Vektor bioteknologi
Download as PPTX, PDF2 likes8,127 views
Vektor merupakan molekul DNA seperti plasmid yang digunakan untuk memindahkan DNA target ke dalam sel inang. Plasmid adalah vektor yang umum digunakan karena berukuran kecil, dapat mereplikasi sendiri, dan membawa gen resistensi antibiotik untuk seleksi klon. DNA target dimasukkan ke dalam plasmid menggunakan enzim restriksi, kemudian plasmid rekombinan ditransformasikan ke dalam bakteri untuk mereplikasi DNA target.
Vektor bioteknologi
- 1. BIOTEKNOLOGI VEKTOR KELOMPOK 2 DEA YENNISA DESTA MANULANG HASANATI HARI ARASYD INDO SITI NURULAINI RIYANTI RANIKA RUSLIMA DEWI YATI
- 2. BIOTEKNOLOGI Vektor merupakan wahana untuk memindahkan DNA ke organisme inang baru yang dapat diekspresikan/bereplikasi dalam sel inang tersebut. VEKTOR Pengertian Vektor
- 3. Jenis-jenis Vektor Dikenal 4 macam vektor yang banyak digunakan dalam rekayasa genetika, yaitu : 1. Plasmid 2. Bakteriofage lambda 3. kosmid 4. Bakteriofage rantai tunggal (phage M 13) BIOTEKNOLOGI VEKTOR
- 4. Plasmid merupakan molekul DNA pada sel bakteri, berbentuk bulat kecil yang berbeda dan merupakan tambahan dari molekul DNA utama pada kromosom bakteri. Plasmid dapat mereplikasi DNAnya sendiri terlepas dari DNA pada kromosom. Berbagai tipe plasmid telah ditemukan pada sel bakteri. Pengertian Plasmid BIOTEKNOLOGI VEKTOR
- 5. Ciri-ciri Plasmid Molekul DNA sirkuler (ekstra kromosom), terdapat pada sel prokariot, seperti pada sel bakteri. Ukuran kecil,sehingga mudah diisolasi dalam keadaan utuh Memiliki paling tidak satu sekuen/urutan DNA sebagai titik asal replikasi (dapat memperbanyak diri tanpa bergantung pada genom/kromosom) Membawa satu atau lebih gen. Misalnya sifat resisten terhadap tetrasiklin dan ampisilin Contoh pBR 322, R-plasmid BIOTEKNOLOGI VEKTOR
- 7. Karakteristik Plasmid Yang Ideal Untuk Vektor Ukurannya kecil Memiliki sifat fenotip yang mudah untuk diseleksi Memiliki sisi pada gen fenotipnya untuk beberapa enzim restriksi sehingga mudah dipelajari BIOTEKNOLOGI VEKTOR
- 8. Jenis Plasmid Berdasarkan jumalah copy yang dimiliki plasmid 1. Low-copy number menghasilkan 1 sampai 2 copy/sel 2. High-copy number menghasilkan lebih dari 500/sel Berdasarkan penghambatan replikasi 1. Relaxed plasmid*, dimana replikasi plasmid tidak dihambat walaupun replikasi DNA kromosom sel inang di hambat 2. Stringen plasmid, jika replikasi DNA sel inang dihambat, maka replikasi pada plasmidnya juga dihambat Berdasarkan bentuknya 1. Covalently closed circles (DNA ccc)*, bentuk sirkuler untai ganda utuh 2. Open circles (DNA oc), DNA sirkuler untai ganda dengan satu rantai yang utuh *) disukai karena mudah untuk diamplifikasi serta mudah diisolasi dan dimanipulasi BIOTEKNOLOGI VEKTOR
- 9. Proses Penggunaan Plasmid Bakteri Untuk Mengklon Gen 1. DNA plasmid diisolasi dari bakteri dan DNA berisi gen yang dinginkan dari jenis sel lain misalnya gen yang mengkode suatu hormon. 2. Sepotong DNA yang berisi gen tersebut diselipkan ke dalam salah satu plasmid, yang kemudian menghasilkan DNA rekombinan 3. Plasmid rekombinan dikembalikan ke sel bakteri 4. Sel bakteri ditumbuhkan dalam kultur, kemudian membentuk klon sel. DNA asing yang disambungkang ke dalam plasmid tidak merusak kemampuan plasmid untuk bereplikasi di dalam sel bakteri dan gen yang diinginkan direplikasi bersama dengan plasmid begitu sel inangnya menjadi banyak. Dapat dikatakan gen itu telah diklon. 5. Identifikasi klon bakteri yang membawa gen yang diinginkan tersebut. 6. Aplikasi terakhir dari pengklonan gen dalam bakteri BIOTEKNOLOGI VEKTOR
- 10. Memasukkan DNA rekombinan (vektor yang berisi genom yang diiinginkan/disisipkan) ke dalam sel inang dapat dilakukan dengan : 1. Transformasi 2. Transfeksi 3. DNA-packaging 4. microinjection Memasukkan DNA Rekombinan Yang Terbentuk Ke Sel Inang BIOTEKNOLOGI VEKTOR
- 11. Transformasi Proses masuknya molekul DNA ke dalam sel hidup (baik sel prokariotik maupun sel eukariotik). BIOTEKNOLOGI VEKTOR Transfeksi Transfeksi pada dasarnya sama dengan transformasi hanya perbedaannya pada transfeksi yang maSuk bukan plasmid tetapi DNA phage atau virus.
- 12. DNA-packaging Proses pengemasan molekul DNA phage di dalam partikel phage. Microinjection Suatu cara memasukkan DNA dengan menggunakan jarum yang sangat kecil yang digunakan untuk menyuntikkan/memasukkan molekul DNA secara lansung ke inti sel yang di transformasi. BIOTEKNOLOGI VEKTOR
- 13. Ciri-ciri Vektor Yang Baik Untuk Diklonkan a. Cepat tumbuh b. Mudah tumbuh pada medium kultur yang murah c. Tidak patogenik d. Stabil dalam kultur Vektor yang paling sering digunakan yaitu E. coli, karena mempunyai sifat : tumbuh dengan cepat, kebutuhan nutrisi sederhana, informasi genetiknya sudah banyak diketahui dengan baik. BIOTEKNOLOGI VEKTOR
- 14. SEKIAN DAN TERIMA KASIH