
8. TransFix/EDTA CSF Probenaufbewahrungsröhrchen sind nur für den eingestuft werden, und die Entsorgung erfolgt in Übereinstimmung mit den
einmaligen Gebrauch bestimmt. Nicht wiederverwenden. örtlichen Vorschriften für klinische Abfälle.
9. Mit TransFix behandelte Proben und alle Materialien, die mit TransFix in
Berührung kommen, sollten so behandelt werden, als ob sie eine Verweise
Infektion übertragen könnten. 1. Die Verwendung von TransFix-Röhrchen zur Aufbewahrung von Liquor
10. Vermeiden Sie den Kontakt der mit TransFix behandelten Proben mit der verhindert Zellverluste und verbessert den durchflusszytometrischen
Haut und den Schleimhäuten. Das Zellkonservierungsmittel ist reizend, Nachweis bösartiger hämatologischer Zellen nach 18-stündiger Lagerung.
und jeder Kontakt sollte sofort mit Wasser und Seife abgewaschen De Jongste et. al., Cytometry Part B 2014; 86B: 272– 279.
werden. 2. Leitlinien für den Einsatz der Mehrfarben-Durchflusszytometrie bei der
11. Das Sicherheitsdatenblatt ist erhältlich aufwww.cytomark.co.uk oder Diagnose hämatologischer Neoplasmen. Johansson et. al., British Journal
unter der Nummer +44(0)1280 827460. of Haematology, 2014, 165, 455-488.
3. Durchflusszytometrische Charakterisierung von Liquorzellen. De Graaf MT
Reagenzien et. al., Cytometry, 2011, 80B: 271-281.
TransFix/EDTA ist eine klare grüne Flüssigkeit, die Formaldehyd und andere 4. ESCCA/ISCCA-Protokoll für die Analyse von Liquor mittels
Chemikalien enthält. multiparametrischer Durchflusszytometrie bei hämatologischen
Malignomen. Del Principe et. al., Cytometry, 2020; 1– 13.
Anzeichen für eine Produktverschlechterung
1. Trübung oder Ausfällung im TransFix/EDTA sichtbar.
2. Farbänderung von TransFix/EDTA von einer klaren grünen Flüssigkeit.
IFU CSF CE IVD, Revision 2, 2023-01
 Deutsch

/ EDTA CSF Probenaufbewahrungsröhrchen

Bestellinformationen Abbildung 1 b. CD45+CD3+CD8+ T-Zellen

Bitte rufen Sie Cytomark unter +44(0)1280 827460 an oder senden Sie eine E-
Mail an [email protected], wenn Sie Hilfe benötigen. Weitere 12
Informationen finden Sie online unter www.cytomark.co.uk. Mit jeder Lieferung
10

Ereignisse (in Tausend)

von TransFix/EDTA CSF Probenaufbewahrungsröhrchen kann ein
Konformitätszertifikat mitgeliefert werden. 8
Im Falle eines schwerwiegenden Vorfalls wenden Sie sich bitte an den
rechtmäßigen Hersteller Caltag Medsystems (über Cytomark) und die zuständige 6
Behörde des Mitgliedstaats, in dem der Benutzer und/oder Patient
4
niedergelassen ist.
2

Product Description Katalognum 0

mern 0 0.5 1.5 3 24 48 72
TransFix / EDTA CSF 0.25-1 mL TF-CSF-S-2 Zeit (Stunden)
Probenaufbewahrungsröhrchen (2 Röhrchen) Control TransFix/EDTA RPMI Basal RPMI Complete
TransFix / EDTA CSF 0.25-1 mL TF-CSF-S-10
Probenaufbewahrungsröhrchen (10 Röhrchen)
TransFix / EDTA CSF 0.25-1 mL TF-CSF-S-50 Abbildung 1 c. CD45+CD3-CD19+CD20+ B-Zellen
Probenaufbewahrungsröhrchen (50 Röhrchen)
TransFix / EDTA CSF 1-4 mL TF-CSF-L-2 5
Probenaufbewahrungsröhrchen (2 Röhrchen)
4

Ereignis (in Tausend)

TransFix / EDTA CSF 1-4 mL TF-CSF-L-10
Probenaufbewahrungsröhrchen (10 Röhrchen)
TransFix / EDTA CSF 1-4 mL TF-CSF-L-50 3
Probenaufbewahrungsröhrchen (50 Röhrchen)
2
Cytomark, eine Abteilung von Caltag Medsystems Ltd.
1
Caltag Medsystems Ltd, Whiteleaf Business Centre, 11
Little Balmer, Buckingham, MK18 1TF, VK 0
0 0.5 1.5 3 24 48 72
Advena Ltd, Tower Business Centre, 2nd Flr, Zeit (Stunden)
Tower Street, Swatar, BKR 4013, Malta
Control TransFix/EDTA RPMI Basal RPMI Complete

REPRÄSENTATIVE DATEN (P-CSF-005 BERICHT über die Dauer der Abbildung 1 d. CD45+CD3-CD56+ NK-Zellen
Stabilisierung von mit TransFix/EDTA (MC009) behandelten Liquor-Proben,
Caltag Medsystems Ltd 2021 - unveröffentlicht) 6

5
Ereignisse (in Tausend)

Abbildung 1 a-e zeigt die Wiederfindung von Monozyten, T-Zell-Untergruppen,

NK-Zellen und B-Zellen aus mit PBMCs gespicktem Mock CSF (Thermo Fisher 4
Scientific MAS-CSF (CSF-MP)), der mit TransFix/EDTA, basalem RPMI und
vollständigem RPMI stabilisiert wurde, im Vergleich zu unstabilisiertem Mock 3
CSF (Kontrolle) zu verschiedenen Zeitpunkten. Die Daten von drei
Wiederholungen für jede Probe wurden zu jedem Zeitpunkt gemittelt. Jede 2
Wiederholung umfasste 100 µL der Probe bei etwa 1x106 PBMCs/mL, also 1
insgesamt etwa 100.000 PBMCs pro Replikat in jedem Röhrchen.
0
Abbildung 1 a. CD45+CD3+CD4+ T-Zellen
0 0.5 1.5 3 24 48 72
20
Zeit (Stunden)
Ereignisse (in Tausend)

Control TransFix/EDTA RPMI Basal RPMI Complete

15

Abbildung 1 e. CD45+CD14+ Monozyten

10
14
5 12
Ereignisse (in Tausend)

10
0
0 0.5 1.5 3 24 48 72 8
Zeit (Stunden) 6
Control TransFix/EDTA RPMI Basal RPMI Complete 4
2
0
0 0.5 1.5 3 24 48 72
Zeit (Stunden)
Control TransFix/EDTA RPMI Basal RPMI Complete

IFU CSF CE IVD, Revision 2, 2023-01

 Español

/ EDTA Tubo de almacenamiento de muestras de de LCR

INSTRUCCIONES DE USO Condiciones de almacenamiento previas al uso y estabilidad

Los tubos de almacenamiento de muestras de de LCR TransFix/EDTA se envían a
Uso previsto una temperatura ambiente de entre -5 °C a 26 °C. Puede ser necesario un
Los tubos de almacenamiento de muestras de líquido cefalorraquídeo (LCR) aislamiento adicional para el envío en condiciones de temperatura extremas. Los
TransFix®/EDTA están diseñados para la estabilización y el almacenamiento de tubos de almacenamiento de muestras de LCR TransFix/EDTA deben
muestras de LCR humano para la caracterización de leucocitos infiltrados almacenarse a 2-8 °C una vez recibidos.
mediante citometría de flujo. La recuperación de los subgrupos de leucocitos
Los tubos de almacenamiento de muestras de LCR TransFix/EDTA sin usar son
infiltrados puede realizarse en un periodo de 3 días tras la estabilización.
estables a una temperatura de 2-8 °C hasta 12 meses o hasta la fecha de
Los tubos de almacenamiento de muestras de LCR TransFix/EDTA son para uso caducidad de la etiqueta.
diagnóstico in vitro.
Los tubos de almacenamiento de muestras de LCR TransFix/EDTA se suministran
Resumen y principios en bolsas de aluminio selladas.
En las muestras de LCR, la caracterización cualitativa y cuantitativa de leucocitos
infiltrados mediante citometría de flujo constituye una valiosa herramienta para Instrucciones de uso
identificar diversas inmunodeficiencias y enfermedades hematológicas [1-4]. Sin 1. Extraiga el líquido cefalorraquídeo (LCR) mediante punción lumbar de
acuerdo con la normativa clínica pertinente.
embargo, el número de leucocitos presentes en el LCR suele ser muy bajo y se
deterioran rápidamente. Por lo tanto, la evaluación de estas células depende de 2. 1-4 mL de LCR TransFix/EDTA: Transfiera cuidadosamente 1-4 mL de LCR
al tubo de 5 mL utilizando una pipeta manual lo antes posible y como
un análisis urgente, algo que no siempre es posible.
máximo 1 hora después de la punción lumbar.
Los subgrupos de leucocitos pueden distinguirse por los antígenos en la 3. 0.25-1 mL de LCR TransFix/EDTA: Transfiera cuidadosamente 0.25-1 mL
superficie celular utilizando anticuerpos fluorescentes y mediante la citometría de LCR al tubo de 2 mL utilizando una pipeta manual lo antes posible y
de flujo. El estabilizador TransFix actúa preservando los antígenos de la como máximo 1 hora después de la punción lumbar
superficie celular de los subconjuntos de linfocitos hasta que se pueda realizar 4. Mezcle con cuidado la muestra tratada con TransFix y cierre el tapón.
el procesamiento y el análisis. 5. Almacene/transporte la muestra tratada con TransFix durante un máximo
Se ha demostrado que la adición de LCR a los tubos de almacenamiento de de 72 horas a 2-8 °C.
muestras de de LCR TransFix/EDTA en el momento de la punción lumbar amplía 6. Tinte y analice su muestra de LCR estabilizada según su protocolo
notablemente la integridad de estos leucocitos en comparación con las muestras habitual de citometría de flujo para LCR (N.B. ver Notas).
no estabilizadas o con la estabilización mediante otros métodos [1, ver Datos Notas
representativos Figura 1]. TransFix/EDTA conserva los antígenos de la superficie 1. Se recomienda que todos los conjugados de anticuerpos se validen junto
celular hasta que se pueda realizar el procesamiento y el análisis [1, 2]. con los tubos de almacenamiento de muestras de LCR TransFix/EDTA
Los tubos de almacenamiento de muestras de 1-4 mL de LCR TransFix/EDTA antes de su uso.
consisten en viales de polipropileno de 5 mL que contienen 0,2 mL de 2. Tenga precaución al aplicar estrategias de separación (gating) automática,
TransFix/EDTA apto para estabilizar 1-4 mL de LCR. ya que las posiciones de dispersión de la luz de las células estabilizadas
mediante TransFix pueden diferir de las de las células no tratadas.
Los tubos de almacenamiento de muestras de 0.25-1 mL de LCR TransFix/EDTA
3. El gating de los linfocitos debe realizarse en CD45+/SSc.
consisten en viales de polipropileno de 2 mL que contienen 0,05 mL de
4. Si se calcula el recuento absoluto de células, debe tenerse en cuenta la
TransFix/EDTA apto para estabilizar 0.25-1 mL de LCR.
dilución con TransFix/EDTA. Por ejemplo, para un tamaño de muestra de
Precauciones y avisos 1 mL, se debe ajustar el recuento celular absoluto multiplicando el
1. El tubo de almacenamiento de muestras de LCR TransFix/EDTA está resultado por 1,2. Para un tamaño de muestra de 2 mL, se debe ajustar el
previsto para su uso tal y como se especifica en este documento. Es un recuento celular absoluto multiplicando el resultado por 1,1, etc.
producto para «Diagnóstico in vitro» solo para uso profesional.
Eliminación
2. Los tubos de almacenamiento de muestras de LCR TransFix/EDTA solo
TransFix/EDTA (Código de Residuos de la UE 18-01-06) contiene formaldehído,
están previstos para uso con análisis de citometría de flujo.
que debe eliminarse de acuerdo con la normativa local. Evite los vertidos en los
3. Los tubos de almacenamiento de muestras de LCR TransFix/EDTA deben
sistemas de alcantarillado y en el medio ambiente.
almacenarse ente 2 y 8 °C. No congelar.
Una vez que el tubo de almacenamiento de muestras de LCR TransFix/EDTA
4. Utilice el volumen adecuado de LCR para garantizar unos resultados
contenga una muestra biológica, debe considerarse como un «peligro
precisos.
absoluto» (Código de residuos de la UE 18-01-03) y debe eliminarse de acuerdo
5. No utilizar una vez superada la fecha de caducidad de los tubos y del
con la normativa local relativa a los residuos clínicos.
envase.
6. No diluya o añada otros componentes al tubo antes de usarlo. Referencias
7. No utilice tinciones de viabilidad celular en muestras tratadas con 1. Use of TransFix Cerebrospinal Fluid Storage Tubes Prevents Cellular Loss
TransFix, ya que se fijan instantáneamente. and Enhances Flow Cytometric Detection of Malignant Haematological
8. Los tubos de almacenamiento de muestras de LCR TransFix/EDTA son Cells after 18 Hours of Storage. (El uso de tubos de almacenamiento de
monouso. No los reutilice. líquido cefalorraquídeo TransFix evita la pérdida celular y mejora la
9. Las muestras tratadas con TransFix y cualquier material que entre en detección por citometría de flujo de células hematológicas malignas tras
contacto con ellas deben manipularse como potenciales fuentes de 18 horas de almacenamiento). De Jongste et. al., Cytometry Part
transmisión de infecciones. B 2014; 86B: 272– 279.
10. Evite que las muestras tratadas con TransFix entren en contacto con la 2. Guidelines on the use of Multicolour Flow Cytometry in the Diagnosis of
piel y las membranas mucosas. El conservante celular es irritante, y en Haematological Neoplasms. (Orientaciones sobre el uso de la citometría
caso de contacto debe enjuagarse con agua y jabón de forma inmediata. de flujo multicolor en el diagnóstico de las neoplasias hematológicas).
11. Puede encontrar la Ficha de Datos de Seguridad en www.cytomark.co.uk Johansson et. al., British Journal of Haematology, 2014, 165, 455-488.
o llamando al +44(0)1280 827460. 3. Flow Cytometric Characterization of Cerebrospinal Fluid Cells.
(Caracterización por citometría de flujo de las células del líquido
Reactivos
cefalorraquídeo). De Graaf MT et. al., Cytometry, 2011, 80B: 271-281.
TransFix/EDTA es un líquido claro de color verde que contiene formaldehído y
4. ESCCA/ISCCA Protocol for the Analysis of Cerebrospinal Fluid by
otros productos químicos.
Multiparametric Flow‐cytometry in Hematological Malignancies.
Señales de deterioro del producto (Protocolo de la ESCCA/ISCCA para el análisis del líquido cefalorraquídeo
1. Turbidez o precipitado visible en el TransFix/EDTA. mediante citometría de flujo multiparamétrica en neoplasias
2. Cambio de color del TransFix/EDTA. hematológicas). Del Principe et. al., Cytometry, 2020; 1– 13.
3. Cambio del TransFix/EDTA de líquido a sólido.
Si aparecen señales de deterioro del producto, no lo utilice y póngase
inmediatamente en contacto con Cytomark llamando al +44(0)1280 827460 o a
través de [email protected].

IFU CSF CE IVD, Revisión 2, 2023-01

 Español

/ EDTA Tubo de almacenamiento de muestras de de LCR

Figura 1 b. CD45+CD3+CD8+ Células T

Solicitud de información 12
En caso de necesitar asistencia, llame al +44(0)1280 827460 o escriba un correo
a [email protected]. Puede encontrar más información online en 10

Eventos (miles)
www.cytomark.co.uk. Con cada lote de tubos de almacenamiento de muestras
de LCR TransFix/EDTA se puede proporcionar un certificado de conformidad. 8

En caso de incidente grave, póngase en contacto con el fabricante legal Caltag 6

Medsystems (a través de Cytomark) y con la autoridad competente del Estado
miembro donde esté establecido el usuario y/o el paciente. 4

Descripción del producto Números de 2

catálogo
Tubo de almacenamiento de muestras de 0.25-1 mL de TF-CSF-S-2 0
LCR TransFix/EDTA (2 tubos) 0 0.5 1.5 3 24 48 72
Tubo de almacenamiento de muestras de 0.25-1 mL de TF-CSF-S-10 Tiempo (horas)
LCR TransFix/EDTA (10 tubos) Control TransFix/EDTA RPMI Basal Completo
RPMI Complete
Tubo de almacenamiento de muestras de 0.25-1 mL de TF-CSF-S-50
LCR TransFix/EDTA (50 tubos)
Tubo de almacenamiento de muestras de 1-4 mL de TF-CSF-L-2 Figura 1 c. CD45+CD3-CD19+CD20+ Células B
LCR TransFix/EDTA (2 tubos)
5
Tubo de almacenamiento de muestras de 1-4 mL de TF-CSF-L-10
LCR TransFix/EDTA (10 tubos)
4
Tubo de almacenamiento de muestras de 1-4 mL de TF-CSF-L-50

Evento (miles)
LCR TransFix/EDTA (50 tubos)
3
Cytomark, una división de Caltag Medsystems Ltd.
2
Caltag Medsystems Ltd, Whiteleaf Business Centre, 11
Little Balmer, Buckingham, MK18 1TF, Reino Unido 1

0
Advena Ltd, Tower Business Centre, 2nd Flr, 0 0.5 1.5 3 24 48 72
Tower Street, Swatar, BKR 4013, Malta Tiempo (horas)
Control TransFix/EDTA RPMI Basal Completo
RPMI Complete

DATOS REPRESENTATIVOS (INFORME P-CSF-005 Duración de la estabilización

de las muestras de LCR tratadas con TransFix/EDTA (MC009), Caltag Figura 1 d. CD45+CD3-CD56+ Células NK
Medsystems Ltd 2021- no publicado).
6

Las figuras 1 a-e. muestran la recuperación de monocitos, subgrupos de células 5

T, células NK y células B a partir de LCR simulado (Thermo Fisher Scientific
Eventos (miles)

4
MAS-CSF (CSF-MP) enriquecido con PBMC) estabilizado con TransFix/EDTA,
RPMI basal y RPMI completo, y comparado con LCR simulado no estabilizado 3
(control) en diferentes puntos temporales. Se promediaron los datos de tres
réplicas de cada muestra en cada punto temporal. Cada réplica fue de 100 µL 2
de muestra a aproximadamente 1x106 PBMC/mL, lo que supone un total de
aproximadamente 100 000 PBMC por réplica en cada tubo. 1

Figura 1 a. CD45+CD3+CD4+ Células T 0

0 0.5 1.5 3 24 48 72
20
Tiempo (horas)

15 Control TransFix/EDTA RPMI Basal RPMI Completo

Complete
Eventos (miles)

10 Figura 1 e. CD45+CD14+ Monocitos

14
5
12
0 10
Eventos (miles)

0 0.5 1.5 3 24 48 72 8
Tiempo (horas)
6
Control TransFix/EDTA RPMI Basal RPMI Complete
Completo
4
2
0
0 0.5 1.5 3 24 48 72
Tiempo (horas)
Control TransFix/EDTA RPMI Basal RPMI Completo
Complete

IFU CSF CE IVD, Revisión 2, 2023-01

 Français

/ Tube de stockage d'échantillon EDTA LCR

MODE D'EMPLOI Si des signes de détérioration du produit apparaissent, ne pas l'utiliser et

contacter Cytomark immédiatement au : +44(0)1280 827460 ou
Utilisation attendue [email protected].
Les tubes de stockage d'échantillons de liquide céphalorachidien (LCR)
TransFix®/EDTA sont destinés à la stabilisation et au stockage d'échantillons de Conditions de stockage avant utilisation et stabilité
LCR humain pour la caractérisation des leucocytes infiltrés par cytométrie de Les tubes de stockage d'échantillons TransFix/EDTA LCR sont expédiés dans des
flux. La récupération des sous-ensembles leucocytaires infiltrés peut être conditions ambiantes, entre des températures de -5°C et 26°C. Une isolation
effectuée sur une période de 3 jours après la stabilisation. supplémentaire peut être nécessaire pour l'expédition dans des conditions de
température extrêmes. Les tubes de stockage d'échantillons TransFix/EDTA LCR
Les tubes de stockage d'échantillons TransFix/EDTA LCR sont destinés au
diagnostic in vitro. doivent être conservés à 2-8°C à l'arrivée.
Les tubes de stockage d'échantillons TransFix/EDTA LCR non utilisés sont stables
Résumé et principes entre 2 et 8°C jusqu'à 12 mois ou jusqu'à la date de péremption indiquée sur
Dans les échantillons de LCR, la caractérisation qualitative et quantitative des l'étiquette.
leucocytes infiltrés par cytométrie de flux est un outil important pour
l'identification de diverses immunodéficiences et maladies hématologiques [1- Les tubes de stockage d'échantillons TransFix/EDTA LCR sont fournis dans des
4]. Cependant, le nombre de leucocytes présents dans le LCR est souvent très sachets en aluminium scellés.
faible et se dégrade rapidement. Par conséquent, l'évaluation de ces cellules
Mode d'emploi
dépend d'une analyse urgente qui n'est pas toujours possible. 1. Recueillir le liquide céphalo-rachidien (LCR) par ponction lombaire
Les sous-ensembles de leucocytes peuvent être distingués par les antigènes de conformément à la norme clinique pertinente.
surface cellulaire à l'aide d'anticorps fluorescents et de la cytométrie de flux. Le 2. TransFix / EDTA LCR 1-4 mL Tube: Transférer soigneusement 1-4 mL de
stabilisateur TransFix agit en préservant les antigènes de surface cellulaire des LCR dans le tube de 5 mL à l'aide d'une pipette manuelle dès que possible
sous-ensembles de lymphocytes jusqu'à ce que le traitement et l'analyse et au plus tard 1 heure après la ponction lombaire.
puissent être effectués. 3. TransFix / EDTA LCR 0.25-1 mL Tube: Transférer soigneusement 0.25-1
mL de LCR dans le tube de 2 mL à l'aide d'une pipette manuelle dès que
Il a été démontré que l'ajout de LCR dans les tubes de stockage d'échantillons
TransFix/EDTA LCR au moment de la ponction lombaire prolonge de manière possible et au plus tard 1 heure après la ponction lombaire.
4. Mélanger délicatement l'échantillon traité par TransFix et fermer le
significative l'intégrité de ces leucocytes par rapport aux échantillons non
stabilisés ou à la stabilisation par d'autres méthodes [1, voir Données bouchon.
représentatives Figure 1]. TransFix/EDTA préserve les antigènes de surface des 5. Conserver / transporter l'échantillon traité par TransFix jusqu'à 72 heures
à 2-8°C.
cellules jusqu'à ce que le traitement et l'analyse puissent être effectués [1, 2].
6. Colorez et analysez votre échantillon de LCR stabilisé selon votre
Les tubes de stockage d'échantillons TransFix/EDTA LCR 1-4 mL consistent en des protocole habituel de cytométrie en flux du LCR (N.B. voir Notes).
flacons en polypropylène de 5 mL contenant 0.2 mL de TransFix/EDTA adaptés à
la stabilisation de 1-4 mL de LCR. Remarques
1. Il est recommandé de valider tous les conjugués d'anticorps en
Les tubes de stockage d'échantillons TransFix/EDTA LCR 0.25-1 mL consistent en association avec les tubes de stockage d'échantillons TransFix/EDTA LCR
des flacons en polypropylène de 2 mL contenant 0.05 mL de TransFix/EDTA avant de les utiliser.
adaptés à la stabilisation de 0.25-1 mL de LCR. 2. Faire preuve de prudence lors de la mise en œuvre de stratégies de
Précautions et mises en garde synchronisation automatique car les positions de diffusion de la lumière
1. Le tube de stockage d'échantillons TransFix/EDTA LCR est destiné à être des cellules stabilisées par TransFix peuvent différer de celles des cellules
utilisé comme indiqué dans ce document. Il s'agit d'un produit de non traitées.
« diagnostic in vitro » destiné à un usage professionnel uniquement. 3. Le marquage des lymphocytes doit être effectué sur CD45+/SSc.
2. Les tubes de stockage d'échantillons TransFix/EDTA LCR sont uniquement 4. En cas de calcul du nombre absolu de cellules, la dilution avec
destinés à l'analyse par cytométrie en flux. TransFix/EDTA doit être prise en compte. C'est-à-dire que pour un
3. Les tubes de stockage d'échantillons TransFix/EDTA LCR doivent être échantillon de 1 mL, ajuster le nombre absolu de cellules en multipliant le
conservés à 2-8°C. Ne pas congeler. résultat par 1,2. Pour un échantillon de 2 mL, ajuster le nombre absolu
4. Utilisez le volume correct de LCR pour garantir des résultats précis. de cellules en multipliant le résultat par 1,1, etc.
5. Ne pas utiliser après la date d'expiration figurant sur les tubes et Mise au rebut
l'emballage. TransFix/EDTA (code de déchet UE 18-01-06) contient du formaldéhyde qui doit
6. Ne pas diluer ou ajouter d'autres composants dans le tube avant être éliminé conformément aux réglementations locales. Évitez de le jeter dans
utilisation. les systèmes de drainage et dans l'environnement.
7. Ne pas utiliser de colorants de viabilité cellulaire sur les échantillons
traités avec TransFix car ils sont fixés instantanément. Lorsque le tube de stockage d'échantillons TransFix/EDTA LCR contient un
8. Les tubes de stockage d'échantillons TransFix/EDTA LCR sont à usage échantillon biologique, il doit être considéré comme un « danger absolu » (code
unique. Ne pas réutiliser. de déchet UE 18-01-03) et son élimination doit être conforme aux
9. Les échantillons traités par TransFix et tous les matériaux entrant en réglementations locales concernant les déchets cliniques.
contact avec lui doivent être manipulés comme s'ils étaient susceptibles Références
de transmettre une infection.
1. L'utilisation de tubes de stockage de liquide céphalorachidien TransFix
10. Évitez tout contact des échantillons traités par TransFix avec la peau et les prévient la perte cellulaire et améliore la détection cytométrique en flux
muqueuses. Le conservateur cellulaire est un irritant et tout contact doit des cellules hématologiques malignes après 18 heures de stockage. De
être immédiatement lavé à l'eau et au savon.
Jongste et. al., Cytometry Part B 2014 ; 86B : 272- 279.
11. La fiche de données de sécurité peut être obtenue sur 2. Lignes directrices sur l'utilisation de la cytométrie en flux multicolore dans
www.cytomark.co.uk ou en appelant le +44(0)1280 827460. le diagnostic des néoplasmes hématologiques. Johansson et. al., British
Réactifs Journal of Haematology, 2014, 165, 455-488.
TransFix/EDTA est un liquide vert clair contenant du formaldéhyde et d'autres 3. Caractérisation cytométrique en flux des cellules du liquide
produits chimiques. céphalorachidien. De Graaf MT et. al., Cytometry, 2011, 80B : 271-281.
4. Protocole ESCCA/ISCCA pour l'analyse du liquide céphalorachidien par
Indications de détérioration du produit cytométrie en flux multiparamétrique dans les hémopathies malignes. Del
1. Trouble ou précipité visible dans le TransFix/EDTA. Principe et. al., Cytometry, 2020 ; 1- 13.
2. Changement de couleur du TransFix/EDTA qui passe d'un liquide vert
clair.
3. Changement du TransFix/EDTA de liquide à solide.

IFU CSF CE IVD, Revision 2, 2023-01

 Français

/ Tube de stockage d'échantillon EDTA LCR

Informations de commande Figure 1 b. Cellules T CD45+CD3+CD8+.

Veuillez appeler Cytomark au +44(0)1280 827460 ou envoyer un courriel à
[email protected] pour obtenir de l'aide. Des informations 12
supplémentaires sont disponibles en ligne sur www.cytomark.co.uk. Un
10

Événements (milliers)
certificat de conformité peut être fourni avec chaque lot de tubes de stockage
d'échantillons TransFix/EDTA LCR. 8
En cas d'incident grave, contactez le fabricant légal Caltag Medsystems (via
Cytomark) et l'autorité compétente de l'État membre où l'utilisateur et/ou le 6
patient est établi.
4
Description de produit Numéros de
catalogue 2

TransFix / EDTA LCR 0.25-1 mL Tube de stockage TF-CSF-S-2 0

d'échantillon (2 tubes) 0 0.5 1.5 3 24 48 72
Durée (heures)
TransFix / EDTA LCR 0.25-1 mL Tube de stockage TF-CSF-S-10
d'échantillon (2 tubes) Control TransFix/EDTA RPMI Basal RPMI Complete
TransFix / EDTA LCR 0.25-1 mL Tube de stockage TF-CSF-S-50
d'échantillon (2 tubes) Figure 1 c. Cellules B CD45+CD3-CD19+CD20+.
TransFix / EDTA LCR 1-4 mL Tube de stockage TF-CSF-L-2 5
d'échantillon (2 tubes)
4

Événements (milliers)
TransFix / EDTA LCR 1-4 mL Tube de stockage TF-CSF-L-10
d'échantillon (10 tubes)
3
TransFix / EDTA LCR 1-4 mL Tube de stockage TF-CSF-L-50
d'échantillon (50 tubes)
2

Cytomark, une filiale de Caltag Medsystems Ltd. 1

Caltag Medsystems Ltd, Whiteleaf Business Centre, 11
Little Balmer, Buckingham, MK18 1TF, Royaume-Uni. 0
0 0.5 1.5 3 24 48 72
Advena Ltd, Tower Business Centre, 2nd Flr, Durée (heures)
Tower Street, Swatar, BKR 4013, Malte. Contrôle TransFix/EDTA RPMI Basal RPMI Complete

Figure 1 d. Cellules NK CD45+CD3-CD56+

DONNÉES REPRÉSENTATIVES (RAPPORT P-CSF-005 Durée de stabilisation 6
des échantillons de LCR traités avec TransFix/EDTA (MC009), Caltag
Medsystems Ltd 2021- non publié) 5
Événements (milliers)

Les figures 1 a-e. montrent la récupération des monocytes, des sous-ensembles 4

de cellules T, des cellules NK et des cellules B à partir de LCR factice (Thermo
Fisher Scientific MAS-CSF (CSF-MP) dopé avec des PBMC) stabilisé avec 3
TransFix/EDTA, RPMI basal et RPMI complet, et comparé au LCR factice non
stabilisé (contrôle) à différents moments. Les données de trois réplicats pour 2
chaque échantillon ont été moyennées à chaque point de temps. Chaque
1
réplique correspondait à 100µL d'échantillon à environ 1x106 PBMC/mL, soit un
total d'environ 100,000 PBMC par réplique dans chaque tube. 0
Figure 1 : a. Cellules T CD45+CD3+CD4+. 0 0.5 1.5 3 24 48 72
Durée (heures)
20
18 Contrôle TransFix/EDTA RPMI Basal RPMI Complete
Événements (milliers)

16
14
12 Figure 1 e. Monocytes CD45+CD14+
10
8 14
6 12
Événements (milliers)

4
2 10
0 8
0 0.5 1.5 3 24 48 72
6
Durée (heures)
4
Contrôle TransFix/EDTA RPMI Basal RPMI Complete
2
0
0 0.5 1.5 3 24 48 72
Time (hours)
Contrôle TransFix/EDTA RPMI Basal RPMI Complete

IFU CSF CE IVD, Revision 2, 2023-01

 Italiano

/ EDTA CSF Provetta per la conservazione dei campioni

ISTRUZIONI PER L'USO Se si verificano indicazioni di deterioramento del prodotto, non utilizzare e
contattare immediatamente Cytomark al numero: +44(0)1280 827460 o
Uso previsto [email protected].
Le provette per la conservazione dei campioni TransFix®/EDTA Cerebrospinal Condizioni di conservazione e stabilità prima dell'uso
Fluid (CSF) sono destinate alla stabilizzazione e alla conservazione di campioni di
liquido cerebrospinale umano per la caratterizzazione dei globuli bianchi Le provette per la conservazione dei campioni TransFix/EDTA CSF vengono
infiltrati mediante citometria a flusso. Il recupero dei sottoinsiemi leucocitari spedite in condizioni ambientali, a temperature comprese tra -5°C e 26°C.
infiltrati può essere realizzato in un periodo di 3 giorni dopo la stabilizzazione. Potrebbe essere necessario un ulteriore isolamento per la spedizione in
condizioni di temperatura estreme. Le provette per la conservazione dei
Le provette per la conservazione dei campioni TransFix/EDTA CSF sono per uso campioni TransFix/EDTA CSF devono essere conservate a 2-8°C all'arrivo.
diagnostico in vitro.
Le provette per la conservazione dei campioni TransFix/EDTA CSF inutilizzate
Riassunto e principi sono stabili a 2-8°C fino a 12 mesi o fino alla data di scadenza riportata
sull'etichetta.
All'interno dei campioni di CSF, la caratterizzazione qualitativa e quantitativa dei
leucociti infiltrati tramite citometria a flusso è uno strumento importante per Le provette per la conservazione dei campioni TransFix/EDTA CSF sono fornite in
l'identificazione di varie immunodeficienze e malattie ematologiche [1-4]. buste di alluminio sigillate.
Tuttavia, il numero di leucociti presenti nel CSF è spesso molto basso e si
degradano rapidamente. Pertanto, la valutazione di queste cellule dipende da Istruzioni per l'uso
un'analisi urgente che non è sempre possibile. 1. Raccogliere il liquido cerebrospinale (CSF) mediante puntura lombare
Sottoinsiemi di leucociti possono essere distinti in base agli antigeni della secondo lo standard clinico pertinente.
superficie cellulare utilizzando anticorpi fluorescenti e citometria a flusso. Lo 2. TransFix / EDTA CSF Provetta per la conservazione dei campioni da 1-4
stabilizzatore TransFix agisce preservando gli antigeni della superficie cellulare mL: Trasferire con cautela, il prima possibile e non oltre 1 ora dopo la
dei sottoinsiemi di linfociti fino a quando non è possibile eseguire l'elaborazione puntura lombare, 1-4 mL di liquido cerebrospinale nella provetta da 5 mL
e l'analisi. utilizzando una pipetta manuale.
3. TransFix / EDTA CSF Provetta per la conservazione dei campioni da 0.25-
L'aggiunta di CSF alle provette per la conservazione dei campioni TransFix/EDTA 1 mL: Trasferire con cautela, il prima possibile e non oltre 1 ora dopo la
CSF, al momento della puntura lombare, ha dimostrato di estendere puntura lombare, 0.25-1 mL di liquido cerebrospinale nella provetta da 2
significativamente l'integrità di questi leucociti rispetto a campioni non mL utilizzando una pipetta manuale. Mescolare delicatamente il
stabilizzati o stabilizzati con altri metodi [1, vedi Dati rappresentativi Figura 1]. campione trattato con TransFix e chiudere il tappo.
TransFix/EDTA conserva gli antigeni della superficie cellulare fino a quando non 4. Conservare/trasportare il campione trattato con TransFix fino a 72 ore a
è possibile eseguire l'elaborazione e l'analisi [1, 2]. 2-8°C.
Le provette per la conservazione dei campioni TransFix/EDTA CSF da 1-4 mL sono 5. Colorare e analizzare il campione di CSF stabilizzato secondo il consueto
costituite da fiale in polipropilene da 5 mL contenenti 0,2 mL di TransFix/EDTA protocollo di citometria a flusso del CSF (NB - vedi le note)
adatte a stabilizzare 1-4 mL di CSF.
Note
Le provette per la conservazione dei campioni TransFix/EDTA CSF da 0.25-1 mL
sono costituite da fiale in polipropilene da 2 mL contenenti 0,05 mL di 1. Si raccomanda che prima dell'uso tutti i coniugati anticorpali siano
TransFix/EDTA adatte a stabilizzare 0.25-1 mL di CSF. convalidati in associazione con le provette per la conservazione dei
campioni TransFix/EDTA CSF.
Precauzioni e avvertenze 2. Usare cautela nell'implementare strategie di gating automatico, poiché le
posizioni di dispersione della luce delle cellule stabilizzate dal TransFix
1. La provetta per la conservazione dei campioni TransFix/EDTA CSF è
possono differire da quelle delle cellule non trattate.
destinata all'uso come specificato nel presente documento. Si tratta di un
3. Il gating per i linfociti deve essere eseguito su CD45+/SSc.
prodotto " Diagnostico in vitro" solo per uso professionale.
4. Se si calcola la conta cellulare assoluta, è necessario tenere conto della
2. Le provette per la conservazione dei campioni TransFix/EDTA CSF sono
diluizione con TransFix/EDTA. Ad esempio, per un campione di 1 mL,
solo per l'uso con analisi di citometria a flusso.
regolare la conta cellulare assoluta moltiplicando l'output per 1,2. Per
3. Le provette per la conservazione dei campioni TransFix/EDTA CSF devono
una dimensione del campione di 2 mL, regolare il conteggio assoluto delle
essere conservate a 2-8°C. Non congelare.
cellule moltiplicando l'output per 1,1 e così via.
4. Utilizzare il volume corretto di CSF per garantire risultati accurati.
5. Non usare dopo la data di scadenza riportata sulle provette e sulla Smaltimento
confezione.
6. Non diluire o aggiungere altri componenti alla provetta prima dell'uso. TransFix/EDTA (Codice rifiuti UE 18-01-06) contiene formaldeide che deve essere
7. Non usare coloranti per la vitalità cellulare su campioni trattati con smaltita in conformità alle normative locali. Evitare lo smaltimento nei sistemi
TransFix perché vengono fissati istantaneamente. di drenaggio e nell'ambiente.
8. Le provette per la conservazione dei campioni TransFix/EDTA CSF sono Una volta che la provetta di conservazione del campione TransFix/EDTA CSF da
solo monouso. Non riutilizzare. contiene un campione biologico, deve essere considerata un "pericolo assoluto"
9. I campioni trattati con TransFix e tutti i materiali che entrano in contatto (Codice rifiuti UE 18-01-03) e lo smaltimento deve avvenire in conformità alle
con esso devono essere maneggiati come se fossero in grado di normative locali relative ai rifiuti clinici.
trasmettere infezioni.
10. Evitare il contatto dei campioni trattati con TransFix con la pelle e le Riferimenti
mucose. Il conservante cellulare è irritante e qualsiasi contatto deve
1. Use of TransFix Cerebrospinal Fluid Storage Tubes Prevents Cellular Loss
essere lavato immediatamente con acqua e sapone.
and Enhances Flow Cytometric Detection of Malignant Haematological
11. La scheda di dati di sicurezza può essere richiesta su www.cytomark.co.uk
Cells after 18 Hours of Storage. De Jongste et. al., Cytometry Part
o chiamando il numero +44(0)1280 827460.
B 2014; 86B: 272– 279.
Reagenti 2. Guidelines on the use of Multicolour Flow Cytometry in the Diagnosis of
Haematological Neoplasms. Johansson et. al., British Journal of
TransFix/EDTA è un liquido verde chiaro contenente formaldeide e altre Haematology, 2014, 165, 455-488.
sostanze chimiche. 3. Flow Cytometric Characterization of Cerebrospinal Fluid Cells. De Graaf
MT et. al., Cytometry, 2011, 80B: 271-281.
Indicazioni di deterioramento del prodotto
4. ESCCA/ISCCA Protocol for the Analysis of Cerebrospinal Fluid by
1. Nuvolosità o precipitato visibile nel TransFix/EDTA. Multiparametric Flow‐cytometry in Hematological Malignancies. Del
1. Cambio di colore di TransFix/EDTA da liquido verde chiaro. Principe et. al., Cytometry, 2020; 1– 13.
2. Cambio del TransFix/EDTA da liquido a solido.

IFU CSF CE IVD, Revisione 2, 2023-01

 Italiano

/ EDTA CSF Provetta per la conservazione dei campioni

Informazioni sull'ordine Figura 1 b. CD45+CD3+CD8+ Cellule T
Si prega di chiamare la Cytomark al numero +44(0)1280 827460 o di inviare
un'email a [email protected] per assistenza. Ulteriori informazioni sono 12
disponibili online su www.cytomark.co.uk. Un certificato di conformità può
10
essere fornito con ogni lotto di provette per la conservazione dei campioni

Eventi (migliaia)
TransFix/EDTA CSF. 8
In caso di incidente grave, contattare il produttore legale Caltag Medsystems
(tramite Cytomark) e l'autorità competente dello Stato membro in cui è stabilito 6
l'utente e/o il paziente. 4

2
Descrizione del prodotto Numeri di
catalogo 0
TransFix / EDTA CSF Provetta per la conservazione dei TF-CSF-S-2 0 0.5 1.5 3 24 48 72
campioni da 0.25-1 mL (2 provette) Tempo (ore)
TransFix / EDTA CSF Provetta per la conservazione dei TF-CSF-S-10
campioni da 0.25-1 mL (10 provette) Control TransFix/EDTA RPMI Basal RPMI Complete
TransFix / EDTA CSF Provetta per la conservazione dei TF-CSF-S-50
campioni da 0.25-1 mL (50 provette) Figura 1 c. CD45+CD3-CD19+CD20+ Cellule B
TransFix / EDTA CSF Provetta per la conservazione dei TF-CSF-L-2
campioni da 1-4 mL (2 provette) 5
TransFix / EDTA CSF Provetta per la conservazione dei TF-CSF-L-10
campioni da 1-4 mL (10 provette) 4

Eventi (migliaia)
TransFix / EDTA CSF Provetta per la conservazione dei TF-CSF-L-50
campioni da 1-4 mL (50 provette) 3

Cytomark, una divisione di Caltag Medsystems Ltd. 2

Caltag Medsystems Ltd, Whiteleaf Business Centre, 11 1

Little Balmer, Buckingham, MK18 1TF, Regno Unito
0
0 0.5 1.5 3 24 48 72
Advena Ltd, Tower Business Centre, 2nd Flr, Tempo (ore)
Tower Street, Swatar, BKR 4013, Malta
Control TransFix/EDTA RPMI Basal RPMI Complete

DATI RAPPRESENTATIVI (P-CSF-005 REPORT Lunghezza di stabilizzazione dei Figura 1 d. CD45+CD3-CD56+ Cellule NK
campioni di CSF trattati con TransFix/EDTA (MC009), Caltag Medsystems Ltd
2021– non pubblicato) 6
La figura 1 ae. mostra il recupero di monociti, sottoinsiemi di cellule T, cellule 5
NK e cellule B dal Mock CSF (Thermo Fisher Scientific MAS-CSF (CSF-MP) con
Eventi (migliaia)

PBMC) stabilizzato con TransFix/EDTA, RPMI basale e RPMI completo, e 4

confrontato con Mock CSF non stabilizzato (controllo) a vari punti temporali. I
3
dati di tre replicati per ogni campione sono stati mediati ad ogni punto
temporale. Ogni replicato era 100 µL di campione a circa 1x106 PBMC/mL, 2
quindi un totale di circa 100.000 PBMC per replicato in ciascuna provetta.
1
Figura 1 a. CD45+CD3+CD4+ Cellule T
0
20 0 0.5 1.5 3 24 48 72
Tempo (ore)
15 Control TransFix/EDTA RPMI Basal RPMI Complete
Eventi (migliaia)

10 Figura 1 e. CD45+CD14+ monociiti

5 14
12
0
Eventi (migliaia)

10
0 0.5 1.5 3 24 48 72
Tempo (ore) 8
6
Control TransFix/EDTA RPMI Basal RPMI Complete
4
2
0
0 0.5 1.5 3 24 48 72
Tempo (ore)
Control TransFix/EDTA RPMI Basal RPMI Complete

IFU CSF CE IVD, Revisione 2, 2023-01

 Lietuvių k.
/ EDTA CSF mėgintuvėlis

NAUDOJIMO INSTRUKCIJOS TransFix/EDTA CSF mėgintuvėliai yra supakuoti maišelyje su folija.

Naudojimo paskirtis Naudojimo instrukcijos

TransFix®/EDTA cerebrospinalinio skysčio (toliau – CSF) mėgintuvėliai yra skirti 1. Surinkite juosmens punkcijos cerebrospinalinį skystį (CSF) pagal atitinkamą
žmogaus CSF mėginiams stabilizuoti ir laikyti, kad būtų galima apibūdinti klinikinį standartą.
infiltruotus baltuosius kraujo kūnelius pagal srautinės citometrijos metodus. 2. TransFix / EDTA CSF 1–4 mL mėgintuvėlis: Kuo greičiau, bet ne vėliau kaip
Infiltruotus leukocitų pogrupius galima atkurti per 3 dienas po stabilizavimo. per 1 valandą po juosmens punkcijos, pipete atsargiai įpilkite 1–4 mL CSF į
5 mL mėgintuvėlį.
TransFix/EDTA CSF mėgintuvėliai skirti in vitro diagnostikai. 3. TransFix / EDTA CSF 0.25-1 mL mėgintuvėlis: Kuo greičiau, bet ne vėliau
Santrauka ir principai kaip per 1 valandą po juosmens punkcijos, pipete atsargiai įpilkite 0.25-1
CSF mėginiuose kokybinis ir kiekybinis infiltruotų leukocitų apibūdinimas mL CSF į 2 mL mėgintuvėlį.
srautinės citometrijos metodu yra svarbi priemonė įvairioms imunodeficitinėms 4. Atsargiai sumaišykite „TransFix“ apdorotą mėginį ir uždarykite dangtelį.
ir hematologinėms ligoms nustatyti [1-4]. Tačiau CSF esančių leukocitų skaičius 5. Laikykite / transportuokite „TransFix“ apdorotą mėginį per 72 valandas 2-
dažnai yra labai mažas ir greitai sumažėja, todėl reikia skubiai atlikti šių ląstelių 8 °C temperatūroje.
analizę, bet tai ne visada įmanoma. 6. Dažykite ir analizuokite stabilizuotą CSF mėginį pagal įprastą CSF srautinės
citometrijos protokolą (Pastaba: žr. skyrių „Pastabos“)
Leukocitų pogrupius galima atskirti pagal ląstelių paviršiaus antigenus,
naudojant fluorescencinius antikūnus ir srautinę citometriją. „TransFix“ Pastabos
stabilizatorius išsaugo limfocitų pogrupių ląstelių paviršiaus antigenus tol, kol 1. Prieš naudojimą rekomenduojama patvirtinti visus antikūnų konjugatus su
bus galima atlikti analizę. TransFix/EDTA CSF mėgintuvėliais.
2. Būkite atsargūs vykdydami automatinio uždarymo strategijas, nes
Įrodyta, kad CSF supylimas į TransFix/EDTA CSF mėgintuvėlius juosmens
„TransFix“ stabilizuotų ląstelių šviesos sklaidos padėtis gali skirtis nuo
punkcijos metu reikšmingai padidina šių leukocitų vientisumą nei naudojant
neapdorotų ląstelių.
nestabilius mėginius arba stabilizavimą kitais metodais [1, žr. reprezentatyvius
3. Uždarant limfocitus, reikia atlikti CD45+/SSc.
duomenis 1 pav.]. TransFix/EDTA išsaugo ląstelių paviršiaus antigenus tol, kol
4. Skaičiuojant absoliutų ląstelių skaičių reikia atsižvelgti į praskiedimą
bus galima atlikti analizę [1, 2].
TransFix/EDTA, t. y. 1 mL mėginio dydį pakoreguokite absoliutų ląstelių
TransFix/EDTA CSF 1-4 mL mėgintuvėlius sudaro 5 mL polipropileno buteliukai, skaičių padauginę iš išvesties 1,2. Jei mėginio dydis yra 2 mL, koreguokite
kuriuose yra 0,2 mL TransFix/EDTA ir tinka stabilizuoti 1-4 mL CSF. absoliutų ląstelių skaičių padauginę iš išvesties 1,1 ir pan.
TransFix/EDTA CSF 0.25-1 mL mėgintuvėlius sudaro 2 mL polipropileno Šalinimas
buteliukai, kuriuose yra 0,05 mL TransFix/EDTA ir tinka stabilizuoti 0.25-1 mL TransFix/EDTA (ES atliekų kodas 18-01-06) sudėtyje yra formaldehido, kuris turi
CSF. būti šalinamas laikantis vietinių taisyklių. Nešalinkite į kanalizaciją ir aplinką.
Atsargumo priemonės ir įspėjimai Kai TransFix/EDTA CSF mėgintuvėlyje yra biologinis mėginys. Jis turi būti
1. TransFix/EDTA CSF mėgintuvėlis skirtas naudoti, kaip nurodyta šiame laikomas „absoliučiu pavojumi“ (ES atliekų kodas 18-01-03) ir šalinamas laikantis
dokumente. Šis „In Vitro diagnostinis“ produktas, skirtas tik specialistų vietinių klinikinių atliekų šalinimo taisyklių.
naudojimui.
2. TransFix/EDTA CSF mėgintuvėliai skirti naudoti tik srautinei citometrijos Informacijos šaltiniai:
analizei. 1. „TransFix“ cerebrospinalinio skysčio mėgintuvėlių naudojimas padeda
3. TransFix/EDTA CSF mėgintuvėliai turi būti laikomi 2–8 °C temperatūroje. išvengti ląstelių praradimo ir pagerėja piktybinių hematologinių ląstelių
Neužšaldykite. srautinis citometrinis aptikimas po 18 valandų. De Jongste ir. kt.,
4. Norėdami gauti tikslius rezultatus, naudokite teisingą CSF kiekį. Citometrijos B dalis 2014; 86B: 272–279.
5. Nenaudokite pasibaigus galiojimo laikui, nurodytam ant mėgintuvėlio ir 2. Daugiaspalvės srautinės citometrijos naudojimo gairės diagnozuojant
pakuotės. hematologinius navikus. Johansson ir. kt., British Journal of Hematology,
6. Prieš naudojimą neskieskite ir nepilkite į mėgintuvėlį kitų komponentų. 2014, 165, 455–488.
7. Nenaudokite ląstelių gyvybingumo dažų mėginiuose, apdorotuose 3. Cerebrospinalinio skysčio ląstelių srautinės citometrijos apibūdinimas. De
„TransFix“, nes jie iš karto užfiksuojami. Graaf MT ir. kt., Citometrija, 2011, 80B: 271–281.
8. TransFix/EDTA CSF yra tik vienkartinio naudojimo mėgintuvėliai. Jų 4. ESCCA/ISCCA protokolas, skirtas cerebrospinalinio skysčio analizei
pakartotinai naudoti negalima. naudojant daugiaparametrinę srautinę citometriją piktybinių
9. „TransFix“ apdorotus mėginius ir visas su jais besiliečiančias medžiagas hematologinių navikų atvejais. Del Principe ir. kt., Citometrija, 2020; 1–13.
reikia tvarkyti taip, tarsi jie perduotų infekciją. Užsakymo informacija
10. Venkite „TransFix“ apdorotų mėginių sąlyčio su oda ir gleivine. Ląstelių Jei reikia pagalbos, skambinkite „Cytomark“ telefonu +44(0)1280 827460 arba
konservantas yra dirginanti medžiaga ir patektus ant odos reikia nedelsiant rašykite el. laišką [email protected]. Papildomos informacijos galima
nuplauti muilu ir vandeniu. rasti internete www.cytomark.co.uk. Atitikties sertifikatas gali būti pateiktas prie
11. Saugos duomenų lapą galima rasti internete www.cytomark.co.uk arba kiekvienos TransFix/EDTA CSF mėgintuvėlių partijos.
gauti paskambinus telefonu +44(0)1280 827460.
Rimto incidento atveju susisiekite su legaliu gamintoju Caltag Medsystems (per
Reagentai Cytomark) ir valstybės narės, kurioje yra vartotojas ir (arba) pacientas,
TransFix/EDTA yra skaidrus žalias skystis, kurio sudėtyje yra formaldehido ir kitų kompetentinga institucija.
cheminių medžiagų.
Produkto aprašymas Katalogo
Sugedusio produkto požymiai numeriai
1. TransFix/EDTA matomas drumzlės arba nuosėdos. TransFix / EDTA CSF 0.25-1 mL mėgintuvėlis (2 tūbelės) TF-CSF-S-2
2. TransFix/EDTA skaidrios žalio skysčio spalvos pasikeitimas. TransFix / EDTA CSF 0.25-1 mL mėgintuvėlis (10 tūbelės) TF-CSF-S-10
3. TransFix/EDTA skysčio sukietėjimas. TransFix / EDTA CSF 0.25-1 mL mėgintuvėlis (50 tūbelės) TF-CSF-S-50
Jei yra produkto gedimo požymių, nenaudokite ir nedelsdami susisiekite su TransFix / EDTA CSF 1-4 mL mėgintuvėlis (2 tūbelės) TF-CSF-L-2
„Cytomark“: +44(0)1280 827460 arba rašykite [email protected]. TransFix / EDTA CSF 1-4 mL mėgintuvėlis (10 tūbelės) TF-CSF-L-10
TransFix / EDTA CSF 1-4 mL mėgintuvėlis (50 tūbelės) TF-CSF-L-50
Laikymo sąlygos ir stabilumas prieš naudojimą
TransFix/EDTA CSF mėgintuvėliai vežami aplinkos sąlygomis nuo -5 °C iki 26 °C
temperatūroje. Jei gabenama ekstremaliomis temperatūros sąlygomis, gali
prireikti papildomos izoliacijos. Atvežti TransFix/EDTA CSF mėgintuvėliai turi būti
laikomi 2-8 °C temperatūroje.
Nepanaudoti TransFix/EDTA CSF mėgintuvėliai išlieka stabilūs 2-8 °C
temperatūroje apie 12 mėnesių arba iki etiketėje nurodytos galiojimo datos.

IFU CSF CE IVD, Peržiūra 2, 2023-01

 Lietuvių k.
/ EDTA CSF mėgintuvėlis

„Cytomark“, „Caltag Medsystems Ltd.“ padalinys 1 c. pav. CD45+CD3-CD19+CD20+ B ląstelės

5
„Caltag Medsystems Ltd“, Whiteleaf Business Centre, 11
Little Balmer, Buckingham, MK18 1TF, UK
4

Įvykiai (tūkst.)
„Advena Ltd“, Tower Business Centre, 2nd Flr, 3
Tower Street, Swatar, BKR 4013, Malta
2

REPREZENTATYVŪS DUOMENYS (P-CSF-005 ATASKAITA CSF mėginių, apdorotų 1

TransFix/EDTA, stabilizavimo trukmė (MC009), „Caltag Medsystems Ltd“ 2021 –
nepaskelbta) 0
0 0.5 1.5 3 24 48 72
1 a-e. pav. rodomas monocitų, T ląstelių pogrupių, NK ląstelių ir B ląstelių Laikas (valandos)
atkūrimas iš „Mock CSF“ („Thermo Fisher Scientific MAS-CSF“ (CSF-MP) Control TransFix/EDTA RPMI Basal RPMI Complete
sustiprintas su PBMC), stabilizuoto naudojant „TransFix“/EDTA, bazinį RPMI bei
pilną RPMI ir palyginamas su nestabiliu „Mock CSF“ (kontrolinis) įvairiais laiko
tarpsniais. Atlikus tris bandymus su kiekvienu mėginiu, duomenys buvo 1 d. pav. CD45+CD3-CD56+ NK ląstelės
vidutiniškai apskaičiuoti pagal kiekvieną laiko tarpsnį. Kiekvienas bandymas buvo
6
atliktas su mėginiu 100 µL maždaug 1x106 PBMC/mL, taigi iš viso kiekviename
mėgintuvėlyje buvo apie 100 000 PBMC. 5
1 a. pav. CD45+CD3+CD4+ T ląstelės

Įvykiai (tūkst.)
4
20
3

15 2
Įvykiai (tūkst.)

1
10
0
0 0.5 1.5 3 24 48 72
5
Laikas (valandos)

0 Control TransFix/EDTA RPMI Basal RPMI Complete

0 0.5 1.5 3 24 48 72
Laikas (valandos) 1 e. pav. CD45+CD14+ Monocitai
Control TransFix/EDTA RPMI Basal RPMI Complete
14
12
1 b. pav. CD45+CD3+CD8+ T ląstelės
10
Įvykiai (tūkst.)

12 8
10 6
Įvykiai (tūkst.)

8 4
2
6
0
4 0 0.5 1.5 3 24 48 72
2 Laikas (valandos)
Control TransFix/EDTA RPMI Basal RPMI Complete
0
0 0.5 1.5 3 24 48 72
Laikas (valandos)
Control TransFix/EDTA RPMI Basal RPMI Complete

IFU CSF CE IVD, Peržiūra 2, 2023-01

 Nederlands

/ EDTA CSF-monsteropslagbuis
GEBRUIKSAANWIJZING
Beoogd gebruik Opslagomstandigheden en stabiliteit vóór gebruik
TransFix®/EDTA cerebrospinale vloeistof (CSF) -monsteropslagbuisjes zijn TransFix/EDTA CSF-monsteropslagbuisjes worden verzonden onder
bedoeld voor de stabilisatie en opslag van humane CSF-monsters voor omgevingsomstandigheden, tussen temperaturen van -5°C tot 26°C. Extra
karakterisering van geïnfiltreerde witte bloedcellen door middel van isolatie kan nodig zijn voor verzending tijdens extreme
flowcytometrie. Herstel van geïnfiltreerde leukocytensubsets kan worden temperatuursomstandigheden. TransFix/EDTA CSF-monsteropslagbuisjes
bereikt tijdens een periode van 3 dagen na stabilisatie. moeten worden bewaard bij 2-8°C.
TransFix/EDTA CSF-monsteropslagbuisjes zijn voor in-vitrodiagnostisch gebruik. Ongebruikte TransFix/EDTA CFS-monsteropslagbuisjes blijven stabiel bij 2-8°C
gedurende maximaal 12 maanden of tot de vervaldatum op het etiket.
Samenvatting en principes
Binnen CSF-monsters is de kwalitatieve en kwantitatieve karakterisering van TransFix/EDTA CSF-monsteropslagbuisjes worden geleverd in verzegelde
geïnfiltreerde leukocyten via flowcytometrie een belangrijk hulpmiddel voor de foliezakjes.
identificatie van verschillende immuundeficiënties en hematologische ziekten Gebruiksaanwijzing
[1-4]. Het aantal leukocyten in CSF is echter vaak erg laag en wordt snel 1. Verzamel cerebrospinale vloeistof (CSF) via lumbaalpunctie volgens de
afgebroken. Daarom is de beoordeling van deze cellen afhankelijk van een toepasselijke klinische standaard.
dringende analyse, wat niet altijd mogelijk is. 2. TransFix / EDTA CSF-monsteropslagbuis van 1-4 mL: Breng zo snel
Subsets van leukocyten kunnen op basis van de antigenen aan het celoppervlak mogelijk en niet later dan 1 uur na de lumbaalpunctie voorzichtig 1-4 mL
worden onderscheiden met behulp van fluorescerende antilichamen en CSF over in de 5 mL buis met behulp van een handmatige pipet.
flowcytometrie. De TransFix stabilisator werkt door de antigenen aan het 3. TransFix / EDTA CSF-monsteropslagbuis van 0.25-1 mL: Breng zo snel
celoppervlak te preserveren totdat de verwerking en de analyse uitgevoerd mogelijk en niet later dan 1 uur na de lumbaalpunctie voorzichtig 0.25-1
kunnen worden. mL CSF over in de 2 mL buis met behulp van een handmatige pipet.
4. Meng het met TransFix behandelde monster voorzichtig en sluit de dop.
Het is aangetoond dat toevoeging van CSF aan TransFix/EDTA CSF- 5. Bewaar/transporteer het met TransFix behandelde monster maximaal 72
monsteropslagbuisjes op het moment van lumbaalpunctie de integriteit van uur bij 2-8°C.
deze leukocyten aanzienlijk vergroot in vergelijking met niet-gestabiliseerde 6. Kleur en analyseer uw gestabiliseerde CSF-monster volgens uw
monsters of stabilisatie met andere methoden [1, zie representatieve gegevens gebruikelijke CSF-flowcytometrieprotocol (NB zie opmerkingen)
figuur 1]. TransFix/EDTA bewaart de celoppervlakte-antigenen totdat
verwerking en analyse kan worden uitgevoerd [1, 2]. Opmerkingen
1. Het wordt aanbevolen dat alle antilichaamconjugaten vóór gebruik
TransFix/EDTA CSF-monsteropslagbuisjes van 1-4 mL bestaan uit 5 mL
polypropyleen flacons met 0,2 mL TransFix/EDTA geschikt voor het stabiliseren worden gevalideerd in combinatie met TransFix/EDTA CSF-
monsteropslagbuisjes.
van 1-4 mL CSF.
2. Wees voorzichtig bij het implementeren van automatische
TransFix/EDTA CSF-monsteropslagbuisjes van 0.25-1 mL bestaan uit 2 mL poortstrategieën, omdat de lichtverstrooiingsposities van cellen die
polypropyleen flacons met 0,05 mL TransFix/EDTA geschikt voor het stabiliseren gestabiliseerd zijn door TransFix kunnen verschillen van die van
van 0.25-1 mL CSF. onbehandelde cellen.
3. Gating voor lymfocyten moet worden uitgevoerd op CD45+/SSc.
Voorzorgsmaatregelen en waarschuwingen
4. Bij het berekenen van het absolute celgetal moet rekening worden
1. TransFix/EDTA CSF-monsteropslagbuisje is bedoeld voor gebruik zoals
gehouden met de verdunning met TransFix/EDTA. Dat wil zeggen, voor een
gespecificeerd in dit document. Het is een 'in-vitrodiagnostisch' product
steekproefomvang van 1 mL past u het absolute aantal cellen aan door de
dat uitsluitend voor professioneel gebruik is bestemd.
uitvoer met 1,2 te vermenigvuldigen. Voor een monster van 2 mL past u
2. TransFix/EDTA CSF-monsteropslagbuisjes zijn alleen bedoeld voor gebruik
het absolute aantal cellen aan door de uitvoer te vermenigvuldigen met
met flowcytometrie-analyse.
1,1, enz.
3. TransFix/EDTA CSF-monsteropslagbuisjes moeten worden bewaard bij 2-
8°C. Bevries niet. Verwijdering
4. Gebruik het juiste volume CSF om nauwkeurige resultaten te garanderen. TransFix/EDTA (EU-afvalcode 18-01-06) bevat formaldehyde dat volgens de
5. TransFix mag niet gebruikt worden na de vervaldatum op de buisjes en de lokale voorschriften moet worden verwijderd. Vermijd afvoer in afvoersystemen
verpakking. en het milieu.
6. Voor gebruik niet verdunnen of andere componenten aan het buisje
toevoegen. Zodra het TransFix/EDTA CSF-monsteropslagbuisje een biologisch monster
7. Gebruik geen levensvatbare celvlekken op monsters die met TransFix zijn bevat, moet dit worden beschouwd als 'Absoluut gevaarlijk afval' (EU-afvalcode
18-01-03) en moet de verwijdering worden uitgevoerd in overeenstemming met
behandeld, aangezien deze onmiddellijk worden gefixeerd.
8. TransFix/EDTA CSF-monsteropslagbuisjes zijn uitsluitend bedoeld voor de lokale voorschriften met betrekking tot klinisch afval.
eenmalig gebruik. Niet geschikt voor hergebruik. Referenties
9. Met TransFix behandelde monsters en alle andere materialen die ermee in 1. Het gebruik van TransFix-buisjes voor de opslag van cerebrospinale
contact komen, moeten worden behandeld alsof zij infecties kunnen vloeistof voorkomt celverlies en verbetert de flowcytometrische detectie
overbrengen. van kwaadaardige hematologische cellen na 18 uur opslag. De Jongste et.
10. Vermijd contact van met TransFix behandelde monsters met de huid en al., Cytometrie Deel B 2014; 86B: 272- 279.
slijmvliezen. Het celverduurzamingsmiddel is een irriterende stof en elke 2. Richtlijnen voor het gebruik van meerkleurige flowcytometrie bij de
aanraking met het middel dient direct te worden afgewassen met water en diagnose van hematologische neoplasmata. Johansson et. al., British
zeep. Journal of Hematology, 2014, 165, 455-488.
11. Het veiligheidsinformatieblad kan worden verkregen op 3. Flowcytometrische karakterisering van cerebrospinale vloeistofcellen. De
www.cytomark.co.uk of door te bellen naar +44(0)1280 827460. Graaf MT et. al., Cytometrie, 2011, 80B: 271-281.
4. ESCCA/ISCCA-protocol voor de analyse van hersenvocht door
Reagentia
multiparametrische flowcytometrie bij hematologische maligniteiten. Del
TransFix/EDTA is een heldere groene vloeistof die formaldehyde en andere
chemicaliën bevat. Principe et. al., Cytometrie, 2020; 1– 13.
Bestelinformatie
Indicaties van productverslechtering
Neem contact op met Cytomark via +44 (0) 1280 827460 of stuur een e-mail naar
1. Zichtbare troebelheid of bezinksel in de TransFix/EDTA.
2. Kleurverandering van een helder groene TransFix/EDTA vloeistof. [email protected] voor hulp. Aanvullende informatie is online te vinden
op www.cytomark.co.uk. Bij elke batch TransFix/EDTA CSF-
3. TransFix/EDTA verandert van vloeibaar naar vast.
monsterbewaarbuisjes kan een conformiteitscertificaat worden geleverd.
Gebruik TransFix niet indien indicaties van productverslechtering optreden en
Neem bij een ernstig incident contact op met de wettelijke fabrikant Caltag
neem onmiddellijk contact op met Cytomark via: +44(0)1280 827460 of
Medsystems (via Cytomark) en de bevoegde autoriteit van de lidstaat waar de
[email protected].
gebruiker en/of patiënt is gevestigd.
IFU CSF CE IVD, revisie 2, 2023-01
 Nederlands

/ EDTA CSF-monsteropslagbuis
Figuur 1b. CD45+CD3+CD8+ T-cellen
Productbeschrijving Catalogusnummers 12
TransFix / EDTA CSF-monsteropslagbuis van 0.25-1 TF-CSF-S-2
mL (2 buisjes) 10

Voorvallen (duizenden)
TransFix / EDTA CSF-monsteropslagbuis van 0.25-1 TF-CSF-S-10
mL (10 buisjes) 8
TransFix / EDTA CSF-monsteropslagbuis van 0.25-1 TF-CSF-S-50
6
mL (50 buisjes)
TransFix / EDTA CSF-monsteropslagbuis van 1-4 mL TF-CSF-L-2 4
(2 buisjes)
TransFix / EDTA CSF-monsteropslagbuis van 1-4 mL TF-CSF-L-10 2
(10 buisjes)
0
TransFix / EDTA CSF-monsteropslagbuis van 1-4 mL TF-CSF-L-50
(50 buisjes) 0 0.5 1.5 3 24 48 72
Tijd (uren)
Cytomark, een afdeling van Caltag Medsystems Ltd. Control TransFix/EDTA RPMI Basal RPMI Complete

Caltag Medsystems Ltd, Whiteleaf Business Centre, 11

Figuur 1c. CD45+CD3-CD19+CD20+ B-cellen
Little Balmer, Buckingham, MK18 1TF, VK
5

Gebeurtenissen (duizenden)
Advena Ltd, Tower Business Centre, 2e Flr, Tower
4
Street, Swatar, BKR 4013, Malta
3

REPRESENTATIEVE GEGEVENS (P-CSF-005-RAPPORT Duur van stabilisatie 2

van CSF-monsters behandeld met TransFix/EDTA (MC009), Caltag Medsystems
Ltd 2021– niet gepubliceerd) 1

Figuur 1 a-e toont herstel van monocyten, subsets van T-cellen, NK-cellen en B- 0
cellen van Mock CSF (Thermo Fisher Scientific MAS-CSF (CSF-MP) verrijkt met 0 0.5 1.5 3 24 48 72
PBMC's) gestabiliseerd met TransFix/EDTA, basale RPMI en volledige RPMI, en Tijd (uren)
vergeleken met niet-gestabiliseerde Mock CSF (controle) op verschillende
tijdstippen. Voor elk monster werdt van de gegevens van drie herhalingen op Control TransFix/EDTA RPMI Basal RPMI Complete
elk tijdstip het gemiddelde genomen. Elke replica bevatte 100 µL monster met
ongeveer1x106 PBMC's/mL, dus een totaal van ongeveer 100.000 PBMC's per
Figuur 1 d. CD45+CD3-CD56+ NK-cellen
replica in elke buis.
6
Figuur 1a. CD45+CD3+CD4+ T-cellen
5
Voorvallen (duizenden)

20
4
Voorvallen (duizenden)

15
3

10 2

1
5
0
0 0.5 1.5 3 24 48 72
0
0 0.5 1.5 3 24 48 72 Tijd (uren)
Tijd (uren) Control TransFix/EDTA RPMI Basal RPMI Complete
Control TransFix/EDTA RPMI Basal RPMI Complete
Figuur 1 e. CD45+CD14+ monocyten

14
12
Voorvallen (duizenden)

10
8
6
4
2
0
0 0.5 1.5 3 24 48 72
Tijd (uren)
Control TransFix/EDTA RPMI Basal RPMI Complete

IFU CSF CE IVD, revisie 2, 2023-01

 Portuguese

/Tubo de Armazenamento de Amostras de LCR

INSTRUÇÕES DE UTILIZAÇÃO Condições e Estabilidade de Armazenamento Pré-Utilização
Os tubos de armazenamento de amostras TransFix / EDTA CSF são enviados em
Utilização Pretendida condições ambientais, a temperaturas de -5 °C a 26 °C. Pode ser necessário
Os Tubos de Armazenamento de Amostras de Líquido Cefalorraquidiano isolamento adicional para transporte durante condições extremas de
TransFix® / EDTA (LCR) destinam-se à estabilização e armazenamento de temperatura. Os Tubos de Armazenamento de Amostras TransFix / EDTA CSF
amostras de LCR humano para caracterização de glóbulos brancos infiltrados por devem ser armazenados a 2-8°C na chegada.
citometria de fluxo. A recuperação de subconjuntos de leucócitos infiltrados
Os Tubos de Armazenamento de Amostras LCR TransFix / EDTA não usados são
pode ser realizada ao longo de um período de 3 dias após a estabilização.
estáveis a 2-8°C até 12 meses ou até à data de validade indicada no rótulo.
Os Tubos de Armazenamento de Amostras de LCR TransFix / EDTA são para
Os Tubos de Armazenamento de Amostras de LCR TransFix / EDTA são
Utilização em Diagnóstico In Vitro.
fornecidos em embalagens de alumínio seladas.
Resumo e Princípios
Nas amostras de LCR, a caracterização qualitativa e quantitativa de leucócitos Instruções de Utilização
infiltrados via citometria de fluxo é uma ferramenta importante para a 1. Recolha o líquido cefalorraquidiano (LCR) por punção lombar de acordo
com o padrão clínico respetivo.
identificação de várias imunodeficiências e doenças hematológicas [1-4]. No
entanto, a quantidade de leucócitos presentes no LCR é com frequência muito 2. Tubo de Armazenamento de Amostras de LCR de 1-4 mL TransFix / EDTA:
baixa e degrada-se rapidamente. Portanto, a avaliação dessas células depende Transfira cuidadosamente 1-4 mL de LCR para o tubo de 5 mL usando uma
pipeta manual o mais rápido possível e no máximo 1 hora após a punção
de análises urgentes, o que nem sempre é possível.
lombar.
Os subconjuntos de leucócitos podem ser distinguidos por antígenos de 3. Tubo de Armazenamento de Amostras de LCR de 0.25-1 mL TransFix /
superfície celular usando anticorpos fluorescentes e citometria de fluxo. O EDTA: Transfira cuidadosamente 0.25-1 mL de LCR para o tubo de 2 mL
estabilizador TransFix atua preservando antígenos de superfície celular de usando uma pipeta manual o mais rápido possível e no máximo 1 hora após
subconjuntos de linfócitos até que o processamento e a análise possam ser a punção lombar.
realizados. 4. Misture suavemente a amostra tratada com TransFix e feche a tampa.
Foi demonstrado que a adição de LCR aos Tubos de Armazenamento de 5. Armazene / transporte a amostra tratada com TransFix até 72 horas a 2-8
Amostras de LCR TransFix / EDTA no momento da punção lombar prolonga °C.
significativamente a integridade desses leucócitos em comparação com 6. Manche e analise a amostra de LCR estabilizada de acordo com o protocolo
amostras não estabilizadas ou estabilização por outros métodos [1, ver Dados normal de citometria de fluxo de LCR (N.B. ver Notas)
representativos Figura 1]. O TransFix / EDTA preserva os antígenos da superfície Notes
celular até que o processamento e a análise possam ser realizados [1, 2]. 1. Recomenda-se que todos os conjugados de anticorpos sejam validados em
Os Tubos de Armazenamento de Amostras de LCR de 1-4 mL TransFix / EDTA associação com os Tubos de Armazenamento de Amostras de LCR TransFix
consistem em frascos de polipropileno de 5 mL contendo 0,2 mL de TransFix / / EDTA antes da utilização.
EDTA adequados para estabilizar 1-4 mL de LCR. 2. Tenha cuidado ao implementar estratégias de comutação automática, pois
as posições de dispersão de luz das células estabilizadas por TransFix
Os Tubos de Armazenamento de Amostras de LCR de 0.25-1 mL TransFix / EDTA
podem ser diferentes daquelas das células não tratadas.
consistem em frascos de polipropileno de 2 mL contendo 0,05 mL de TransFix /
3. A comutação para linfócitos deve ser realizada em CD45 + / SSc.
EDTA adequados para estabilizar 0.25-1 mL de LCR.
4. Caso esteja a calcular contagens de células absolutas, a diluição com
Precauções e Avisos TransFix / EDTA deve ser contabilizada. Ou seja, para um tamanho de
1. O Tubo de Armazenamento de Amostras de LCR TransFix / EDTA deve ser amostra de 1 mL, ajuste a contagem absoluta de células multiplicando a
usado conforme especificado neste documento. É um produto de saída por 1,2. Para um tamanho de amostra de 2 mL, ajuste a contagem
‘Diagnóstico In Vitro’ apenas para utilização profissional. absoluta de células multiplicando a saída por 1,1, etc.
2. Os Tubos de Armazenamento de Amostras de LCR TransFix / EDTA são
Tratamento
apenas para utilização em análise de citometria de fluxo.
O TransFix/EDTA (Código de Resíduos da UE 18-01-06) contém formaldeído que
3. Os Tubos de Armazenamento de Amostras de LCR TransFix / EDTA devem
deve ser eliminado de acordo com os regulamentos locais. Evite descartar em
ser armazenados a 2-8 ° C. Não congelar.
sistemas de drenagem e no meio ambiente.
4. Utilize o volume correto de LCR para garantir resultados precisos.
5. Não utilize após o prazo de validade nos tubos e embalagens. Uma vez que o Tubo de Armazenamento de Amostras LCR TransFix / EDTA
6. Não dilua ou adicione outros componentes ao tubo antes de utilizar. contém uma amostra biológica, ele deve ser considerado um "Perigo Absoluto"
7. Não utilize manchas de viabilidade celular em amostras tratadas com (Código de Resíduos da UE 18-01-03) e o descarte deve ser feito de acordo com
TransFix, pois elas são fixadas instantaneamente. os regulamentos locais sobre resíduos clínicos.
8. Os Tubos de Armazenamento de Amostras de LCR TransFix / EDTA são de
utilização única. Não reutilizar. Referências
1. A utilização de Tubos de Armazenamento de Líquido Cefalorraquidiano
9. As amostras tratadas com TransFix e todos os materiais que entram em
contacto com ele devem ser manuseados como se fossem capazes de TransFix evita a perda celular e melhora a deteção por citometria de fluxo
transmitir infeções. de células hematológicas malignas após 18 horas de armazenamento. De
Jongste et. al., Cytometry Part B 2014; 86B: 272-279.
10. Evitar o contacto das amostras tratadas com TransFix com a pele e
membranas mucosas. O conservante celular é irritante e qualquer 2. Diretrizes sobre a utilização da Citometria de Fluxo Multicolor no
Diagnóstico de Neoplasias Hematológicas. Johansson et. al., British Journal
contacto deve ser lavado imediatamente com água e sabão.
11. A Folha de Dados de Segurança pode ser obtida em www.cytomark.co.uk of Hematology, 2014, 165, 455-488.
3. Caracterização por Citometria de Fluxo de Células do Líquido
ou ligando para +44(0)1280 827460.
Cefalorraquidiano. De Graaf MT et. al., Cytometry, 2011, 80B: 271-281.
Reagentes 4. Protocolo ESCCA / ISCCA para a Análise do Líquido Cefalorraquidiano por
O TransFix/EDTA é um líquido verde claro que contém formaldeído e outros Citometria de Fluxo Multiparamétrica em Doenças Malignas
produtos químicos. Hematológicas. Del Principe et. al., Citometria, 2020; 1–13.
Indícios de Deterioração do Produto Informações sobre encomendas
1. Obscuridade ou precipitado visível no TransFix/EDTA. Ligue para a Cytomark no telefone +44 (0) 1280 827460 ou envie um e-mail para
2. Mudança de cor do TransFix/EDTA de um líquido verde claro. [email protected] para obter assistência. Podem ser encontradas
3. O TransFix/EDTA muda de líquido para sólido. informações adicionais online em www.cytomark.co.uk. Pode ser fornecido um
certificado de conformidade com cada lote de Tubos de Armazenamento de
Caso haja indícios de deterioração do produto, não utilize e entre em contacto
Amostras LCR TransFix / EDTA.
imediatamente com a Cytomark em: +44(0)1280827460 ou
[email protected]. Em caso de incidente grave, contacte o fabricante legal Caltag Medsystems (via
Cytomark) e a autoridade competente do Estado-Membro onde o utilizador
e/ou doente está estabelecido.
IFU CSF CE IVD, Revision 2, 2023-01
 Portuguese

/Tubo de Armazenamento de Amostras de LCR

Figura 1 b. CD45+CD3+CD8+ Células T
Descrição do Produto Números do 12
Catálogo
Tubo de Armazenamento de Amostras de LCR de 0.25-1 TF-LCR-S-2 10

Eventos (milhares)
mL TransFix / EDTA (2 tubos)
Tubo de Armazenamento de Amostras de LCR de 0.25-1 TF-LCR-S-10 8
mL TransFix / EDTA (10 tubos)
6
Tubo de Armazenamento de Amostras de LCR de 0.25-1 TF-LCR-S-50
mL TransFix / EDTA (50 tubos) 4
Tubo de Armazenamento de Amostras de LCR de 1-4 mL TF-LCR-L-2
TransFix / EDTA (2 tubos) 2
Tubo de Armazenamento de Amostras de LCR de 1-4 mL TF-LCR-L-10
TransFix / EDTA (10 tubos) 0
Tubo de Armazenamento de Amostras de LCR de 1-4 mL TF-LCR-L-50 0 0.5 1.5 3 24 48 72
Tempo (horas)
TransFix / EDTA (50 tubos)
Control TransFix/EDTA RPMI Basal RPMI Complete
Cytomark, uma Divisão da Caltag Medsystems Ltd.
Figura 1 c. CD45+CD3-CD19+CD20+ Células B
Caltag Medsystems Ltd, Whiteleaf Business Centre, 11
Little Balmer, Buckingham, MK18 1TF, UK 5

Eventos (milhares)
Advena Ltd, Tower Business Centre, 2nd Flr,
Tower Street, Swatar, BKR 4013, Malta
3

DADOS REPRESENTATIVOS (RELATÓRIO P-LCR-005 Extensão da Estabilização 2

das Amostras de LCR tratadas com TransFix / EDTA (MC009), Caltag
Medsystems Ltd 2021– não publicado)
1

A Figura 1 a-e. mostra a recuperação de monócitos, subconjuntos de células T, 0

células NK e células B de LCR Simulado (Thermo Fisher Scientific MAS-LCR (LCR- 0 0.5 1.5 3 24 48 72
PM) incrementado com CMSP) estabilizados com TransFix / EDTA, RPMI basal e Tempo (horas)
RPMI completo, e em comparação com o LCR Simulado não estabilizado
(controle) em vários momentos específicos. Foi calculada a média dos dados de Control TransFix/EDTA RPMI Basal RPMI Complete
três réplicas para cada amostra em cada momento específico. Cada réplica era
100 µl de amostra a aproximadamente 1x106 CMSP / mL, portanto, um total de
Figura 1 d. CD45 + CD3-CD56 + Células NK
aproximadamente 100.000 CMSP por réplica em cada tubo.
Figura 1 a. CD45+CD3+CD4+ Células T 6

20 5
Eventos (milhares)

18
16 4
Eventos (milhares)

14 3
12
10 2
8
6 1
4
2 0
0 0 0.5 1.5 3 24 48 72
0 0.5 1.5 3 24 48 72 Tempo (horas)
Tempo (horas) Control TransFix/EDTA RPMI Basal RPMI Complete

Control TransFix/EDTA RPMI Basal RPMI Complete

Figura 1 e. CD45+CD14+ Monócitos

14
12
Eventos (milhares)

10
8
6
4
2
0
0 0.5 1.5 3 24 48 72
Tempo (horas)
Control TransFix/EDTA RPMI Basal RPMI Complete

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 Swedish

/ EDTA CSF Prov lagringsrör

BRUKSANVISNING Oanvända TransFix/EDTA CSF Provlagringsrör är stabila vid 2-8 °C i upp till 12
månader eller fram till utgångsdatumet på etiketten.
Avsedd användning
TransFix/EDTA CSF Prov förvaringsrör levereras i förseglade foliepåsar.
TransFix®/EDTA Cerebrospinal Fluid (CSF) Provlagringsrör är avsedda för
stabilisering och lagring av mänskliga CSF-prover för karakterisering av Bruksanvisning
infiltrerade vita blodkroppar genom flödescytometri. Återvinning av infiltrerade 1. Sa mLa cerebrospinalvätska (CSF) genom ländryggspunktion enligt relevant
leucocyte delmängder kan uppnås under en 3-dagarsperiod efter stabilisering. klinisk standard.
TransFix/EDTA CSF Prov förvaringsrör är för In Vitro Diagnostic Use. 2. TransFix / EDTA CSF 1-4 mL Prov förvaringsrör: Överför försiktigt 1-4 mL
CSF till 5 mL-röret med en manuell pipett så snart som möjligt och senast
Sammanfattning och principer 1 timme efter ländryggspunktion.
3. TransFix / EDTA CSF 0.25-1 mL Prov förvaringsrör: Överför försiktigt 0.25
Inom CSF-exemplar är kvalitativ och kvantitativ karakterisering av infiltrerade
-1 mL CSF till 2 mL-röret med en manuell pipett så snart som möjligt och
leukocyter via flödescytometri ett viktigt verktyg för identifiering av olika
senast 1 timme efter ländryggspunktion.
immunbrister och hematologic sjukdomar [1-4]. Antalet leukocyter som finns i
4. Blanda försiktigt det TransFix-behandlade provet och stäng locket.
CSF är dock ofta mycket lågt och bryts ned snabbt. Därför är bedömningen av
5. Förvara/transportera det TransFix-behandlade provet i upp till 72 timmar
dessa celler beroende av brådskande analys som inte alltid är möjlig.
vid 2-8 °C.
Undergrupper av leukocyter kan särskiljas genom cellytans antigener med 6. Färga och analysera ditt stabiliserade CSF-prov enligt ditt vanliga CSF-
fluorescerande antikroppar och flödescytometri. TransFix-stabilisatorn verkar flödescytometriprotokoll (N.B. se Anteckningar)
genom att bevara cellytans antigener av lymfocytundergrupper tills bearbetning
och analys kan utföras. Anteckningar
Tillsats av CSF till TransFix/EDTA CSF Provlagringsrör vid tidpunkten för 1. Det rekommenderas att alla antikroppskonjugat valideras i samband med
ländryggspunktion har visat sig avsevärt förlänga integriteten hos dessa leukocyter TransFix/EDTA CSF Provlagringsrör före användning.
jämfört med ostabiliserade prover eller stabilisering med andra metoder [1, se 2. Var försiktig när du implementerar automatiska gatingstrategier eftersom
representativa data Figure 1]. TransFix/EDTA bevarar cellytans antigener tills ljusspridningspositioner för celler som stabiliserats av TransFix kan skilja sig
bearbetning och analys kan utföras [1, 2]. från dem i obehandlade celler.
3. Gating för lymfocyter ska utföras på CD45+/SSc.
TransFix/EDTA CSF 1-4 mL Provlagringsrör består av 5 mL polypropylenflaskor
4. Vid beräkning av absoluta cellantal måste utspädningen med
som innehåller 0,2 mL TransFix/EDTA som lämpar sig för att stabilisera 1-4 mL
TransFix/EDTA redovisas. Dvs. för en provstorlek på 1 mL justera det
CSF.
absoluta cellantalet genom att multiplicera utdata med 1,2. För en
TransFix/EDTA CSF 0.25-1 mL Provlagringsrör består av 2 mL polypropylenflaskor provstorlek på 2 mL justera det absoluta cellantalet genom att multiplicera
som innehåller 0,05 mL TransFix/EDTA som lämpar sig för att stabilisera 0.25-1 utdata med 1,1 osv.
mL CSF.
Förfogande
Försiktighetsåtgärder och varningar
TransFix/EDTA (EU:s avfallskod 18-01-06) innehåller formaldehyd som ska
1. TransFix/EDTA CSF Provlagringsrör är avsett att användas enligt vad som kasseras i enlighet med lokala föreskrifter. Undvik att göra dig av med
anges i detta dokument. Det är en "In Vitro Diagnostic"produkt endast dräneringssystem och miljö.
för professionellt bruk.
När TransFix/EDTA CSF Provlagringsrör innehåller ett biologiskt prov måste det
2. TransFix/EDTA CSF Provlagringsrör är endast för användning med
betraktas som en "absolut fara" (EU:s avfallskod 18-01-03) och bortskaffandet
flödescytometrianalys.
är i enlighet med lokala bestämmelser om kliniskt avfall.
3. TransFix/EDTA CSF Prov förvaringsrör måste förvaras vid 2-8°C. Frys inte.
4. Använd rätt volym av CSF för att säkerställa korrekta resultat. Referenser
5. Använd inte efter utgångsdatumet på rören och förpackningen.
6. Späd inte ut eller tillsätt andra komponenter i röret före användning. 1. Användning av TransFix Cerebrospinal Fluid Storage Tubes förhindrar
7. Använd inte cellens livsduglighetsfläckar på prover som behandlats med cellulär förlust och förbättrar flöde cytometrisk detektion av maligna
TransFix eftersom de fixeras omedelbart. hematologiska celler efter 18 timmars lagring. De Jongste et. al. ,
8. TransFix/EDTA CSF Provlagringsrör är endast engångsbruk. Cytometri del B 2014; 86B: 272– 279.
Återanvändning inte. 2. Riktlinjer för användning av multikolor flöde cytometri i diagnos av
9. TransFix-behandlade prover och allt material som kommer i kontakt med hematologiska tumörer. Johansson et. al., British Journal of Haematology,
det bör hanteras som om det kan överföra infektion. 2014, 165, 455-488.
10. Undvik kontakt med TransFix-behandlade prover med huden och 3. Flöde Cytometrisk Characterization av Cerebrospinal Fluid Cells. De Graaf
slemhinnorna. Cellskyddsmedlet är irriterande och all kontakt ska tvättas MT et. al, Cytometri, 2011, 80B: 271-281.
bort med tvål och vatten omedelbart. 4. ESCCA/ISCCA Protocol för Analysis av Cerebrospinal Fluid av
11. Safety Data Sheet kan erhållas på www.cytomark.co.uk eller genom att Multiparametric Flågcytometri i Hematologiska Malignancies. Del
ringa +44(0)1280 827460. Principe et. al., Cytometri, 2020; 1– 13.

Reagenser Beställa information

TransFix/EDTA är en klargrön vätska som innehåller formaldehyd och andra Ring Cytomark på +44(0)1280 827460 eller e-post [email protected] för
kemikalier. hjälp. Ytterligare information finns online på www.cytomark.co.uk. Ett intyg om
överensstämmelse kan förses med varje sats TransFix/EDTA CSF
Indikationer på produktförsämring provlagringsrör.
1. Gru mLighet eller fällning synlig i TransFix/EDTA. I händelse av en allvarlig incident, kontakta den lagliga tillverkaren Caltag
2. Färgförändring av TransFix/EDTA från en klargrön vätska. Medsystems (via Cytomark) och den behöriga myndigheten i den medlemsstat
3. TransFix/EDTA byter från vätska till fast. där användaren och/eller patienten är etablerad.
Om indikationer på produktförsämring inträffar, använd inte och kontakta Produktbeskrivning Katalognu
Cytomark omedelbart på: +44(0)1280 827460 eller [email protected]. mmer
TransFix / EDTA CSF 0.25-1 mL Prov förvaringsrör (2 rör) TF-CSF-S-2
Förvaringsförhållanden och stabilitet före användning
TransFix / EDTA CSF 0.25-1 mL Prov förvaringsrör (10 rör) TF-CSF-S-10
TransFix/EDTA CSF Provlagringsrör levereras i omgivningsförhållanden, mellan TransFix / EDTA CSF 0.25-1 mL Prov förvaringsrör (50 rör) TF-CSF-S-50
temperaturer på -5°C till 26°C. Ytterligare isolering kan krävas för transport TransFix / EDTA CSF 1-4 mL Prov förvaringsrör (2 rör) TF-CSF-L-2
under extrema temperaturförhållanden. TransFix/EDTA CSF Prov förvaringsrör TransFix / EDTA CSF 1-4 mL Prov förvaringsrör (10 rör) TF-CSF-L-10
måste förvaras vid 2-8°C vid ankomsten. TransFix / EDTA CSF 1-4 mL Prov förvaringsrör (50 rör) TF-CSF-L-50
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/ EDTA CSF Prov lagringsrör

Cytomark, en avdelning inom Caltag Medsystems Ltd. Bild 1 c. CD45+CD3-CD19+CD20+ B-celler

Caltag Medsystems Ltd, Whiteleaf Business Centre, 11 5

Little Balmer, Buckingham, MK18 1TF, Storbritannien
4

Händelser (tusentals)
Advena Ltd, Tower Business Centre, 2nd Flr,
Tower Street, Swatar, BKR 4013, Malta 3

REPRESENTATIVA UPPGIFTER (P-CSF-005 RAPPORT Stabiliseringens längd för

1
CSF-prover behandlade med TransFix/EDTA (MC009), Caltag Medsystems Ltd
2021 – opublicerade)
0
Figur 1a-e. visar recovery av monocyter, T-cellsundergrupper, NK-celler och B- 0 0.5 1.5 3 24 48 72
celler från Mock CSF (Thermo Fisher Scientific MAS-CSF (CSF-MP) spetsade med Tid (timmar)
PBMCs) stabiliserade med TransFix/EDTA, basal RPMI och komplett RPMI, och
jämfört med ostabiliserade Mock CSF (kontroll) vid olika tidpunkter. Data från Control TransFix/EDTA RPMI Basal RPMI Complete
tre replikat för varje prov var genomsnittliga vid varje tidpunkt. Varje replikat var
100 μL prov vid cirka 1x106 PBMCs/mL, så totalt cirka 100 000 PBMCs per
replikat i varje rör.
Bild 1 d. CD45+CD3-CD56+ NK-celler
Bild 1 a. CD45+CD3+CD4+ T Celler
6
20
Händelser (tusentals) 5
Händelser (tusentals)

15
4

10 3

2
5
1

0 0
0 0.5 1.5 3 24 48 72 0 0.5 1.5 3 24 48 72
Tid (timmar) Tid (timmar)
Control TransFix/EDTA RPMI Basal RPMI Complete Control TransFix/EDTA RPMI Basal RPMI Complete

Bild 1 b. CD45+CD3+CD8+ T Celler Bild 1 e. CD45+CD14+ Monocyter

12 14
12
10
Händelser (tusentals)
Händelser (tusentals)

10
8
8
6
6
4 4
2 2

0 0
0 0.5 1.5 3 24 48 72 0 0.5 1.5 3 24 48 72
Tid (timmar) Tid (timmar)
Control TransFix/EDTA RPMI Basal RPMI Complete
Control TransFix/EDTA RPMI Basal RPMI Complete

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